• 两组的肝脏相关并发症发生率[时间范围：3个月]
• 两组与肝脏相关并发症的发生率[时间范围：6个月]
• 两组中与肝有关的并发症发生率[时间范围：12个月]
• 两组中没有肝移植的生存[时间范围：6个月]
• 两组中没有肝移植的生存[时间范围：12个月]
• 两组的患者数量接受了尖端（经肝内门体系统分流）[时间范围：6个月]
• 两组的患者数量接受了尖端（经肝内门体系统分流）[时间范围：12个月]
• 通过简短表格Survey-36版本（SF-36）评估的生活质量的变化[时间范围：6个月]
• 通过简短表格Survey-36版本（SF-36）评估的生活质量的变化[时间范围：12个月]
• 两组的肾脏储备更改（由肾脏生物标志物评估）[时间范围：3个月]
  尿液NGAL，胱抑素C和KIM1将完成
• 两组的肾脏储备更改（由肾脏生物标志物评估）[时间范围：6个月]
  尿液NGAL，胱抑素C和KIM1将完成
• 两组的肾脏储备更改（由肾脏生物标志物评估）[时间范围：12个月]
  尿液NGAL，胱抑素C和KIM1将完成
• 两组的大容量可穿梭化频率变化[时间范围：3个月]
• 两组的大容量可穿梭化频率变化[时间范围：6个月]
• 两组的大容量可穿梭化频率变化[时间范围：12个月]
• 促炎性细胞因子的改善[时间范围：3个月]
  将完成TNF Alpha，IL6，CRP和IL1BETA
• 促炎性细胞因子的改善[时间范围：6个月]
  将完成TNF Alpha，IL6，CRP和IL1BETA
• 两组的死亡率[时间范围：12个月]

当前的前瞻性随机对照试验将旨在研究靶向白蛋白治疗与标准医疗治疗的疗效，以减少肝硬化失代偿性腹水的6个月死亡率的降低。此外，我们旨在评估白蛋白在降低并发症的发病率方面的功效：超肠诱发循环功能障碍（PICD），AKI，低钠血症，细菌感染，细菌感染，肝脑病，肝脑病和静脉曲张的影响，对肾脏和门廊的影响，对全身血液动力学储备产生影响通过生物标志物和免疫调节。在这项开放标记的随机研究中，将纳入连续的肝硬化患者，符合纳入标准和排除标准。

患者将通过临床试验协调员（CTC）随机分为2组。 CTC将对患者视而不见，并接受了治疗，并且将通过依次编号的不透明密封信封（SNOSE）技术进行分配。每2周，每2周就会通过血清白蛋白水平，腹水级和利尿剂使用每2周评估患者。该治疗将接受针对性的白蛋白疗法，如方法中所述，而另一组患者将接受标准的医疗。该研究的主要结果是评估6个月的死亡率，而次要结局指标将是3、6和12个月与肝脏相关并发症的发生率，在6个月和1组中，无肝移植的生存不含肝脏移植和TIPS。一年，在6和12个月时通过简短表格Survey-36版本（SF-36）评估的生活质量的改善，肾脏储备的改善（由肾脏生物标志物评估）在3、6和12个月时，频率减少了在3、6和12个月时的大容量可肠术，以及3个月和6个月的免疫参数变化。

研究设计目标和目标主要

•研究靶向白蛋白疗法与标准医学治疗的疗效在复发性腹水中降低6个月死亡率的疗效中，肝硬化的患者的疗效

次要目标

• 研究两组的治疗可肠术的频率
• 并发症的发生率：可肠术诱导的循环功能障碍（PICD），AKI，低钠血症，细菌感染，肝性脑病和静脉曲张出血
• 对系统性血流动力学和门户压力的影响
• 对脆弱性和肌肉减少症的影响
• 两组分辨出腹水的时间
• 肾脏储备的变化是由EGFR和其他生物标志物（尿液-NGAL，肾损伤分子1，肝脂肪脂肪酸结合蛋白（L-FABP））的基于顺序抑制蛋白C的方程评估的变化。每3个月）
• 两组的β受体阻滞剂的不良影响和停药率
• 在6个月和1年的两组中没有肝脏移植和尖端的生存
• 通过简短表格Survey-36版本（SF-36）评估的生活质量
• 白蛋白疗法对免疫调节的影响
• 白蛋白对12个月死亡率的影响

