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出境医 / 临床实验 / 肠道菌群调节增强CAR-T对PC的抗肿瘤效应的机制

肠道菌群调节增强CAR-T对PC的抗肿瘤效应的机制

研究描述
简要摘要:
胰腺癌(PC)是人类消化恶性肿瘤最致命的疾病之一。尽管手术和化学疗法最近取得了进步,但PC的5年生存率仍不到10%。然而,作为一种有希望的肿瘤疗法,嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)在PC治疗方面的表现较差,需要进一步更新。在我们的研究中,根据我们先前的研究,我们使用抗MSLN CAR-T作为效应细胞,并探索肠道菌群(PC或健康对照)对抗MSLN CAR-T处理的不同效果和机制。首先,我们通过16S-RRNA,PCR,Western blot和Elisa检测到PC中肠道微生物群和T细胞胆固醇代谢的差异;探索肠道菌群对T细胞亚型的不同影响;并通过Spearman的相关性分析肠道菌群组成与T细胞胆固醇代谢或亚型变化之间的关系。其次,我们还通过流式细胞仪和细胞毒性测定法探索了肠道菌群对抗MSLN CAR-T细胞的增殖,迁移,亚型,炎症细胞因子表达和抗肿瘤效应功能的不同影响。第三,我们讨论了抗MSLN CAR-T中胆固醇酯化酶1(ACAT-1)和其他胆固醇代谢的其他核心基因的不同表达。最后,我们评估了不同肠道菌群对皮下PC移植和肝转移的NSG小鼠模型中抗MSLN CAR-T细胞对PC处理的影响。通过上述实验,提供了一个新的理论基础,其中肠道菌群通过ACAT-1表达调节抗MSLN CAR-T的亚型和抗肿瘤功能。此外,我们的发现证明了肠道微生物群和CAR-T细胞的关系,可以翻译用于治疗其他实体瘤(如PC)。

病情或疾病
胰腺癌肠道菌群CAR-T

学习规划
研究信息的布局表
研究类型观察性[患者注册表]
估计入学人数 80名参与者
观察模型:病例对照
时间观点:预期
目标随访时间: 6个月
官方标题:研究通过肠道微生物群调节增强人嵌合抗原受体T细胞对胰腺癌的抗肿瘤作用的机制
实际学习开始日期 2019年10月20日
估计的初级完成日期 2022年12月31日
估计 学习完成日期 2022年12月31日
武器和干预措施
组/队列
胰腺癌患者
(1)胰腺癌患者通过成像,病理和体液活检证实,或手术后一个月恢复但仍有残留病变,复发或转移的患者。 ②年龄≥30和≤75。 ④入院前一个月使用了免疫抑制药物,激素,抗生素和益生菌的患者。 ⑤排除了HIV阳性和活性乙型肝炎或C感染的患者。 ⑥排除其他恶性肿瘤或其他恶性肿瘤的当前组合的先前史。患有严重心肺疾病,肝脏和肾功能障碍的患者被排除在外。 ⑧排除阻塞性黄疸的患者。
健康的人
(1)没有消化道疾病,传染病或免疫疾病的病史。(2)没有吸烟或饮酒的病史。(3)在入学前1个月没有服用抗生素,其他药物和益生菌。
结果措施
主要结果指标
  1. 体内实验:肠道癌和T细胞胆固醇代谢以及胰腺癌患者与健康人之间的亚型的比较比较比较比例和相关性的差异。 [时间范围:2020年1月至2020年12月。]

    分别从胰腺癌和健康患者的患者中收集粪便和外周血样本:(1)通过Illumina Miseq

    高通量测序技术用于检测16S rRNA,以分析肠道菌群(α和β多样性)的多样性方法,例如随机森林和lefse等生物信息学方法来分析菌群组成的多样性。 (2)ELISA检测到T细胞中胆固醇含量的差异; (3)通过PCR和WB检测到T细胞中ACAT-1表达的差异; (4)通过流式细胞仪检测到T细胞中ACAT-1表达的差异。通过细胞分析仪检测到T细胞中CD8 +,TNFα +,Th1,Th2,Th1,Th17,Treg和其他亚型的比例。此外,通过Spearman相关分析(统计方法)确定肠道菌群组成与外周血T细胞胆固醇代谢与亚型差异之间的相关性。


