25级久坐2级及以上肥胖[体重指数（BMI）> 35 kg/m2，腰围> 40英寸（男性）或> 35英寸（女性）]男性和女性（18-45岁）将参加这些实验。由于协议的侵入性质，将不会对18岁以下的个人进行调查。由于内皮功能与年龄相关的年龄相关，不超过45岁的个体不会被研究。种族，性别或社会经济地位将没有任何限制。妇女将是绝经前，将进行雌激素/孕激素激素避孕治疗（口服药丸，透皮斑块或阴道环），并将在七天的荷尔蒙避孕疗法的七天（安慰剂）阶段进行研究（可与早期的卵泡早期阶段相比正常的月经周期；通过血液雌二醇分析验证）。由于雌二醇对内皮功能的已知积极影响，确保在血浆雌二醇浓度最低的激素避孕治疗期间研究女性的一致性很重要。久坐的肥胖个体将在过去6个月内保持体重稳定，并患有代谢综合征。代谢综合征将根据美国国家胆固醇教育计划专家小组的第三次报告，针对成人的高血液胆固醇的检测，评估和治疗（成人治疗小组III）的第三次报告，根据代谢综合征的最广泛使用的标准定义代谢综合征。具有代谢综合征的个体至少具有以下三个：1）通过腰围测量的中央肥胖症（男性> 40英寸；女性> 35英寸）； 2）空腹血液甘油三酸酯> 150 mg/dl; 3）<40 mg/dl的男性血液HDL胆固醇，女性<50 mg/dl； 4）血压> 130/85 mmHg; 5）空腹血糖> 110 mg/dl，（不是每个ATP III）的2小时GTT葡萄糖为140-200 mg/dl。

在参加这项研究之前，受试者将接受病史，体格检查和心血管疾病和2型糖尿病的筛查。评估包括分级跑步机应力测试，血液化学，人体组成分析，通过双X射线吸收仪（DXA）和最小腰围（Xiphoid过程和脐带）测量。

将排除参加有目的的耐力运动训练（> 20分钟/天，> 1天/周）的排除受试者。绝经前女性受试者不得怀孕或哺乳，并且在过去的一年中必须定期进行月经周期。所有受试者将筛查心血管和周围血管疾病。服用可能影响中枢或周围循环的药物的个体是在非甾体类抗炎剂或血清素再摄取抑制剂上，烟雾或咀嚼烟草的患者患有糖尿病（空腹血糖> 125 mg/dl），高血压> 160/95 mmHg（个体）将排除糖尿病和高度高血压的高度，以使一组更统一的患者患有代谢综合征），充血性心力衰竭，心绞痛或周围血管疾病。具有严重心律不齐和/或急性心肌缺血的迹象反映在静止或运动过程中1 mm或更高的急性心肌缺血。患有慢性感染，中风引起的瘫痪，晚期帕金森氏病，严重的类风湿关节炎或其他严重的骨科问题，将排除锻炼训练任务的患者。在研究之前，至少2周，不允许受试者服用抗氧化剂，草药或维生素，因为这些药物中的某些药物已被证明可以改善内皮依赖性的血管舒张化。在实验的那天，将不允许受试者摄取咖啡因。如果在培训计划中重量变化超过5％，或者他们的运动依从性低于运动课程或总运动时间的90％，则将排除受试者。

时间范围：将在这笔赠款的第3-28个月期间招募，筛选，注册和测试对象。主题招聘程序和所需用品的采购将在项目的前两个月内发生。在随后的25个月中，以大约1个周期的速度，将在1个月的周期中进行其他招募以及对受试者的筛查和测试。因此，在运动训练8周之前和之后，将对参与者进行25个微透析实验，总共进行50个微透析实验。因此，该计划将在测试月平均每月需要2个微透析测试。这些受试者的测试包括六个小时的微透析程序。对样品的生化分析需要每个实验大约六个小时，并且每个实验还需要五个小时。需要额外的时间（每周五个小时）进行受试者招募，初步测试和随访。因此，鉴于分配的人员和百分比的努力，再加上不收集赠款的人员和资源，招聘和测试目标是现实的。