在这项开放标记的随机研究，连续的肝硬化患者中，方法学给药方案（描述受试者或动物剂量）将纳入研究标准和排除标准。样本量计算的详细信息是在统计方法部分给出的。肝病的严重程度将根据严重程度得分和MELD评分评估。

患者将通过临床试验协调员（CTC）随机分为2组。 CTC将对患者视而不见，并接受了治疗，并且将通过依次编号的不透明密封信封（SNOSE）技术进行分配。患者将在2周，4周的血清白蛋白水平，腹水级和利尿剂的使用中评估4周，然后每3个月进行使用

A组将接受标准的医疗（B组患者的详细信息）以及针对性的白蛋白疗法的下达：

血清白蛋白<3 g/l的患者具有复发性腹水 - 将以60克/周的60克60克的蛋白质获得20％的白蛋白，直到该患者每周将获得40克白蛋白，直到腹水分辨率或血清，达到3.0 g/L白蛋白> 3.5 g/l。实现此目标的患者将继续以20克/周的速度继续进行，直到患者完全分辨出腹水和血清白蛋白> 3.5 gm/l或最多6个月后，该患者将每2周接受Cholel Chocein 20 gms b：标准医疗治疗盐限制，具有大容量超肠分裂的利尿剂，这些患者将进行低钠饮食（2 g/day），并将循环利尿剂（速尿40-160 mg/day）和远端作用利尿剂（螺内酯100-400 mg/天），一次监测副作用，每次升级一步。大容量的可肠术（LVP）将与静脉注射白蛋白（8 g/l腹水）一起进行，并记录在TAP的频率的情况下。

随访：2周，4周，然后每3个月持续1年

重要定义：

复发性腹水将被定义为腹水，尽管饮食钠限制和足够的利尿剂剂量，但在12个月内至少在三次中复发。

腹水的分辨率将定义为缺乏临床腹水（腹水为0或1级），可以将部分定义为在利尿剂上的腹水分辨率，并将完整定义为无需利尿剂的腹水的分辨率。

研究：基线HVPG，评估门户（全身和肺血液动力学）和心脏血液动力学，Cystatin C，普通CT扫描，用于评估肌肉减少症。所有患者都将完成体重，血压和超声心动图。肾小球滤过率（GFR）将通过使用EGFR方程 - 基于肾脏疾病（MDRD6）和基于Cystatin C（慢性肾脏疾病流行病学合作）的EGFR方程进行估计。随之而来的是，快速过夜后将收集动脉血液样本，至少在仰卧位休息8小时，以进行血浆肾素活性，血浆醛固酮和血浆去甲肾上腺素浓度。也将为所有入学的患者进行评估的基线尿液分析。患者随后在3-6个月后接受HVPG，每3个月Cystatin C每3个月接受HVPG。除此之外，尿液中性粒细胞酶相关的脂蛋白（NGAL），血浆肾素活性和血清醛固酮水平将在基线，3和6个月进行。重复的普通CT扫描以评估肌肉减少症，将在3个月和6个月时进行。随访时间为1年，或直到提示或肝移植为止。

白蛋白相关的免疫学评估：

将免疫调节视为白蛋白作用的重要机理。其他实验将在基线，3和6个月进行，以评估白蛋白同工型（HMA，HNA1，HNA2，IMA），促炎和抗炎细胞因子（基于多重Luminex的细胞因子阵列），炎症介质（C-）（C-）（C-）（C-）（C-）（C-）反应性蛋白质，内毒素测定法，补充蛋白质；潮湿）；先天免疫细胞的频率和功能谱（单核细胞，中性粒细胞）

白蛋白同工型分析：

通过量化电子喷雾电离Orbitrap HRMS系统“（q exative Plus），质谱仪耦合到UHPLC上，从热能化的USA中耦合，从热能率耦合，将通过量化不同的白蛋白（HMA，HNA1，HNA2，IMA）来完成白蛋白同工型的化学药品变化。在给定时间点（第0天和三个月）的血液将以1：4,000的比例稀释，然后将8 ul该稀释的血浆注射到高性能液相色谱电子 - 电子喷雾电离MS系统中。高性能液相色谱分离将在反相C8色谱柱上进行（Agilent Zorbax RRHD 300SB-C8，2.1 mm ID 3 50 mm，1.8 LM螺纹柱，孔径为300Å），流速为0.2 ML/分钟使用H2O-乙腈（带0.1％甲酸）溶剂系统在90％H2O至90％乙腈的梯度下，在25分钟内，在3分钟开始，在自动MS条件下，采集开始时。将被执行。还将使用外源白蛋白溶液进行类似的分析。将使用软件蛋白反卷积软WARR（德国热科学）的软件蛋白质反卷积的SOFTRA分析获得的复合电子喷雾电离MS光谱。在这里，将总离子色谱图最小化基础峰色谱图后，将获得白蛋白质量色谱图并分析。然后，所获得的白蛋白光谱将在质量范围内进行反价vlo vol，范围为66,000-67,000 da（由于各种白蛋白同工型的分子量[MW]落在此范围内。最后，从峰的强度来看，将测量峰值的白蛋白同工型。如DAS等人所述，将报道各种HSA同工型的相对丰度。这将在基线和3个月时进行。 Sigma-Aldrich（密苏里州圣路易斯）。纯化的HSA购自Baxter（印度古尔冈）。所有试剂均为分析等级。