  2. 体外实验:验证肠菌群对抗MSLN CAR-T体外生物学行为的调节以及ACAT-1在IT中的作用。 [时间范围:从2021年1月至2021年12月。]
    在体外,胰腺癌和健康人的肠道菌群上清液分别与抗MSLN CAR-T共同培养,以验证肠道菌群对抗MSLN CAR-T.的生物学行为的影响,以分析如何分析肠菌群的​​代谢。抗MSLN CAR-T细胞中的胆固醇以ACAT-1为关键酶参与调节肠菌群抗MSLN CAR-T的生物学行为的过程,并初步发现相关机制。

  3. 动物模型实验:验证肠道细菌控制抗MSLN CAR-T靶向杀死胰腺癌细胞的能力。 [时间范围:从2022年1月至2022年12月。]
    此外,在胰腺癌动物模型中验证了胰腺癌与健康人对抗MSLN CAR-T功能的肠道菌群组成差异的影响。


生物测量保留率:DNA样品
组织标本;粪便;血液。

资格标准
有资格信息的布局表
有资格学习的年龄: 30年至75岁(成人,老年人)
有资格学习的男女:全部
接受健康的志愿者:是的
采样方法:非概率样本
研究人群
胰腺癌患者和健康人。
标准

1.该项目实验组的纳入标准和排除标准

纳入标准:

  1. 通过成像,病理和体液活检确认的患者已转移胰腺癌,无法通过手术治愈。或手术后一个月恢复良好但仍有残留重点,复发或转移的患者。
  2. 年龄≥30和≤75
  3. 估计的寿命超过1个月。
  4. 卡诺夫斯基评分≥60; ECOG≤2
  5. 重要器官的功能:超声心动图表明,心脏的射血分数为≥50%;心电图没有明显的异常。由Cockcroft Gault公式计算出的肌酐清除率为≥40ml / min; ALT和AST≤3倍正常值的3倍;总胆红素≤2.0mg/dL;凝血函数:PT和APPT <<2倍正常值的倍;动脉氧饱和度(SPO2)> 92%;血液常规测试:HGB≥80G / L,ANC≥1×109 / L,PLT≥50×109 /L。
  6. 签署知情同意书。

排除标准:

  1. 入院前一个月使用免疫抑制药物,激素,抗生素和益生菌的患者。
  2. 严重的主动感染。
  3. HIV阳性,主动肝炎感染。
  4. 其他恶性肿瘤的先前史。不包括:研究前的任何时候,患有皮肤基础或鳞状细胞癌和宫颈癌的患者;该研究中可以包括上面未列出的其他肿瘤的患者,但只能在没有其他进一步治疗措施和无病生存期≥5年的情况下通过手术治愈。

(6)同时参加其他临床试验的患者。 (7)研究人员认为,受试者不适合被选中或不能合作参加或完成研究。

(8)先天性免疫缺陷的患者。排除标准

  1. 纳入前的第一个月,使用了免疫抑制药物,激素,抗生素和益生菌的患者。
  2. 严重的主动感染。
  3. 人免疫缺陷病毒(HIV)阳性,主动肝炎感染。
  4. 其他恶性肿瘤的先前史。不包括:在研究之前的任何时候,患有皮肤和癌的基底或鳞状细胞癌的患者;在研究中可以包括在没有其他治疗方法的情况下通过手术治愈的其他肿瘤的无疾病生存的受试者≥5年的其他肿瘤。

(6)也参加其他临床试验的患者。 (7)研究人员认为该受试者不适合包含或无法合作或完成研究。

(8)先天性免疫缺陷的患者。 (9)六个月内心肌梗塞和严重心律不齐的病史。 2.该项目对照组的纳入标准和排除标准

  1. 没有消化道疾病,传染病或免疫疾病的病史。
  2. 没有吸烟或喝酒的历史。
  3. 入学前1个月没有服用抗生素,其他药物和益生菌。
联系人和位置

联系人
位置联系人的布局表
联系人:Yunwei Wei +860451-85553099 hydwyw11@hotmail.com
联系人:Lei Zhao +8613069890888 zhaoleihyd@163.com

