病情或疾病 | 干预/治疗 | 阶段 |
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纤维化心肌 | 行为:高强度间隔训练 | 不适用 |
研究类型 : | 介入(临床试验) |
实际注册 : | 12名参与者 |
分配: | N/A。 |
干预模型: | 单组分配 |
掩蔽: | 无(打开标签) |
主要意图: | 基础科学 |
官方标题: | 高强度间隔训练对心脏纤维化的影响的蛋白质组学评估 |
实际学习开始日期 : | 2015年8月1日 |
实际的初级完成日期 : | 2018年7月31日 |
实际 学习完成日期 : | 2018年7月31日 |
手臂 | 干预/治疗 |
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实验:前后 将在运动训练前后对参与者进行评估。 | 行为:高强度间隔训练 心脏患者每周的运动频率为2-3次,已经完成了36次运动训练。在热身期间,在40%的vo2peak的80%下进行了五个3分钟间隔的受试者,并通过30%的vo2peak分开每个间隔。 3分钟的冷却终止了练习,以VO2PEAK的30%终止。 |
有资格学习的年龄: | 21年至80年(成人,老年人) |
有资格学习的男女: | 全部 |
接受健康的志愿者: | 不 |
纳入标准:
排除标准:
那些是
其他练习禁忌症:
没有提供联系人或位置
追踪信息 | |||||
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首先提交的日期ICMJE | 2019年6月18日 | ||||
第一个发布日期icmje | 2019年7月31日 | ||||
上次更新发布日期 | 2019年7月31日 | ||||
实际学习开始日期ICMJE | 2015年8月1日 | ||||
实际的初级完成日期 | 2018年7月31日(主要结果指标的最终数据收集日期) | ||||
当前的主要结果度量ICMJE |
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原始主要结果措施ICMJE | 与电流相同 | ||||
改变历史 | 没有发布更改 | ||||
当前的次要结果度量ICMJE |
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原始的次要结果措施ICMJE | 与电流相同 | ||||
当前其他预先指定的结果指标 | 不提供 | ||||
原始其他预先指定的结果指标 | 不提供 | ||||
描述性信息 | |||||
简短的标题ICMJE | 间隔训练对心脏纤维化的影响 | ||||
官方标题ICMJE | 高强度间隔训练对心脏纤维化的影响的蛋白质组学评估 | ||||
简要摘要 | 该研究旨在强调高强度间隔训练(HIIT)对心脏纤维化的影响。从2009年至2018年,具有VO2PEAK,B型纳地酸肽,生活质量问卷调查,心血管磁共振成像的心脏病患者,并在HIT的36次之前和之后保留了gadolinium升高(CMR-LGE),并保留了gadolinium升高(CMR-LGE)。 HIIT之前和之后,从人类成人心室分离的人类心脏成纤维细胞(CF)用血清处理。将进行HIIT之前和之后的细胞迁移以及细胞增殖和全局细胞蛋白谱的测量。 | ||||
详细说明 | 从2009年1月1日到2018年12月31日,稳定的临床状况超过4周的心脏患者完成了36次HIIT。将包括HIIT之前和之后进行临床评估的受试者(列出)。 *综述了基线信息,包括年龄,性别,体重指数,持续时间持续时间,合并症和药物病史。具有超声心动图检查的受试者,表格-36健康调查(SF-36)的生命质量,分级心肺运动测试(CPET),心脏磁共振成像,晚期加多糖增强(CMR-LGE)(CMR-LGE),血液化学测试(血统,大脑,大脑,大脑,大脑,大脑,大脑,大脑,大脑, HIIT之前和之后,纳米钠肽,高敏性C反应蛋白,肌酐)和保留的血清。 细胞行为从人体心室(HCF-AV细胞,Sciencell Research Laboratories,Carlsbad,CA,USA)中分离出的人心脏成纤维细胞(CF)。 。将细胞(1x10^5)接种在直径10厘米的盘中,并在上述培养基中培养过夜。