细胞因子阵列将根据制造商的方案，使用Bio-Plex多重细胞因子珠测定系统（Bio-Rad，CA）分析基线患者组的45个细胞因子，趋化因子和生长因子。考虑多重测定的变异的测定内和测定系数<5％

先天免疫细胞分析：

Total whole blood will be collected from patients pre and post therapy and evaluated for % frequency of monocytes by staining with fluorochrome labeled anti-CD14 anti CD16 and for neutrophils anti-CD11b anti CD16 anti-CD15, anti-CD66b and will acquired and anlaysed using流式细胞仪FACS诗歌（BD Biosciences）。对于先天免疫细胞的功能分析，血液将分为两部分。将使用Ficoll-Hypaque（Himedia）分离PBMC，并根据制造方案从Miltenyi Biotech中使用CD14分离试剂盒分离单核细胞。而血液的另一部分将使用Gran-Hypaque（Himedia）来分离中性粒细胞。在低剂量的LPS刺激后，将分析细胞内细胞因子，例如IFN-Y，TNF-A，IL-1B。此外，使用制造商的所述协议将进行吞噬爆发或ROS的产生。同样，将使用FACS诗歌（BD Biosciences）获取数据并分解数据。

海马代谢分析方法：

对单核细胞能量代谢（指导免疫细胞的功能性能）的影响，我们通过测量细胞外酸化速率（ECAR）和氧气消耗率（OCR）（OCR）（OCR）通过Seahorse XF24 XF24细胞外通量分析仪在外周血液中的细胞外通量分析仪在基线的患者中和3个月作为乳酸产生的度量（分别是糖酵解速率的替代物）和Oxphos。简而言之，根据制造方案，将使用Miltenyi Biotech的CD14分离试剂盒从新鲜收集的血液中分离单核细胞。分离的单核细胞将以每孔的1x105细胞的密度为1次。在开始测定之前，将在补充10 mM葡萄糖和1毫米丙酮酸钠和谷氨酰胺的海马测定培养基中孵育细胞，并在37°C的培养箱中，不含CO2，持续45分钟。氧化磷酸化参数的进一步变化将通过对用寡霉素（ATPase抑制剂，1μM），FCCP（0.2μM）和烤烤反应（0.5μm）的治疗来计算OCR的实时变化。

研究人群：

受试者人群/临床前模型（描述包括包含/排除标准或动物模型的受试者人群）

学习规划：

• 一项随机对照研究。
• 该研究将于2020年8月至2022年8月在新德里的ILBS上接受肝病学系的患者进行。
• 研究组将包括反复发作腹水的肝硬化患者

样本量计算：在Singh等人的随机对照试验中（Hepatology杂志，2012年），中多肾上腺素的复发性腹水患者的90天死亡率为15/20（75％），而在8/20（40％）（40％）标准医学治疗组（大容量可穿梭化和白蛋白输注）。假设白蛋白的生存率为75％，SMT的生存率为40％，那么α为5％，功率为90％，我们需要注册90例，即每组45例。进一步假设辍学率10％，我们需要招募100个情况50组，并用块随机化方法随机分配，块大小为10。

在给定时间点，治疗组中生存组的比例= 0.75在给定时间点= 0.40危险比= 3.19功率（％）= 90 alpha error（％）= 5侧= 2侧面= 2侧面= 2侧面，对照组的生存比例= 0.40治疗组的尺寸= 45所需的对照组样本量= 45 alpha误差（％）功率（％）第一组第二组5 70 27 27 27 80 34 34 34 90 45 45 45