位置
布局表以获取位置信息
中国,海伦吉安
哈尔滨医科大学第一家附属医院招募
Harbin,Heilongjiang,中国,150081年
联系人:Lei Zhao +860451-85553099 zhaoleihyd@163.com
赞助商和合作者
哈尔滨医科大学第一附属医院
追踪信息
首先提交日期2019年12月16日
第一个发布日期2019年12月18日
上次更新发布日期2019年12月18日
实际学习开始日期2019年10月20日
估计的初级完成日期2022年12月31日(主要结果度量的最终数据收集日期)
当前的主要结果指标
(提交:2019年12月16日)
  • 体内实验:肠道癌和T细胞胆固醇代谢以及胰腺癌患者与健康人之间的亚型的比较比较比较比例和相关性的差异。 [时间范围:2020年1月至2020年12月。]
    分别从胰腺癌和健康患者的患者中收集粪便和外周血样本:(1)使用Illumina Miseq高通量测序技术检测16S rRNA,以分析肠道菌群的多样性(α和β多样性),以及生物信息信息的方法例如随机森林和左翼分析植物组成的多样性。 (2)ELISA检测到T细胞中胆固醇含量的差异; (3)通过PCR和WB检测到T细胞中ACAT-1表达的差异; (4)通过流式细胞仪检测到T细胞中ACAT-1表达的差异。通过细胞分析仪检测到T细胞中CD8 +,TNFα +,Th1,Th2,Th1,Th17,Treg和其他亚型的比例。此外,通过Spearman相关分析(统计方法)确定肠道菌群组成与外周血T细胞胆固醇代谢与亚型差异之间的相关性。
  • 体外实验:验证肠菌群对抗MSLN CAR-T体外生物学行为的调节以及ACAT-1在IT中的作用。 [时间范围:从2021年1月至2021年12月。]
    在体外,胰腺癌和健康人的肠道菌群上清液分别与抗MSLN CAR-T共同培养,以验证肠道菌群对抗MSLN CAR-T.的生物学行为的影响,以分析如何分析肠菌群的​​代谢。抗MSLN CAR-T细胞中的胆固醇以ACAT-1为关键酶参与调节肠菌群抗MSLN CAR-T的生物学行为的过程,并初步发现相关机制。
  • 动物模型实验:验证肠道细菌控制抗MSLN CAR-T靶向杀死胰腺癌细胞的能力。 [时间范围:从2022年1月至2022年12月。]
    此外,在胰腺癌动物模型中验证了胰腺癌与健康人对抗MSLN CAR-T功能的肠道菌群组成差异的影响。
原始主要结果指标与电流相同
改变历史没有发布更改
当前的次要结果指标不提供
原始的次要结果指标不提供
当前其他预先指定的结果指标不提供
原始其他预先指定的结果指标不提供
描述性信息
简短标题肠道菌群调节增强CAR-T对PC的抗肿瘤效应的机制
官方头衔研究通过肠道微生物群调节增强人嵌合抗原受体T细胞对胰腺癌的抗肿瘤作用的机制
简要摘要胰腺癌(PC)是人类消化恶性肿瘤最致命的疾病之一。尽管手术和化学疗法最近取得了进步,但PC的5年生存率仍不到10%。然而,作为一种有希望的肿瘤疗法,嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)在PC治疗方面的表现较差,需要进一步更新。在我们的研究中,根据我们先前的研究,我们使用抗MSLN CAR-T作为效应细胞,并探索肠道菌群(PC或健康对照)对抗MSLN CAR-T处理的不同效果和机制。首先,我们通过16S-RRNA,PCR,Western blot和Elisa检测到PC中肠道微生物群和T细胞胆固醇代谢的差异;探索肠道菌群对T细胞亚型的不同影响;并通过Spearman的相关性分析肠道菌群组成与T细胞胆固醇代谢或亚型变化之间的关系。其次,我们还通过流式细胞仪和细胞毒性测定法探索了肠道菌群对抗MSLN CAR-T细胞的增殖,迁移,亚型,炎症细胞因子表达和抗肿瘤效应功能的不同影响。第三,我们讨论了抗MSLN CAR-T中胆固醇酯化酶1(ACAT-1)和其他胆固醇代谢的其他核心基因的不同表达。最后,我们评估了不同肠道菌群对皮下PC移植和肝转移的NSG小鼠模型中抗MSLN CAR-T细胞对PC处理的影响。通过上述实验,提供了一个新的理论基础,其中肠道菌群通过ACAT-1表达调节抗MSLN CAR-T的亚型和抗肿瘤功能。此外,我们的发现证明了肠道微生物群和CAR-T细胞的关系,可以翻译用于治疗其他实体瘤(如PC)。
详细说明不提供
研究类型观察性[患者注册表]
学习规划观察模型:病例对照
时间观点:潜在
目标随访时间6个月
生物测量保留:DNA样品
描述:
组织标本;粪便;血液。
采样方法非概率样本
研究人群胰腺癌患者和健康人。
健康)状况
  • 胰腺癌
  • 肠道菌群
  • 大车
干涉不提供
研究组/队列
  • 胰腺癌患者
    (1)胰腺癌患者通过成像,病理和体液活检证实,或手术后一个月恢复但仍有残留病变,复发或转移的患者。 ②年龄≥30和≤75。 ④入院前一个月使用了免疫抑制药物,激素,抗生素和益生菌的患者。 ⑤排除了HIV阳性和活性乙型肝炎或C感染的患者。 ⑥排除其他恶性肿瘤或其他恶性肿瘤的当前组合的先前史。患有严重心肺疾病,肝脏和肾功能障碍的患者被排除在外。 ⑧排除阻塞性黄疸的患者。
  • 健康的人
    (1)没有消化道疾病,传染病或免疫疾病的病史。(2)没有吸烟或饮酒的病史。(3)在入学前1个月没有服用抗生素,其他药物和益生菌。
出版物 *不提供

