• 淋巴细胞表型[时间范围：第0天]
  淋巴细胞表型将通过PBMC的流式细胞仪进行。我们将使用针对Th1，Th2，Th9，Th17，Th22，Treg和TFH种群的抗体。
• 细胞因子水平[时间范围：第0天]
  ELISA将在等离子体和CSF中研究一组主要促炎的细胞因子。该面板包括以下细胞因子：IL17，TNF，IL6，IL1β，IL 10，IL33，IL12，IL 23
• 代谢组分析[时间范围：第0天]
  代谢组分析将从血浆和CSF进行。这些分析将通过液相色谱与质谱法（LC-MS）（MetaboHub网络（MetaboHub-Clermont进行血浆分析）和MetaboHub-Saclase进行CSF分析）进行。
• 神经丝轻链（NFL）的度量[时间范围：第0天]
  将研究血液和CSF的NFL水平，以确定GBS患者的NFL水平是否增加，并比较这些患者的NFL水平与MS有关。

脱髓鞘性疾病代表着广泛的疾病，是由自身免疫机制触发的过度炎症引起的。这些病理中的一些是慢性的，并且会影响中枢神经系统，例如多发性硬化症' target='_blank'>多发性硬化症（MS），而另一些则是单相的，并且针对周围神经系统，例如GuillainBarré综合征（GBS）。

在神经炎症性病理中，促炎性TH1和TH17淋巴细胞系的过度反应以及调节性T淋巴细胞（TREG）的反应不足会导致过度炎症，这对神经组织有害。这些信号通路的调节涉及关键蛋白，例如激酶。这些激酶的调节可以允许开发新的药理学靶标进行神经炎症。

最近的工作（未发表的数据）显示了ERK5和PMK2激酶的表达与实验过敏性脑脊髓炎的临床严重程度之间存在关联，这是一种模拟多发性硬化症' target='_blank'>多发性硬化症的小鼠模型。

为了寻找新的生物标志物并提高了我们对神经炎症病理学初始炎症阶段的参与者的了解，我们建议研究血液和脑脊髓液（CSF）ERK5和PKM2激酶表达的差异。通过RT-QPCR和蛋白质定量复发复发的MS和GB。我们还希望研究其他生物学参数，包括通过细胞因子测定和淋巴细胞表型，代谢组研究以及轻度形成神经丝（NFL）测定法对促抗炎平衡进行表征。

在病理开始时，将评估对RR MS或GBS的患者中ERK5和PKM2激酶表达的研究。

为了将患者分为4组，将对MS和GB进行通常的诊断检查：

•组1：对照组。不符合MS或GB的标准且未进行鉴定诊断的患者。

亚组1A和1B将通过与第2组和3组配对形成。

• 第2组：MACDONALD标准确认的RR MS患者（2017年）
• 第3组：通过常规临床和电生理体征的关联确认GBS患者。
• 第4组：已确定鉴别诊断以解释症状的患者。这些患者将被排除在分析之外。

为了研究这项研究的实验室参数，将从所有患者中采集其他血液样本（25 mL）和脑脊液（CSF）样品（2ML）。外周血单核细胞（PBMC）和中性粒细胞将使用percoll梯度从血液中分离出来。第4组样品将不进行分析。

该分析将集中于第2和第3组，第1A和2组之间以及1B和3之间的实验室参数的比较。

1. / ERK5和PKM2激酶的表达

   研究人员希望通过RT-QPCR分析ERK5和PKM2的表达，以研究RNA水平的转录组以及Western blot和Elisa，以研究两个激酶的磷酸化和总形式。

   RT-QPCR需要提取RNA，逆转录到cDNA中，然后使用事先设计的特定引物来扩增编码ERK5和PKM2的基因。结果将与用HPRT基因引物获得的结果进行比较。

2. /研究Pro和抗炎作用之间的平衡

   研究人员希望通过研究淋巴细胞表型并确定细胞因子水平来表征Pro和抗炎活性的平衡。

   淋巴细胞表型将通过PBMC的流式细胞仪进行。研究的人群将包括TH1，TH2，TH9，TH17，TH22，TREG和TFH人群。

   ELISA将在血浆和CSF中研究主要是炎性细胞因子的小组。该面板包括以下细胞因子：IL17，TNF，IL6，IL1β，IL 10，IL33，IL12，IL 23

3. /代谢组分析

   人类代谢组的数据库包括40,000多种代谢物，并允许通过受监督和无监督的统计分析技术在不同的病理环境中建立代谢谱。代谢组分析将从血浆和CSF进行。这些分析将通过液相色谱与质谱法（LC-MS）（MetaboHub网络（MetaboHub-Clermont进行血浆分析）和MetaboHub-Saclase进行CSF分析）进行。