干预：目标白蛋白治疗监测和评估：随访：2周，4周，3个月，然后每3个月持续1年

统计分析

• 所有变量均应以平均值（SD）或中位数表示（范围）表示
• 变量将通过Mann-Whitney U测试比较
• 对于分类变量，我们将使用卡方或费舍尔测试
• 生存分析将使用COX-Prortiate Repression分析进行
• 生存的精算概率应通过Kaplanmerier图计算，并通过对数秩检验进行比较。
• 竞争风险生存分析与竞争事件作为尖端和肝移植将受到不利影响：对白蛋白的过敏反应，呼吸困难恶化，体积超负荷停止规则：对白蛋白输注的反应

研究中的道德问题并计划解决这些问题：

关于试验方案没有道德问题。通常建议白蛋白用于治疗腹部肝硬化患者。在一项大型多中心试验中，显示出高剂量的40克/周白蛋白改善了腹膜内的卷虫的结果。但是，这缺乏基于在印度等资源约束国家提供高剂量的可行性的临床应用。因此，我们的数据将基于每个患者的响应及其对整体结果的影响提供针对性的方法（升级/降级）。该研究药物将免费提供成本，并且不属于护理标准的特殊调查费用不会由患者承担。

• 生物学：白蛋白
  血清白蛋白<3 g/l的患者具有复发性腹水 - 将以60克/周的60克60克的蛋白质获得20％的白蛋白，直到该患者每周将获得40克白蛋白，直到腹水分辨率或血清，达到3.0 g/L白蛋白> 3.5 g/l。实现此目标的患者将继续以20克/周的速度继续进行，直到患者完全分辨出腹水和血清白蛋白> 3.5 gm/L，该患者每2周将接受一次20克白蛋白。
• 药物：标准医疗

  标准的医疗治疗 - 盐限制，具有较大体积超肠分周内的利尿剂，这些患者将进行低钠饮食（2 g/天），并将循环利尿剂（速尿40-160 mg/day）和远端作用组合。利尿剂（螺内酯100-400毫克/天），一次监测副作用，一次剂量升级一步。大容量的可肠术（LVP）将与静脉注射白蛋白（8 g/l腹水）一起进行，并记录在TAP的频率的情况下。

  随访：2周，4周，然后每3个月持续1年。

• 实验：标准医疗的靶向白蛋白
  血清白蛋白<3 g/l的患者具有复发性腹水 - 将以60克/周的60克60克的蛋白质获得20％的白蛋白，直到该患者每周将获得40克白蛋白，直到腹水分辨率或血清，达到3.0 g/L白蛋白> 3.5 g/l。实现此目标的患者将继续以20克/周的速度继续进行，直到患者完全分辨出腹水和血清白蛋白> 3.5 gm/l该患者每2周将接受白蛋白20克
  干预措施：

  • 生物学：白蛋白
  • 药物：标准医疗
• 主动比较器：标准医疗

  标准的医疗治疗 - 盐限制，具有较大体积超肠分周内的利尿剂，这些患者将进行低钠饮食（2 g/天），并将循环利尿剂（速尿40-160 mg/day）和远端作用组合。利尿剂（螺内酯100-400毫克/天），一次监测副作用，一次剂量升级一步。大容量的可肠术（LVP）将与静脉注射白蛋白（8 g/l腹水）一起进行，并记录在TAP的频率的情况下。

  随访：2周，4周，然后每3个月持续1年

  干预：药物：标准医疗

纳入标准：

1. 肝硬化患有复发性腹水的患者。
2. 年龄从18-70岁的患者

排除标准：

1. 肾衰竭（肌酐> 1.5mg/dl）
2. 最近7天内的胃肠道出血
3. 自发性细菌性腹膜炎
4. 有机肾病患者（由IAC定义）
5. 心血管疾病或慢性阻塞性肺疾病的患者
6. 全身性动脉高血压（> 160/90mmHg）
7. 存在肝细胞癌（米兰之外的标准）（或门血栓形成' target='_blank'>静脉血栓形成
8. Budd-Chiari综合征
9. 活性败血症患者
10. 怀孕
11. 肝脑病患者
12. 在入学前7天不使用影响全身血液动力学的药物（β受体阻滞剂除外）
13. 血清白蛋白> 3 gm的患者
14. 拒绝参加
15. 对白蛋白的已知或怀疑过敏
16. 先前的提示
17. 肝脏或肾脏移植
18. 参加其他临床试验的患者
19. 肝外恶性肿瘤

