• 加强初步数据[时间范围：2年]
  为了加强初步数据并研究BM中的ENAMPT水平与外周血（PB）室之间的相关性，以评估其在从较大的NDMM患者中收集的配对样品中的浓度，也使用更多的HDS作为对照。
• PD的潜在标记[时间范围：2年]
  通过比较从不同疾病（MGUS，闷烧多发性骨髓瘤-SMM-，NDMM，复发/难治性MM）的样品中比较eNAMPT质子水平的eNAMPT相关性作为疾病进展的潜在标志。
• 分析MM细胞和MM-BMSC室。 [时间范围：2年]
  通过分析MM细胞（已建立的人骨髓瘤细胞系，HMCL和原发性CD138+细胞）和MM-BMSC室的MM细胞来研究MM中ENAMPT产生的细胞来源。
• 调查ENAMPT角色[时间范围：2年]
  为了研究EMT在EMT特征获取中的作用（具有核型状态，突变，药物耐药表型等已知的分子特征），并定义了基本的分子机制。
• 确定效果[时间范围：2年]
  确定先前鉴定的中和αENAMPT抗体（AB）（13）对体外和体内MM-Xenogroghoft的小鼠模型中MM细胞的影响。

背景和初步数据：

多发性骨髓瘤（MM）的特征是骨髓（BM）中恶性血浆细胞的克隆膨胀，肿瘤细胞在BM中连续扩散。 BM基质细胞（BMSC）和MM细胞之间的连续相互作用支持肿瘤细胞的增殖，存活，迁移和耐药性。实际上，通过细胞因子产生和细胞细胞相互作用的BMSC控制MM细胞进入血液的能力，导致克隆细胞将克隆细胞的归巢或渗出到遥远的组织中，这又导致新的BM壁nir形成。

上皮到间质转化（EMT）是一种生物学现象，通过该现象，上皮细胞可以通过破坏细胞 - 细胞粘附和细胞极性，重塑细胞骨架和变化的细胞矩阵粘附，从而通过破坏细胞 - 细胞粘附和细胞极性来切换到间质表型。总体而言，这些事件可改善受影响细胞的迁移和侵入性特性。值得注意的是，EMT在正常的胚胎发育和组织再生过程中在生理上发生，但在癌细胞中，它与肿瘤的侵袭性特征有关，包括侵袭，转移，干性和耐药性。 EMT通常在实体瘤中观察到，但最近在MM中也进行了描述。在这种情况下，研究表明，与BM壁细分相关的缺氧通过获取EMT样特征会产生MM细胞的出口和传播，而EMT样特征又通过增加CXCR4表达而产生麻质外疾病（EMD）发育。

细胞代谢的改变已成为癌症的标志之一，可能是新型治疗方法可能针对的。在这些改变中，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）的生物合成已成为肿瘤中的新型治疗靶标。烟酰胺磷酸溴糖基转移酶（NAMPT）是哺乳动物细胞中NAD+产生的NAD+产生的速率限制酶，在包括MM在内的癌症中经常被上调，包括MM及其相关性，其相关性作为潜在的治疗靶点已被我们组广泛探索。然而，除了其作为关键代谢酶的细胞内活性外，NAMPT还存在于细胞外环境中，在那里它以ENAMPT的形式发挥细胞因子/脂肪因子样作用。尽管恩ampt分泌的基础机制仍有待阐明，但通常认为，eNAMPT分泌与细胞内NAMPT水平之间存在正相关。最近的证据表明，与几种血液学和固体肿瘤中的健康供体相比，癌症患者的ENAMPT血浆水平明显更高。在这种情况下，发现ENAMPT通过促进新的血管生成和影响免疫反应来促进癌细胞增殖和菌落形成等促肿瘤作用。

研究人员最近证明了ENAMPT在人类乳腺癌细胞中获得EMT中的关键作用。详细介绍，NAMPT过表达通过与N-钙粘着蛋白，Vimentin和Zeb1上调相关的E-钙粘着蛋白表达来促进癌细胞的成纤维细胞形态。重要的是，NAMPT诱导的EMT与NAMPT酶活性无关，也不与其产物水平烟酰胺单核苷酸（NMN）相关。相反，EMT似乎是通过ENAMPT通过增加TGFβ1产生来激活TGFβ信号通路的能力来介导的。

根据我们以前的观察，调查人员计划进一步研究MM生物学中的ENAMPT，并确定其在EMT获取代表癌症标志的疾病进展中的作用。提出提出的结果有望确定这种恶性肿瘤的新生物学脆弱性和用于疾病进展监测的创新生物标志物。

研究人员在新诊断的多发性骨髓瘤（NDMM）（n = 20）患者和健康供体（HDS; hds; n = 6）的PB样品中测量了初步测量的ENAMPT血清水平。有趣的是，发现肿瘤中的eNAPMT水平明显高于对照，这表明该细胞因子在MM生物学中的相关作用。这些数据为进一步研究MM中的ENAMPT角色提供了理由。

样品采集：

MM患者的回顾性样本将来自两个不同的数据库（Unito和Unige），并将其合并为一个专门针对该项目的新的特定数据库，以涵盖将要分析的疾病的不同阶段。

Unito将协调并执行将包含的样品的选择。 Unito将能够为这项研究提供所需数量的样品数量。最终，将从过去5年进行的先前临床试验中选择独立的100毫米患者样本。

通常，样本将符合以下参数：

• 18岁以上的男性和女性患者；
• 在不同疾病阶段（MGUS，SMM，NDMM和RRMM MM患者）中收集的PB衍生的血清样品
• 提供了足够的CD138+细胞或CD138+细胞的RNA；
• ≥2年的中位生存数据和治疗数据可用（无进展和总生存）；
• 在开始感兴趣的治疗之前获得的骨髓样品；
• 患者已同意将其样本用于研究目的。

对于各个可用的临床试验，将对可用样本和临床数据进行可行性评估和功率分析。进行此评估是为了决定，选择和构建一个数据集，该数据集为治疗有效性预测提供了科学和统计上可靠的证据。将分析的选定治疗方案（药物组合）涵盖MM治疗类别的完整谱，包括蛋白酶体抑制剂，免疫调节药物（IMID），烷基化剂，HDAC抑制剂和单克隆抗体。患者样本将从对照临床试验中得出，并根据以下药物或组合中的一种接受相同治疗方案的患者选择，其中包括接受相同治疗方案的患者：bortezomib（蛋白酶体抑制剂），Carfilzomib（蛋白酶体抑制剂），蛋白酶体抑制剂（蛋白酶体抑制剂），沙利度胺（IMID），Lenalidomide（IMID），Pomalidomide（IMID），Melphalan（烷基化剂），Panabinostat（HDAC抑制剂）和Daratumumab（单克隆抗体）。

样本量估计是基于以前能够显着确定正面和负面病例之间的生存差异的经验。鉴于效果大小至少为3，亚型的效应率为20％，因此100例的组大小足以显着确定亚型的预测值。 （较小的效果大小和较小的发病率可能与临床上无关）。

纳入标准：

• 18岁以上的男性和女性患者；
• 在不同疾病阶段（MGUS，SMM，NDMM和RRMM MM患者）中收集的PB衍生的血清样品
• 提供了足够的CD138+细胞或CD138+细胞的RNA；
• ≥2年的中位生存数据和治疗数据可用（无进展和总生存）；
• 在开始感兴趣的治疗之前获得的骨髓样品；
• 患者已同意将其样本用于研究目的。