4. /神经丝轻链（NFL）的度量

对血液，尤其是CSF的神经丝的度量越来越兴趣。高水平的神经丝是神经元丧失的证据，无论其初始机制如何。神经丝轻链（NFL）似乎是测量轴突损失的最相关形式。在MS中，在急性复发的前两个月观察到NFL增加。相反，关于周围脱髓鞘疾病的NFL水平动力学的数据很少。

研究人员打算研究血液和CSF中的NFL水平，以确定GBS随访患者的NFL水平是否增加，并将这些患者的NFL水平（第3组）与MS的患者进行比较（第2组）。

• 硬化，多个
• Guillain-Barre综合征
• 炎

• Gaetani L, Salvadori N, Lisetti V, Eusebi P, Mancini A, Gentili L, Borrelli A, Portaccio E, Sarchielli P, Blennow K, Zetterberg H, Parnetti L, Calabresi P, Di Filippo M. Cerebrospinal fluid neurofilament light chain tracks cognitive多发性硬化症' target='_blank'>多发性硬化症的损害。 J Neurol。 2019年9月; 266（9）：2157-2163。 doi：10.1007/s00415-019-09398-7。 Epub 2019 5月25日。
• Kamil K，Yazid MD，Idrus RBH，Das S，Kumar J.周围脱髓鞘疾病：从生物学到转化医学。前神经。 2019年3月19日； 10：87。 doi：10.3389/fneur.2019.00087。 2019年的生态收获。评论。
• Khalil M，Teunissen CE，Otto M，Piehl F，Sormani MP，Gattringer T，Barro C，Kappos L，Comabella M，Comabella M，Fazekas F，Petzold A，Blennow K，Zetterberg H，Kuhle J. Kuhle J. Neurofiarents作为神经系统异常的生物标志物。 Nat Rev Neurol。 2018年10月; 14（10）：577-589。 doi：10.1038/s41582-018-0058-Z。审查。
• Kuhle J，Plattner K，Bestwick JP，Lindberg RL，Ramagopalan SV，Norgren N，Nissim A，Malaspina A，Leppert D，Giovannoni G，Kappos L. MS中CSF Neurofilements Light和重链蛋白的比较研究。多砂型。 2013年10月； 19（12）：1597-603。 doi：10.1177/1352458513482374。 EPUB 2013 3月25日。
• Rostami A，CiricB。Th17细胞在CNS炎症性脱髓鞘发病机理中的作用。 J Neurol Sci。 2013年10月15日； 333（1-2）：76-87。 doi：10.1016/j.jns.2013.03.002。 EPUB 2013 4月8日。评论。
• Thompson AJ，Banwell BL，Barkhof F，Carroll WM，Coetzee T，Comi G，Correale J，Fazekas F，Filippi M，Firepman M，Freedman MS，Fujihara K，Galetta SL，Hartung HP，Hartung HP，Kappos L，Kappos L，Lublin，Marrie Ra，Marrie Ra，Marrie RAE，Miller AE，Miller AE，Miller AE ，Miller DH，Montalban X，Mowry EM，Sorensen PS，TintoréM，Traboulsee AL，Trojano M，Uitdehaag BMJ，Vukusic S，Waubant E，Weinshenker BG，Reingold SC，Reingold SC，Cohen JA。多发性硬化症' target='_blank'>多发性硬化症的诊断：2017年麦当劳标准的修订。柳叶刀神经。 2018年2月; 17（2）：162-173。 doi：10.1016/s1474-4422（17）30470-2。 EPUB 2017 12月21日。评论。
• Venken K，Hellings N，Thewissen M，Somers V，Hensen K，Rummens JL，Medaer R，Hupperts R，StinissenP。损害的CD4+ CD25（高）调节性T细胞功能在复发性多发性硬化症' target='_blank'>多发性硬化症患者中与A相关FOXP3阳性细胞的频率降低，并在单细胞水平上降低了FOXP3表达。免疫学。 2008年1月； 123（1）：79-89。 EPUB 2007年9月25日。
• Yuan A，Rao MV，Veeranna，Nixon RA。健康和疾病中的神经丝和神经丝蛋白。冷春态透视生物。 2017年4月3日； 9（4）。 PII：A018309。 doi：10.1101/cshperspect.A018309。审查。

纳入标准：

• 男人和女人
• 18至80岁
• 临床体征暗示在发作症状的一个月内MS或GB

排除标准：

• 在慢性治疗中接受免疫抑制治疗，免疫调节剂或皮质类固醇治疗的患者
• 在过去一个月中用皮质类固醇治疗的患者
• 没有社会保障
• HIV阳性血清学
• 失智
• 怀孕或母乳喂养的女人
• 先前参与研究
• 在司法保护下
• 非合作患者