• 两组的肝脏相关并发症发生率[时间范围：3个月]
• 两组与肝脏相关并发症的发生率[时间范围：6个月]
• 两组中与肝有关的并发症发生率[时间范围：12个月]
• 两组中没有肝移植的生存[时间范围：6个月]
• 两组中没有肝移植的生存[时间范围：12个月]
• 两组的患者数量接受了尖端（经肝内门体系统分流）[时间范围：6个月]
• 两组的患者数量接受了尖端（经肝内门体系统分流）[时间范围：12个月]
• 通过简短表格Survey-36版本（SF-36）评估的生活质量的变化[时间范围：6个月]
• 通过简短表格Survey-36版本（SF-36）评估的生活质量的变化[时间范围：12个月]
• 两组的肾脏储备更改（由肾脏生物标志物评估）[时间范围：3个月]
  尿液NGAL，胱抑素C和KIM1将完成
• 两组的肾脏储备更改（由肾脏生物标志物评估）[时间范围：6个月]
  尿液NGAL，胱抑素C和KIM1将完成
• 两组的肾脏储备更改（由肾脏生物标志物评估）[时间范围：12个月]
  尿液NGAL，胱抑素C和KIM1将完成
• 两组的大容量可穿梭化频率变化[时间范围：3个月]
• 两组的大容量可穿梭化频率变化[时间范围：6个月]
• 两组的大容量可穿梭化频率变化[时间范围：12个月]
• 促炎性细胞因子的改善[时间范围：3个月]
  将完成TNF Alpha，IL6，CRP和IL1BETA
• 促炎性细胞因子的改善[时间范围：6个月]
  将完成TNF Alpha，IL6，CRP和IL1BETA
• 两组的死亡率[时间范围：12个月]

当前的前瞻性随机对照试验将旨在研究靶向白蛋白治疗与标准医疗治疗的疗效，以减少肝硬化失代偿性腹水的6个月死亡率的降低。此外，我们旨在评估白蛋白在降低并发症的发病率方面的功效：超肠诱发循环功能障碍（PICD），AKI，低钠血症，细菌感染，细菌感染，肝脑病，肝脑病和静脉曲张的影响，对肾脏和门廊的影响，对全身血液动力学储备产生影响通过生物标志物和免疫调节。在这项开放标记的随机研究中，将纳入连续的肝硬化患者，符合纳入标准和排除标准。

患者将通过临床试验协调员（CTC）随机分为2组。 CTC将对患者视而不见，并接受了治疗，并且将通过依次编号的不透明密封信封（SNOSE）技术进行分配。每2周，每2周就会通过血清白蛋白水平，腹水级和利尿剂使用每2周评估患者。该治疗将接受针对性的白蛋白疗法，如方法中所述，而另一组患者将接受标准的医疗。该研究的主要结果是评估6个月的死亡率，而次要结局指标将是3、6和12个月与肝脏相关并发症的发生率，在6个月和1组中，无肝移植的生存不含肝脏移植和TIPS。一年，在6和12个月时通过简短表格Survey-36版本（SF-36）评估的生活质量的改善，肾脏储备的改善（由肾脏生物标志物评估）在3、6和12个月时，频率减少了在3、6和12个月时的大容量可肠术，以及3个月和6个月的免疫参数变化。

研究设计目标和目标主要

•研究靶向白蛋白疗法与标准医学治疗的疗效在复发性腹水中降低6个月死亡率的疗效中，肝硬化的患者的疗效

次要目标

• 研究两组的治疗可肠术的频率
• 并发症的发生率：可肠术诱导的循环功能障碍（PICD），AKI，低钠血症，细菌感染，肝性脑病和静脉曲张出血
• 对系统性血流动力学和门户压力的影响
• 对脆弱性和肌肉减少症的影响
• 两组分辨出腹水的时间
• 肾脏储备的变化是由EGFR和其他生物标志物（尿液-NGAL，肾损伤分子1，肝脂肪脂肪酸结合蛋白（L-FABP））的基于顺序抑制蛋白C的方程评估的变化。每3个月）
• 两组的β受体阻滞剂的不良影响和停药率
• 在6个月和1年的两组中没有肝脏移植和尖端的生存
• 通过简短表格Survey-36版本（SF-36）评估的生活质量
• 白蛋白疗法对免疫调节的影响
• 白蛋白对12个月死亡率的影响

