• 大脑MRI测量[时间范围：t = 3（t = 0后32个月）时的临床评估]
  在医院获取，预处理和分析神经影像数据。 MRI数据是使用3 Tesla Skyra扫描仪（西门子，德国Erlangen）获取的。 MRI措施包括结构性（高分辨率T1解剖扫描 - 灰质体积/密度，皮质厚度；扩散张量成像扫描：白质微结构完整性）和功​​能特征（静止状态fMRI序列：静止功能连接性）
• 粪便样品在相对丰度方面的细菌组成[时间框架：t = 3（t = 0后32个月）的临床评估]
  总细菌DNA是从粪便样品中提取的，并且微生物16S rRNA基因的V3-V4区域被PCR放大。计算了α多样性（即样品中的物种多样性）。

流行病学证据表明，健康饮食与认知下降的减速有关，导致痴呆症，但基本机制仍未探索。饮食是肠道菌群组成的主要决定因素，进而影响大脑结构和功能，但是迄今为止，尚无有关此主题的研究。本文的目的是描述旨在研究饮食习惯与认知功能的关联的Nutbrain研究的设计和方法，以及它们在调节肠道菌群组成和脑测量中的作用。

这是一项基于人群的队列研究，对居住在意大利米兰北部的65岁或更多的社区居民成年人。在演讲时期，人们将筛选认知功能。还记录了社会人口统计学特征以及生活方式和饮食习惯，病史，药物，功能状况和人体测量值。怀疑在筛查阶段患有认知障碍的个体接受临床评估，包括神经系统检查和磁共振成像（MRI）扫描（结构和功能）。还收集了用于肠道菌群分析的粪便和血液样本以及用于评估推定生物学标志物的粪便和血液样本。对于确认诊断为轻度认知障碍（MCI）的每个受试者，访问了两个对同性和年龄的认知完整控制。研究人员打算至少有683个人参加筛查阶段，约有240人进行临床评估。

Nutbrain是一项创新的研究，将现代和先进的技术（即微生物组和神经影像学）纳入传统的流行病学设计。这项研究是一个独特的机会，可以解决有关可修改风险因素在认知障碍中的作用的关键问题，特别关注饮食习惯及其与肠道微生物群的关联以及大脑老龄化过程的标志。这些发现将有助于鼓励和计划生活方式干预，以预防和治疗，以促进健康的认知衰老。

NUTBRAIN研究旨在通过应用一种将传统流行病学方法与神经学和肠分析的新型多层次相结合，以特别关注营养对肠道菌群和大脑特征的影响，以特殊关注营养对肠道菌群和大脑特征的影响，并特别关注营养对肠道菌群和大脑特征的影响，以此来理解饮食的生物学机制的生物学机制。 NUTBRAIN研究的目的是：i）估计在65岁以上的社区居民老年人中MCI和其他认知障碍的发生； ii）调查生活方式习惯与认知衰老结果之间的关联； iii）探索饮食的作用，在调节肠道菌群组成中，这反过来也影响了大脑结构和功能。

NUTBRAIN研究是一项由国家研究委员会生物医学技术研究所（ITB-CNR，意大利递增）和IRCCS Fondazione Mondino（意大利帕维亚）的医院IRCCS，由国家研究委员会（ITB-CNR，Semgrate）和医院IRCCS IRCCS Hospital促进的一项持续的基于人群的队列研究。 Nutbrain研究分为三个阶段：

t = 1参与者的招聘。这项研究在北方米兰郊区的两个地点进行：鲍尔特和巴那二。从两个市政当局的官方居民官方登记册中得出一个随机样本。纳入标准是：参加研究机构的医疗任命，住在两个市政当局之一的家中，为65岁以上。通过一份邀请信与符合条件的人口联系，其中邀请人们​​通过电话与ITB-CNR联系，安排首次访问，在此期间，他/她被要求带来最后的乐器和临床考试。实施了全面的沟通运动，以宣传和促进该项目以及促进招聘。为了确保较高的入学率，自从招聘的最早计划阶段以来，这两个市政当局的市长一直积极参与，并授予了该项目的赞助。此外，该研究通过不同的渠道在社区层面进行推广和宣传：通过打印小册子和在高级娱乐中心，商店，药房，医生办公室和患者协会中的海报设置；通过当地报纸，机构网站以及社交媒体的文章和广告（例如Facebook，https://www.facebook.com/thenutbrainstudy/）。 NUTBRAIN研究有一个网站（www.nutbrain.it），潜在参与者被指示以获取更多信息，并可以注册兴趣参加。此外，为了提高认识，还组织了一些描述拟议研究目标的公共事件，以招募合格的人。