我们使用10%的患者血清代替10%的胎牛血清(FBS)来治疗从人体心室分离的人类心脏成纤维细胞(CF)(CF)(HCF-AV细胞,Sciencell Research Laboratories,Carlsbad,CA,CA,美国),美国,,评估了血清对CF的影响。 细胞培养的人心脏成纤维细胞(CFS)(CFS)从人体心室(HCF-AV细胞,Sciencell Research Laboratories,Carlsbad,CA,美国)分离出来,在含有10%FBS,1%成纤维细胞生长的培养基中培养。将细胞(1x10^5)接种在直径10厘米的盘中,并在上述培养基中培养过夜。 细胞迁移分析如前所述确定从心脏患者获得的血清中细胞迁移速度。简而言之,将3000个的HCF-AV细胞铺在每种3.5 cm培养皿上,均以聚丙烯酰胺底物的形式进行,并在HIIT之前和之后的培养基中收获,其中包含10%的心脏患者血清。使用冷却的电荷耦合器件摄像头(Photometrics,Tucson,AZ)记录了相对造影剂图像,该摄像头(Photometrics,Tucson,AZ)附在Eclipse Ti-e倒置显微镜系统(Nikon Instruments Inc.,Melville,NY,NY),配备20倍,数字光盘0.75 ACHROMAT 0.75 ACHROMAT相位物镜镜头和INU系列阶段顶级孵化器(Tokai Hit Co.,Ltd.,Shizuoka-ken,Japan)。根据细胞核的中心,每10分钟确定每10分钟的细胞位置,为120-180分钟。迁移速度是根据持续的随机步行方程计算的。 细胞增殖测定HCF-AV细胞为7.5x10^3的细胞在一个48孔细胞培养板(Sigma-Aldrich,St. Louis,Mo)的每个井中(0.95 cm^2生长面积),使用普通培养基8小时。然后将它们培养在含有1.5%FBS过夜的饥饿介质中。将准备好的细胞用Hoechst 33342(Thermo Fisher Scientific Inc.,Waltham,MA)染色15分钟,然后在磷酸盐缓冲盐水中洗涤两次。他们用10%的FBS(10孔)分别处理过,并在HIIT(24孔)(24孔)(24孔)之前从我们的受试者中获得了10%的患者血清。我们在Cell Analyzer 1000细胞成像和分析系统(GE Healthcare Bio-Science Corp.,Piscataway,NJ)使用,以在三种不同的培养基中收获后0、24小时和48小时计算细胞数。 蛋白质组学分析不同处理基的蛋白质浓度是通过二氨酸酸测定法(Thermofisher Scientific Inc.)确定的。根据以下过程,在12.5%SDS-PAGE凝胶上通过电泳分离蛋白质混合物,然后根据以下程序进行内凝胶酶消化。在95 oC的热变性5分钟后,通过将二硫代醇(DTT)添加到最终浓度为10 mm,并在50 oC中孵育30分钟,从而降低了蛋白质样品。通过将碘乙酰氨酰胺(IAA)添加到最终浓度为20 mm之前,在室温下在黑暗中孵育30分钟来进行烷基化。然后添加第二种等分试样,以淬灭未反应的IAA。对于胰蛋白酶消化,添加胰蛋白酶(1:50,w/w),并将反应混合物在37 oC中孵育12小时。胰蛋白酶消化通过添加10微甲酸(10%)淬灭。通过SpeedVAC干燥消化的肽进行质量分析。 在LTQ-FT(线性四杆离子陷阱 - 捕获型离子离子回旋谐振)上分析了胰蛋白酶肽(Thermo Fisher Scientific,Inc.,Waltham,MA),配备了纳米电源离子源(新目标,Inc source,Inc,MA) 。,沃本,马)处于正离子模式。液相色谱系统是带有FAMOS AutoSampler(LC Packings,CA)的Agilent 1100系列HPLC(Agilent Technologies,Palo Alto,CA)。将肽溶液注入自包装的前列(150 microm ID x 20 mm,5 microm,200Å),并在自包装的反向相反的相C18纳米柱(75 microm ID x 300 mm,300 mm,,x 300 mm,,依次执行色谱分离5 microm,100Å)在水中使用0.1%甲酸(流动A期)和80%乙腈(流动相B)中的0.1%甲酸。以300 nl/min的流速为300至40%B的线性梯度,持续40分钟。电喷雾电压以2.0 kV的速度施加,并将毛细管温度设置为200 oC。