在这项开放标记的随机研究，连续的肝硬化患者中，方法学给药方案（描述受试者或动物剂量）将纳入研究标准和排除标准。样本量计算的详细信息是在统计方法部分给出的。肝病的严重程度将根据严重程度得分和MELD评分评估。

患者将通过临床试验协调员（CTC）随机分为2组。 CTC将对患者视而不见，并接受了治疗，并且将通过依次编号的不透明密封信封（SNOSE）技术进行分配。患者将在2周，4周的血清白蛋白水平，腹水级和利尿剂的使用中评估4周，然后每3个月进行使用

A组将接受标准的医疗（B组患者的详细信息）以及针对性的白蛋白疗法的下达：

血清白蛋白<3 g/l的患者具有复发性腹水 - 将以60克/周的60克60克的蛋白质获得20％的白蛋白，直到该患者每周将获得40克白蛋白，直到腹水分辨率或血清，达到3.0 g/L白蛋白> 3.5 g/l。实现此目标的患者将继续以20克/周的速度继续进行，直到患者完全分辨出腹水和血清白蛋白> 3.5 gm/l或最多6个月后，该患者将每2周接受Cholel Chocein 20 gms b：标准医疗治疗盐限制，具有大容量超肠分裂的利尿剂，这些患者将进行低钠饮食（2 g/day），并将循环利尿剂（速尿40-160 mg/day）和远端作用利尿剂（螺内酯100-400 mg/天），一次监测副作用，每次升级一步。大容量的可肠术（LVP）将与静脉注射白蛋白（8 g/l腹水）一起进行，并记录在TAP的频率的情况下。

随访：2周，4周，然后每3个月持续1年

重要定义：

复发性腹水将被定义为腹水，尽管饮食钠限制和足够的利尿剂剂量，但在12个月内至少在三次中复发。

腹水的分辨率将定义为缺乏临床腹水（腹水为0或1级），可以将部分定义为在利尿剂上的腹水分辨率，并将完整定义为无需利尿剂的腹水的分辨率。

研究：基线HVPG，评估门户（全身和肺血液动力学）和心脏血液动力学，Cystatin C，普通CT扫描，用于评估肌肉减少症。所有患者都将完成体重，血压和超声心动图。肾小球滤过率（GFR）将通过使用EGFR方程 - 基于肾脏疾病（MDRD6）和基于Cystatin C（慢性肾脏疾病流行病学合作）的EGFR方程进行估计。随之而来的是，快速过夜后将收集动脉血液样本，至少在仰卧位休息8小时，以进行血浆肾素活性，血浆醛固酮和血浆去甲肾上腺素浓度。也将为所有入学的患者进行评估的基线尿液分析。患者随后在3-6个月后接受HVPG，每3个月Cystatin C每3个月接受HVPG。除此之外，尿液中性粒细胞酶相关的脂蛋白（NGAL），血浆肾素活性和血清醛固酮水平将在基线，3和6个月进行。重复的普通CT扫描以评估肌肉减少症，将在3个月和6个月时进行。随访时间为1年，或直到提示或肝移植为止。

白蛋白相关的免疫学评估：

将免疫调节视为白蛋白作用的重要机理。其他实验将在基线，3和6个月进行，以评估白蛋白同工型（HMA，HNA1，HNA2，IMA），促炎和抗炎细胞因子（基于多重Luminex的细胞因子阵列），炎症介质（C-）（C-）（C-）（C-）（C-）（C-）反应性蛋白质，内毒素测定法，补充蛋白质；潮湿）；先天免疫细胞的频率和功能谱（单核细胞，中性粒细胞）

白蛋白同工型分析：

通过量化电子喷雾电离Orbitrap HRMS系统“（q exative Plus），质谱仪耦合到UHPLC上，从热能化的USA中耦合，从热能率耦合，将通过量化不同的白蛋白（HMA，HNA1，HNA2，IMA）来完成白蛋白同工型的化学药品变化。在给定时间点（第0天和三个月）的血液将以1：4,000的比例稀释，然后将8 ul该稀释的血浆注射到高性能液相色谱电子 - 电子喷雾电离MS系统中。高性能液相色谱分离将在反相C8色谱柱上进行（Agilent Zorbax RRHD 300SB-C8，2.1 mm ID 3 50 mm，1.8 LM螺纹柱，孔径为300Å），流速为0.2 ML/分钟使用H2O-乙腈（带0.1％甲酸）溶剂系统在90％H2O至90％乙腈的梯度下，在25分钟内，在3分钟开始，在自动MS条件下，采集开始时。将被执行。还将使用外源白蛋白溶液进行类似的分析。将使用软件蛋白反卷积软WARR（德国热科学）的软件蛋白质反卷积的SOFTRA分析获得的复合电子喷雾电离MS光谱。在这里，将总离子色谱图最小化基础峰色谱图后，将获得白蛋白质量色谱图并分析。然后，所获得的白蛋白光谱将在质量范围内进行反价vlo vol，范围为66,000-67,000 da（由于各种白蛋白同工型的分子量[MW]落在此范围内。最后，从峰的强度来看，将测量峰值的白蛋白同工型。如DAS等人所述，将报道各种HSA同工型的相对丰度。这将在基线和3个月时进行。 Sigma-Aldrich（密苏里州圣路易斯）。纯化的HSA购自Baxter（印度古尔冈）。所有试剂均为分析等级。