t = 2筛选评估。训练有素的团队在其住所城镇的研究机构（为残疾人安排家庭访问）参观了参与者。在数据收集之前，在研究机构完成了知情同意书。在那些没有能力完全知情同意的人中，代理人同意是从亲戚或看护者那里收集的。这项2小时的访谈包括对神经心理学的测试和问卷进行面对面管理，以询问社会人口统计学，职业和社会经济数据，教育，医疗状况和药物使用，生活方式习惯，功能状态，功能状态，功能状态，和饮食行为。在访问结束时，一个凳子采样套件，由无菌粪便组成的容器组成，其中包含说明粪便样品收集程序的说明，并向每个参与者提供了3天的食物日记。第一次访问旨在筛选每个参与者的认知功能，并以更全面的方式识别包含/排除标准。

t = 3临床评估。怀疑在筛查神经心理学测试中患有认知障碍的个体正在接受临床检查。参与者使用私人运输服务将参与者从自己的家中运送到医院，该服务完全涵盖了研究。医院的访问包括由神经科医生进行的标准神经检查和3T磁共振成像（MRI）扫描。在此阶段，从每个参与者那里收集血液和粪便样本，并存储在医院的生物库中直至加工。对于对MCI进行临床诊断的每个受试者，在医院（病例对照设计）招募了两个对同性和最接近出生日期的认知完整控制和最接近的出生日期的控制。

根据欧洲一般数据保护法规（EU）2016/679（GDPR）（https://gdpr-info.eu/）处理，监控，计算机化和存储日期安全数据。所有的研究记录，包括同意书，都保存在ITB-CNR的锁定文件柜中，其中用于数据存储的文件服务器所在。文件服务器在ITB-CNR Intranet中进行了防火墙。对于隐私和安全性，仅授予服务器管理员的密码才能访问数据库。对数据表格进行仔细检查，以获取缺少的数据和不一致之处。通过检查参与者的随机样本来监视数据库输入数据的质量。数据传输受到密码/解密策略和密码保护的方式保护。在最终数据集中，一个唯一的密钥可以标识每个主题以确保匿名。个人数据被认为是严格机密的，并在出口程序之前被删除。数据安全是通过自动备份保证。

• 认知功能障碍
• 饮食习惯

纳入标准：

• 参加研究机构的医疗任命
• 住在两个市政当局之一
• 已有65年以上

排除标准：

i）神经心理学标准：

• 受到痴呆症，先前存在的认知障碍（例如失语，忽视），随之而来的严重精神病，其他神经系统疾病（例如严重的抑郁和行为障碍）
• 不允许完成神经心理学评估的严重感官障碍（例如听觉和/或视觉丧失）

ii）微生物群的分析方案：

• 正在进行人造营养的人
• 主动不受控制的胃肠道疾病或疾病的病史（炎症性肠病，溃疡性结肠炎和克罗恩病）的病史
• 在过去的五年中，接受了胃肠道的先前大手术，但胆囊切除术和阑尾切除术的受试者
• 在访问前的4周内，使用抗生素或大剂量的商业益生菌
• 放射性化治疗的受试者

iii）MRI扫描协议：

• 体内金属碎片的受试者，手术植入金属的设备
• 严重的幽闭恐惧症
• 在研究期间，无法躺在MRI扫描仪中

• 大脑MRI测量[时间范围：t = 3（t = 0后32个月）时的临床评估]
  在医院获取，预处理和分析神经影像数据。 MRI数据是使用3 Tesla Skyra扫描仪（西门子，德国Erlangen）获取的。 MRI措施包括结构性（高分辨率T1解剖扫描 - 灰质体积/密度，皮质厚度；扩散张量成像扫描：白质微结构完整性）和功​​能特征（静止状态fMRI序列：静止功能连接性）
• 粪便样品在相对丰度方面的细菌组成[时间框架：t = 3（t = 0后32个月）的临床评估]
  总细菌DNA是从粪便样品中提取的，并且微生物16S rRNA基因的V3-V4区域被PCR放大。计算了α多样性（即样品中的物种多样性）。