微透析（运动前后）：

在快速过夜之后，受试者将向希克纳实验室报告。虽然受试者静静地休息，但将从前蛋白静脉中获得过夜的禁食抽血，以分析传统（胰岛素，葡萄糖，脂质，C反应蛋白）和非传统的传统（Cytokines TNF-Alpha，IL-6，IL-6，，IL-6，，IL-6，，IL-6，，Cytokines蛋白）。 IL-13，细胞间粘附分子-1（ICAM-1），血管粘附分子-1（VCAM-1）和P--纤维素]心脏代谢疾病风险/使用ELISA的炎症标志物使用ELISA中的EMD Millipore或我们的临床分析仪（Beckman访问系统）。此外，使用Percipio Biosciences（Bioxytech GSH/GSSG）的试剂盒，将将血浆谷胱甘肽（GSH/GSSG）作为全身氧化应激的标记进行分析。

微透析手术七个微透析探针（CMA 20：10mm * 0.5毫米20kiLodalton截止膜，5 cm探针轴的长度，进气管和插入管20厘米； CMA/Microdiaysis，瑞典，瑞典，瑞典）将被插入3 cmm，插入3 cmm。股四头肌肌肉肌肉群（每腿3-4探针）使用局部麻醉（1％利多卡因）下的股外侧。根据表2中的时间表，使用CMA/102微灌注泵（CMA/微透析，瑞典）以2.0 µL/min的速度灌注探针。

控制灌注溶液将由含有5 mM乙醇的无菌盐溶液（用于血流/微血管交换措施）。最初，将其中两个探针用这种控制溶液灌注，而其他探针将用NADPH氧化酶抑制剂灌注。受试者将在坐下60分钟的同时休息，以便从探测插入和灌注液与当地环境中的平衡中恢复。阶段1：将在随后的30分钟内收集三个10分钟的透析液样品，以150 µl的150 µL聚乙烯收集小瓶中的含量（探针1）和存在（探针1）和NADPH氧化酶抑制剂的存在（探针3-7），以确定基础营养流动。并在SNP灌注之前充当探针内控制期（探针2）。阶段2：然后将更改第二探针中的灌注液溶液，以包含控制溶液加上50 mM硝化钠（SNP：控制非依赖性皮层依赖性变化）。 100 µM Amplex超级液体和1 U/ML辣根过氧化物酶（HRP）将在其他探针中添加到灌注液中，以测量体内H2O2的产生。然后将在随后的60分钟内收集三个二十分钟的透析样品，以在没有超氧化物歧化酶的情况下提供这些措施。阶段3：10 U/mL超氧化物歧化酶（SOD）将添加到含有灌注液的Amplex超级/HRP中。然后，将在随后的60分钟内收集三个二十分钟的透析样品，以提供SNP，1毫米载孢子蛋白，100nm Mitotempo，100UM Mitotempo+apocynin，100nm GKT 137831或100nm GKT 137831+Apocynin ins Inspence ins Inspence ins Inspence ins Inspcynnin，草皮。阶段4：然后将更改探针中的灌注液溶液，然后将更改以包含控制溶液加上50 mM ACH（确定内皮依赖性变化），或50 mM ACH + 1 mm apocynin，100nm mitotempo，100NM Mitotempo，100UM Mitotempo + Mitotempo + Mitotempo + Mitotempo + Apocynin，100nm GKT 137831或100NM GKT 137831+apocynin（确定抑制NADPH氧化酶或线粒体ROS的抑制是否可以改善内皮依赖性反应）。然后将探针灌注60分钟，以使其与当地环境平衡。然后将在随后的30分钟内收集三个十分钟的样品，以确定在存在和不存在NADPH氧化酶或线粒体ROS抑制的情况下ACH的营养流动效应。对于每个样品，将Amplex超级和HRP添加到灌注培养基中，将立即在实验室荧光计中立即测量30 µL透析液。对于测量血流的每个样品，透析液将在4°C下储存，并在24小时内分析乙醇（用于血流/微血管交换）。所有灌注液和透析液将受到光暴露。