细胞因子阵列将根据制造商的方案，使用Bio-Plex多重细胞因子珠测定系统（Bio-Rad，CA）分析基线患者组的45个细胞因子，趋化因子和生长因子。考虑多重测定的变异的测定内和测定系数<5％

先天免疫细胞分析：

Total whole blood will be collected from patients pre and post therapy and evaluated for % frequency of monocytes by staining with fluorochrome labeled anti-CD14 anti CD16 and for neutrophils anti-CD11b anti CD16 anti-CD15, anti-CD66b and will acquired and anlaysed using流式细胞仪FACS诗歌（BD Biosciences）。对于先天免疫细胞的功能分析，血液将分为两部分。将使用Ficoll-Hypaque（Himedia）分离PBMC，并根据制造方案从Miltenyi Biotech中使用CD14分离试剂盒分离单核细胞。而血液的另一部分将使用Gran-Hypaque（Himedia）来分离中性粒细胞。在低剂量的LPS刺激后，将分析细胞内细胞因子，例如IFN-Y，TNF-A，IL-1B。此外，使用制造商的所述协议将进行吞噬爆发或ROS的产生。同样，将使用FACS诗歌（BD Biosciences）获取数据并分解数据。

海马代谢分析方法：

对单核细胞能量代谢（指导免疫细胞的功能性能）的影响，我们通过测量细胞外酸化速率（ECAR）和氧气消耗率（OCR）（OCR）（OCR）通过Seahorse XF24 XF24细胞外通量分析仪在外周血液中的细胞外通量分析仪在基线的患者中和3个月作为乳酸产生的度量（分别是糖酵解速率的替代物）和Oxphos。简而言之，根据制造方案，将使用Miltenyi Biotech的CD14分离试剂盒从新鲜收集的血液中分离单核细胞。分离的单核细胞将以每孔的1x105细胞的密度为1次。在开始测定之前，将在补充10 mM葡萄糖和1毫米丙酮酸钠和谷氨酰胺的海马测定培养基中孵育细胞，并在37°C的培养箱中，不含CO2，持续45分钟。氧化磷酸化参数的进一步变化将通过对用寡霉素（ATPase抑制剂，1μM），FCCP（0.2μM）和烤烤反应（0.5μm）的治疗来计算OCR的实时变化。

研究人群：

受试者人群/临床前模型（描述包括包含/排除标准或动物模型的受试者人群）

学习规划：

• 一项随机对照研究。
• 该研究将于2020年8月至2022年8月在新德里的ILBS上接受肝病学系的患者进行。
• 研究组将包括反复发作腹水的肝硬化患者

样本量计算：在Singh等人的随机对照试验中（Hepatology杂志，2012年），中多肾上腺素的复发性腹水患者的90天死亡率为15/20（75％），而在8/20（40％）（40％）标准医学治疗组（大容量可穿梭化和白蛋白输注）。假设白蛋白的生存率为75％，SMT的生存率为40％，那么α为5％，功率为90％，我们需要注册90例，即每组45例。进一步假设辍学率10％，我们需要招募100个情况50组，并用块随机化方法随机分配，块大小为10。

在给定时间点，治疗组中生存组的比例= 0.75在给定时间点= 0.40危险比= 3.19功率（％）= 90 alpha error（％）= 5侧= 2侧面= 2侧面= 2侧面，对照组的生存比例= 0.40治疗组的尺寸= 45所需的对照组样本量= 45 alpha误差（％）功率（％）第一组第二组5 70 27 27 27 80 34 34 34 90 45 45 45