*包括由数据提供商提供的出版物以及Medline中临床标识符(NCT编号)的出版物。
招聘信息
招聘状况招募
估计入学人数
(提交:2019年12月16日)
80
原始估计注册与电流相同
估计学习完成日期2022年12月31日
估计的初级完成日期2022年12月31日(主要结果度量的最终数据收集日期)
资格标准

1.该项目实验组的纳入标准和排除标准

纳入标准:

  1. 通过成像,病理和体液活检确认的患者已转移胰腺癌,无法通过手术治愈。或手术后一个月恢复良好但仍有残留重点,复发或转移的患者。
  2. 年龄≥30和≤75
  3. 估计的寿命超过1个月。
  4. 卡诺夫斯基评分≥60; ECOG≤2
  5. 重要器官的功能:超声心动图表明,心脏的射血分数为≥50%;心电图没有明显的异常。由Cockcroft Gault公式计算出的肌酐清除率为≥40ml / min; ALT和AST≤3倍正常值的3倍;总胆红素≤2.0mg/dL;凝血函数:PT和APPT <<2倍正常值的倍;动脉氧饱和度(SPO2)> 92%;血液常规测试:HGB≥80G / L,ANC≥1×109 / L,PLT≥50×109 /L。
  6. 签署知情同意书。

排除标准:

  1. 入院前一个月使用免疫抑制药物,激素,抗生素和益生菌的患者。
  2. 严重的主动感染。
  3. HIV阳性,主动肝炎感染。
  4. 其他恶性肿瘤的先前史。不包括:研究前的任何时候,患有皮肤基础或鳞状细胞癌和宫颈癌的患者;该研究中可以包括上面未列出的其他肿瘤的患者,但只能在没有其他进一步治疗措施和无病生存期≥5年的情况下通过手术治愈。

(6)同时参加其他临床试验的患者。 (7)研究人员认为,受试者不适合被选中或不能合作参加或完成研究。

(8)先天性免疫缺陷的患者。排除标准

  1. 纳入前的第一个月,使用了免疫抑制药物,激素,抗生素和益生菌的患者。
  2. 严重的主动感染。
  3. 人免疫缺陷病毒(HIV)阳性,主动肝炎感染。
  4. 其他恶性肿瘤的先前史。不包括:在研究之前的任何时候,患有皮肤和癌的基底或鳞状细胞癌的患者;在研究中可以包括在没有其他治疗方法的情况下通过手术治愈的其他肿瘤的无疾病生存的受试者≥5年的其他肿瘤。

(6)也参加其他临床试验的患者。 (7)研究人员认为该受试者不适合包含或无法合作或完成研究。

(8)先天性免疫缺陷的患者。 (9)六个月内心肌梗塞和严重心律不齐的病史。 2.该项目对照组的纳入标准和排除标准

  1. 没有消化道疾病,传染病或免疫疾病的病史。
  2. 没有吸烟或喝酒的历史。
  3. 入学前1个月没有服用抗生素,其他药物和益生菌。
性别/性别
有资格学习的男女:全部
年龄30年至75岁(成人,老年人)
接受健康的志愿者是的
联系人
联系人:Yunwei Wei +860451-85553099 hydwyw11@hotmail.com
联系人:Lei Zhao +8613069890888 zhaoleihyd@163.com
列出的位置国家中国
删除了位置国家
管理信息
NCT编号NCT04203459
其他研究ID编号Yunwei Wei 2019-10-20
有数据监测委员会不提供
美国FDA调节的产品
研究美国FDA调节的药物:
研究美国FDA调节的设备产品:
从美国生产并出口的产品:
IPD共享声明
计划共享IPD:
计划描述:涉及个人隐私
责任方哈尔滨医科大学第一附属医院
研究赞助商哈尔滨医科大学第一附属医院
合作者不提供
调查人员不提供
PRS帐户哈尔滨医科大学第一附属医院
验证日期2019年10月

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