如先前出版物30-32中所述，在灌注培养基中将包括微透析乙醇流出/流入比乙醇（5 mm），以监测微透析探针的营养血流/微血管交换。

确定有氧运动峰值能力（运动前后）：

所有受试者都将在入学研究后，在完成培训计划后再次在跑步机上进行标准化的最大运动测试。受试者将在5分钟的热身期间单独调整速度和倾斜度（3-6 km·HR-1，0-5％）。热身期后，受试者的O2和二氧化碳将通过开路肺活量测定法（TrueOne 2400; Parvomedics;犹他州盐湖城）连续监测。 VO2PEAK测试将使用坡道协议进行，在该协议中，速度将是恒定的，并且倾斜度将每两分钟增加2％，直到达到Vo2peak。起始速度将根据热身速度和心率进行单独调整，目的是在8-12分钟内获得VO2PEAK。

培训协议所有参与者将在八周内的非连续天进行三次有氧运动锻炼训练。运动将包括在跑步机上行走/奔跑。受试者将以最大心率的70％（在VO2PEAK测试期间确定的HRMAX）的70％进行预热10分钟，然后在HRMAX的90％进行四个4分钟的间隔，而在间隔和间隔之间的70％的HRMAX的70％的HRMAX进行了3分钟的主动恢复5分钟的冷静期，总运动时间为40分钟。

将使用双能X射线吸收仪（DXA； GE Lunar Prodigy Advance，Madison Wi）确定体内无脂肪质量，脂肪质量和体内脂肪百分比的确定。体重和身高将用于计算体重指数（BMI：kg/m2）。由于W/H比和腰围与心脏代谢疾病风险的关系，还将测量最小腰围和最大臀部周长。

氧化应激的肌肉标记：

因此，在培训那些同意活检程序的参与者之前和之后，将在静止状态下进行活检。经皮肌肉活检将从股四头肌肌肉群的股外侧（经过无菌手术对拟议的运动训练进行适应）和局部麻醉后（1％利多卡因）。

• 肥胖
• 内皮功能障碍

纳入标准：

• 种族，性别或社会经济地位将没有任何限制。
• 妇女将成为绝经
• 妇女将进行雌激素/孕激素避孕疗法（口服药丸，透皮斑或阴道环）的联合使用。
• 久坐的肥胖个体将在前6个月内保持体重稳定。
• 根据国家胆固醇教育计划专家小组的第三次报告，成人高血血胆固醇的专家小组（成人治疗小组III），久坐的肥胖个体将患有代谢综合征。

• 具有代谢综合征的人将至少有以下三个：

  1. 通过腰围测量的中央肥胖症（男性> 40英寸；女性> 35英寸）；
  2. 空腹血液甘油三酸酯> 150 mg/dl;
  3. <40 mg/dl的男性血液HDL胆固醇，女性<50 mg/dl;
  4. 血压> 130/85 mmHg; 5）空腹血糖> 110 mg/dl，（不是每个ATP III）的2小时GTT葡萄糖为140-200 mg/dl。

排除标准：

• 参加有目的的耐力运动训练（> 20分钟/天，> 1天/周）的受试者将被排除在外。
• 绝经前女性受试者不得怀孕或哺乳，并且在过去的一年中必须定期进行月经周期。
• 服用可能影响中央或周围循环的药物，
• 非甾体类抗炎剂或5-羟色胺再摄取抑制剂的个体，
• 吸烟或咀嚼烟草的人，
• 患有糖尿病的人（空腹血糖> 125 mg/dl），
• 高血压> 160/95 mmHg
• 患有充血性心力衰竭，心绞痛或周围血管疾病的人。 - 具有ECG的个人心律失常和/或急性心肌缺血的迹象反映在静止或运动过程中1 mm或更高的ST段抑郁症中。
• 患有慢性感染，中风引起的瘫痪，晚期帕金森氏病，严重的类风湿关节炎或其他严重的骨科问题，将排除锻炼训练任务的患者。
• 在调查前至少2周服用抗氧化剂，草药或维生素补充剂。
• 实验当天摄入咖啡因的人。
• 在培训计划中，体重变化超过5％的人。
• 运动依从性的个人低于运动课程或总运动时间的90％。