通过在FT-ICR质谱仪上进行的全扫描调查MS Spectrum(M/Z 300-2000)开始扫描周期,在400 DA时分辨率为100,000。在该扫描中检测到的十个最丰富的离子进行了在线性四极离子陷阱(LTQ)质谱仪中进行的MS/MS实验。将全扫描和MS/MS的离子积累(自动增益控制目标编号)和最大离子累积时间设置为1 x 106离子,1000 ms和5 x 104离子,200 ms。通过使用CID(碰撞诱导的解离)将归一化碰撞能将其设置为35%,激活Q为0.3,激活时间为30 ms,将离子分解为分裂。 所有实验原始文件均以无标签蛋白定量的最大值(1.5.3.30)进行。最大化参数的可变后翻译后修饰被分配为包括蛋氨酸的氧化和丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸的磷酸化。半胱氨酸的氨基甲基化分配为固定修饰。消化的酶被分配为胰蛋白酶,其裂解次数为第二。来自SwissProt 2018_06的Homo Sapiens蛋白序列用于MS/MS搜索。蛋白质定量结果是通过最大的LFQ强度获得的。 统计分析Wilcoxon匹配对签名级测试用于比较每个个体前后HIIT之前和之后的运动能力参数,CMR-LGE结果,血液化学数据和SF-36分数。学生T测试用于评估HIIT前后的蛋白质水平变化。 | ||||
研究类型ICMJE | 介入 | ||||
研究阶段ICMJE | 不适用 | ||||
研究设计ICMJE | 分配:N/A 干预模型:单一组分配 掩蔽:无(打开标签) 主要目的:基础科学 | ||||
条件ICMJE | 纤维化心肌 | ||||
干预ICMJE | 行为:高强度间隔训练 心脏患者每周的运动频率为2-3次,已经完成了36次运动训练。在热身期间,在40%的vo2peak的80%下进行了五个3分钟间隔的受试者,并通过30%的vo2peak分开每个间隔。 3分钟的冷却终止了练习,以VO2PEAK的30%终止。 | ||||
研究臂ICMJE | 实验:前后 将在运动训练前后对参与者进行评估。 干预:行为:高强度间隔训练 | ||||
出版物 * | 不提供 | ||||
*包括由数据提供商提供的出版物以及Medline中临床标识符(NCT编号)的出版物。 | |||||
招聘信息 | |||||
招聘状态ICMJE | 完全的 | ||||
实际注册ICMJE | 12 | ||||
原始实际注册ICMJE | 与电流相同 | ||||
实际学习完成日期ICMJE | 2018年7月31日 | ||||
实际的初级完成日期 | 2018年7月31日(主要结果指标的最终数据收集日期) | ||||
资格标准ICMJE | 纳入标准:
排除标准: 那些是
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性别/性别ICMJE |
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年龄ICMJE | 21年至80年(成人,老年人) | ||||
接受健康的志愿者ICMJE | 不 | ||||
联系ICMJE | 仅当研究招募主题时才显示联系信息 | ||||
列出的位置国家ICMJE | 不提供 | ||||
删除了位置国家 | |||||
管理信息 | |||||
NCT编号ICMJE | NCT04038723 | ||||
其他研究ID编号ICMJE | 103-7333A3 | ||||
有数据监测委员会 | 不 | ||||
美国FDA调节的产品 |
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IPD共享语句ICMJE |
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责任方 | Chang Gung纪念医院 | ||||
研究赞助商ICMJE | Chang Gung纪念医院 | ||||
合作者ICMJE | 不提供 | ||||
研究人员ICMJE | 不提供 | ||||
PRS帐户 | Chang Gung纪念医院 | ||||
验证日期 | 2019年6月 | ||||
国际医学期刊编辑委员会和世界卫生组织ICTRP要求的ICMJE数据要素 |