• 淋巴细胞表型[时间范围：第0天]
  淋巴细胞表型将通过PBMC的流式细胞仪进行。我们将使用针对Th1，Th2，Th9，Th17，Th22，Treg和TFH种群的抗体。
• 细胞因子水平[时间范围：第0天]
  ELISA将在等离子体和CSF中研究一组主要促炎的细胞因子。该面板包括以下细胞因子：IL17，TNF，IL6，IL1β，IL 10，IL33，IL12，IL 23
• 代谢组分析[时间范围：第0天]
  代谢组分析将从血浆和CSF进行。这些分析将通过液相色谱与质谱法（LC-MS）（MetaboHub网络（MetaboHub-Clermont进行血浆分析）和MetaboHub-Saclase进行CSF分析）进行。
• 神经丝轻链（NFL）的度量[时间范围：第0天]
  将研究血液和CSF的NFL水平，以确定GBS患者的NFL水平是否增加，并比较这些患者的NFL水平与MS有关。

脱髓鞘性疾病代表着广泛的疾病，是由自身免疫机制触发的过度炎症引起的。这些病理中的一些是慢性的，并且会影响中枢神经系统，例如多发性硬化症' target='_blank'>多发性硬化症（MS），而另一些则是单相的，并且针对周围神经系统，例如GuillainBarré综合征（GBS）。

在神经炎症性病理中，促炎性TH1和TH17淋巴细胞系的过度反应以及调节性T淋巴细胞（TREG）的反应不足会导致过度炎症，这对神经组织有害。这些信号通路的调节涉及关键蛋白，例如激酶。这些激酶的调节可以允许开发新的药理学靶标进行神经炎症。

最近的工作（未发表的数据）显示了ERK5和PMK2激酶的表达与实验过敏性脑脊髓炎的临床严重程度之间存在关联，这是一种模拟多发性硬化症' target='_blank'>多发性硬化症的小鼠模型。

为了寻找新的生物标志物并提高了我们对神经炎症病理学初始炎症阶段的参与者的了解，我们建议研究血液和脑脊髓液（CSF）ERK5和PKM2激酶表达的差异。通过RT-QPCR和蛋白质定量复发复发的MS和GB。我们还希望研究其他生物学参数，包括通过细胞因子测定和淋巴细胞表型，代谢组研究以及轻度形成神经丝（NFL）测定法对促抗炎平衡进行表征。

在病理开始时，将评估对RR MS或GBS的患者中ERK5和PKM2激酶表达的研究。

为了将患者分为4组，将对MS和GB进行通常的诊断检查：

•组1：对照组。不符合MS或GB的标准且未进行鉴定诊断的患者。

亚组1A和1B将通过与第2组和3组配对形成。

• 第2组：MACDONALD标准确认的RR MS患者（2017年）
• 第3组：通过常规临床和电生理体征的关联确认GBS患者。
• 第4组：已确定鉴别诊断以解释症状的患者。这些患者将被排除在分析之外。

为了研究这项研究的实验室参数，将从所有患者中采集其他血液样本（25 mL）和脑脊液（CSF）样品（2ML）。外周血单核细胞（PBMC）和中性粒细胞将使用percoll梯度从血液中分离出来。第4组样品将不进行分析。

该分析将集中于第2和第3组，第1A和2组之间以及1B和3之间的实验室参数的比较。

1. / ERK5和PKM2激酶的表达

   研究人员希望通过RT-QPCR分析ERK5和PKM2的表达，以研究RNA水平的转录组以及Western blot和Elisa，以研究两个激酶的磷酸化和总形式。

   RT-QPCR需要提取RNA，逆转录到cDNA中，然后使用事先设计的特定引物来扩增编码ERK5和PKM2的基因。结果将与用HPRT基因引物获得的结果进行比较。

2. /研究Pro和抗炎作用之间的平衡

   研究人员希望通过研究淋巴细胞表型并确定细胞因子水平来表征Pro和抗炎活性的平衡。

   淋巴细胞表型将通过PBMC的流式细胞仪进行。研究的人群将包括TH1，TH2，TH9，TH17，TH22，TREG和TFH人群。

   ELISA将在血浆和CSF中研究主要是炎性细胞因子的小组。该面板包括以下细胞因子：IL17，TNF，IL6，IL1β，IL 10，IL33，IL12，IL 23

3. /代谢组分析

   人类代谢组的数据库包括40,000多种代谢物，并允许通过受监督和无监督的统计分析技术在不同的病理环境中建立代谢谱。代谢组分析将从血浆和CSF进行。这些分析将通过液相色谱与质谱法（LC-MS）（MetaboHub网络（MetaboHub-Clermont进行血浆分析）和MetaboHub-Saclase进行CSF分析）进行。