干预：目标白蛋白治疗监测和评估：随访：2周，4周，3个月，然后每3个月持续1年

统计分析

• 所有变量均应以平均值（SD）或中位数表示（范围）表示
• 变量将通过Mann-Whitney U测试比较
• 对于分类变量，我们将使用卡方或费舍尔测试
• 生存分析将使用COX-Prortiate Repression分析进行
• 生存的精算概率应通过Kaplanmerier图计算，并通过对数秩检验进行比较。
• 竞争风险生存分析与竞争事件作为尖端和肝移植将受到不利影响：对白蛋白的过敏反应，呼吸困难恶化，体积超负荷停止规则：对白蛋白输注的反应

研究中的道德问题并计划解决这些问题：

关于试验方案没有道德问题。通常建议白蛋白用于治疗腹部肝硬化患者。在一项大型多中心试验中，显示出高剂量的40克/周白蛋白改善了腹膜内的卷虫的结果。但是，这缺乏基于在印度等资源约束国家提供高剂量的可行性的临床应用。因此，我们的数据将基于每个患者的响应及其对整体结果的影响提供针对性的方法（升级/降级）。该研究药物将免费提供成本，并且不属于护理标准的特殊调查费用不会由患者承担。

• 生物学：白蛋白
  血清白蛋白<3 g/l的患者具有复发性腹水 - 将以60克/周的60克60克的蛋白质获得20％的白蛋白，直到该患者每周将获得40克白蛋白，直到腹水分辨率或血清，达到3.0 g/L白蛋白> 3.5 g/l。实现此目标的患者将继续以20克/周的速度继续进行，直到患者完全分辨出腹水和血清白蛋白> 3.5 gm/L，该患者每2周将接受一次20克白蛋白。
• 药物：标准医疗

  标准的医疗治疗 - 盐限制，具有较大体积超肠分周内的利尿剂，这些患者将进行低钠饮食（2 g/天），并将循环利尿剂（速尿40-160 mg/day）和远端作用组合。利尿剂（螺内酯100-400毫克/天），一次监测副作用，一次剂量升级一步。大容量的可肠术（LVP）将与静脉注射白蛋白（8 g/l腹水）一起进行，并记录在TAP的频率的情况下。

  随访：2周，4周，然后每3个月持续1年。

• 实验：标准医疗的靶向白蛋白
  血清白蛋白<3 g/l的患者具有复发性腹水 - 将以60克/周的60克60克的蛋白质获得20％的白蛋白，直到该患者每周将获得40克白蛋白，直到腹水分辨率或血清，达到3.0 g/L白蛋白> 3.5 g/l。实现此目标的患者将继续以20克/周的速度继续进行，直到患者完全分辨出腹水和血清白蛋白> 3.5 gm/l该患者每2周将接受白蛋白20克
  干预措施：

  • 生物学：白蛋白
  • 药物：标准医疗
• 主动比较器：标准医疗

  标准的医疗治疗 - 盐限制，具有较大体积超肠分周内的利尿剂，这些患者将进行低钠饮食（2 g/天），并将循环利尿剂（速尿40-160 mg/day）和远端作用组合。利尿剂（螺内酯100-400毫克/天），一次监测副作用，一次剂量升级一步。大容量的可肠术（LVP）将与静脉注射白蛋白（8 g/l腹水）一起进行，并记录在TAP的频率的情况下。

  随访：2周，4周，然后每3个月持续1年

  干预：药物：标准医疗

纳入标准：

1. 肝硬化患有复发性腹水的患者。
2. 年龄从18-70岁的患者

排除标准：

1. 肾衰竭（肌酐> 1.5mg/dl）
2. 最近7天内的胃肠道出血
3. 自发性细菌性腹膜炎
4. 有机肾病患者（由IAC定义）
5. 心血管疾病或慢性阻塞性肺疾病的患者
6. 全身性动脉高血压（> 160/90mmHg）
7. 存在肝细胞癌（米兰之外的标准）（或门血栓形成' target='_blank'>血栓形成' target='_blank'>静脉血栓形成' target='_blank'>血栓形成
8. Budd-Chiari综合征
9. 活性败血症患者
10. 怀孕
11. 肝脑病患者
12. 在入学前7天不使用影响全身血液动力学的药物（β受体阻滞剂除外）
13. 血清白蛋白> 3 gm的患者
14. 拒绝参加
15. 对白蛋白的已知或怀疑过敏
16. 先前的提示
17. 肝脏或肾脏移植
18. 参加其他临床试验的患者
19. 肝外恶性肿瘤