4. /神经丝轻链（NFL）的度量

对血液，尤其是CSF的神经丝的度量越来越兴趣。高水平的神经丝是神经元丧失的证据，无论其初始机制如何。神经丝轻链（NFL）似乎是测量轴突损失的最相关形式。在MS中，在急性复发的前两个月观察到NFL增加。相反，关于周围脱髓鞘疾病的NFL水平动力学的数据很少。

研究人员打算研究血液和CSF中的NFL水平，以确定GBS随访患者的NFL水平是否增加，并将这些患者的NFL水平（第3组）与MS的患者进行比较（第2组）。

• 硬化，多个
• Guillain-Barre综合征
• 炎

• Gaetani L, Salvadori N, Lisetti V, Eusebi P, Mancini A, Gentili L, Borrelli A, Portaccio E, Sarchielli P, Blennow K, Zetterberg H, Parnetti L, Calabresi P, Di Filippo M. Cerebrospinal fluid neurofilament light chain tracks cognitive多发性硬化症' target='_blank'>多发性硬化症的损害。 J Neurol。 2019年9月; 266（9）：2157-2163。 doi：10.1007/s00415-019-09398-7。 Epub 2019 5月25日。
• Kamil K，Yazid MD，Idrus RBH，Das S，Kumar J.周围脱髓鞘疾病：从生物学到转化医学。前神经。 2019年3月19日； 10：87。 doi：10.3389/fneur.2019.00087。 2019年的生态收获。评论。
• Khalil M，Teunissen CE，Otto M，Piehl F，Sormani MP，Gattringer T，Barro C，Kappos L，Comabella M，Comabella M，Fazekas F，Petzold A，Blennow K，Zetterberg H，Kuhle J. Kuhle J. Neurofiarents作为神经系统异常的生物标志物。 Nat Rev Neurol。 2018年10月; 14（10）：577-589。 doi：10.1038/s41582-018-0058-Z。审查。
• Kuhle J，Plattner K，Bestwick JP，Lindberg RL，Ramagopalan SV，Norgren N，Nissim A，Malaspina A，Leppert D，Giovannoni G，Kappos L. MS中CSF Neurofilements Light和重链蛋白的比较研究。多砂型。 2013年10月； 19（12）：1597-603。 doi：10.1177/1352458513482374。 EPUB 2013 3月25日。
• Rostami A，CiricB。Th17细胞在CNS炎症性脱髓鞘发病机理中的作用。 J Neurol Sci。 2013年10月15日； 333（1-2）：76-87。 doi：10.1016/j.jns.2013.03.002。 EPUB 2013 4月8日。评论。
• Thompson AJ，Banwell BL，Barkhof F，Carroll WM，Coetzee T，Comi G，Correale J，Fazekas F，Filippi M，Firepman M，Freedman MS，Fujihara K，Galetta SL，Hartung HP，Hartung HP，Kappos L，Kappos L，Lublin，Marrie Ra，Marrie Ra，Marrie RAE，Miller AE，Miller AE，Miller AE ，Miller DH，Montalban X，Mowry EM，Sorensen PS，TintoréM，Traboulsee AL，Trojano M，Uitdehaag BMJ，Vukusic S，Waubant E，Weinshenker BG，Reingold SC，Reingold SC，Cohen JA。多发性硬化症' target='_blank'>多发性硬化症的诊断：2017年麦当劳标准的修订。柳叶刀神经。 2018年2月; 17（2）：162-173。 doi：10.1016/s1474-4422（17）30470-2。 EPUB 2017 12月21日。评论。
• Venken K，Hellings N，Thewissen M，Somers V，Hensen K，Rummens JL，Medaer R，Hupperts R，StinissenP。损害的CD4+ CD25（高）调节性T细胞功能在复发性多发性硬化症' target='_blank'>多发性硬化症患者中与A相关FOXP3阳性细胞的频率降低，并在单细胞水平上降低了FOXP3表达。免疫学。 2008年1月； 123（1）：79-89。 EPUB 2007年9月25日。
• Yuan A，Rao MV，Veeranna，Nixon RA。健康和疾病中的神经丝和神经丝蛋白。冷春态透视生物。 2017年4月3日； 9（4）。 PII：A018309。 doi：10.1101/cshperspect.A018309。审查。

纳入标准：

• 男人和女人
• 18至80岁
• 临床体征暗示在发作症状的一个月内MS或GB

排除标准：

• 在慢性治疗中接受免疫抑制治疗，免疫调节剂或皮质类固醇治疗的患者
• 在过去一个月中用皮质类固醇治疗的患者
• 没有社会保障
• HIV阳性血清学
• 失智
• 怀孕或母乳喂养的女人
• 先前参与研究
• 在司法保护下
• 非合作患者