流行病学证据表明，健康饮食与认知下降的减速有关，导致痴呆症，但基本机制仍未探索。饮食是肠道菌群组成的主要决定因素，进而影响大脑结构和功能，但是迄今为止，尚无有关此主题的研究。本文的目的是描述旨在研究饮食习惯与认知功能的关联的Nutbrain研究的设计和方法，以及它们在调节肠道菌群组成和脑测量中的作用。

这是一项基于人群的队列研究，对居住在意大利米兰北部的65岁或更多的社区居民成年人。在演讲时期，人们将筛选认知功能。还记录了社会人口统计学特征以及生活方式和饮食习惯，病史，药物，功能状况和人体测量值。怀疑在筛查阶段患有认知障碍的个体接受临床评估，包括神经系统检查和磁共振成像（MRI）扫描（结构和功能）。还收集了用于肠道菌群分析的粪便和血液样本以及用于评估推定生物学标志物的粪便和血液样本。对于确认诊断为轻度认知障碍（MCI）的每个受试者，访问了两个对同性和年龄的认知完整控制。研究人员打算至少有683个人参加筛查阶段，约有240人进行临床评估。

Nutbrain是一项创新的研究，将现代和先进的技术（即微生物组和神经影像学）纳入传统的流行病学设计。这项研究是一个独特的机会，可以解决有关可修改风险因素在认知障碍中的作用的关键问题，特别关注饮食习惯及其与肠道微生物群的关联以及大脑老龄化过程的标志。这些发现将有助于鼓励和计划生活方式干预，以预防和治疗，以促进健康的认知衰老。

NUTBRAIN研究旨在通过应用一种将传统流行病学方法与神经学和肠分析的新型多层次相结合，以特别关注营养对肠道菌群和大脑特征的影响，以特殊关注营养对肠道菌群和大脑特征的影响，并特别关注营养对肠道菌群和大脑特征的影响，以此来理解饮食的生物学机制的生物学机制。 NUTBRAIN研究的目的是：i）估计在65岁以上的社区居民老年人中MCI和其他认知障碍的发生； ii）调查生活方式习惯与认知衰老结果之间的关联； iii）探索饮食的作用，在调节肠道菌群组成中，这反过来也影响了大脑结构和功能。

NUTBRAIN研究是一项由国家研究委员会生物医学技术研究所（ITB-CNR，意大利递增）和IRCCS Fondazione Mondino（意大利帕维亚）的医院IRCCS，由国家研究委员会（ITB-CNR，Semgrate）和医院IRCCS IRCCS Hospital促进的一项持续的基于人群的队列研究。 Nutbrain研究分为三个阶段：

t = 1参与者的招聘。这项研究在北方米兰郊区的两个地点进行：鲍尔特和巴那二。从两个市政当局的官方居民官方登记册中得出一个随机样本。纳入标准是：参加研究机构的医疗任命，住在两个市政当局之一的家中，为65岁以上。通过一份邀请信与符合条件的人口联系，其中邀请人们​​通过电话与ITB-CNR联系，安排首次访问，在此期间，他/她被要求带来最后的乐器和临床考试。实施了全面的沟通运动，以宣传和促进该项目以及促进招聘。为了确保较高的入学率，自从招聘的最早计划阶段以来，这两个市政当局的市长一直积极参与，并授予了该项目的赞助。此外，该研究通过不同的渠道在社区层面进行推广和宣传：通过打印小册子和在高级娱乐中心，商店，药房，医生办公室和患者协会中的海报设置；通过当地报纸，机构网站以及社交媒体的文章和广告（例如Facebook，https://www.facebook.com/thenutbrainstudy/）。 NUTBRAIN研究有一个网站（www.nutbrain.it），潜在参与者被指示以获取更多信息，并可以注册兴趣参加。此外，为了提高认识，还组织了一些描述拟议研究目标的公共事件，以招募合格的人。

t = 2筛选评估。训练有素的团队在其住所城镇的研究机构（为残疾人安排家庭访问）参观了参与者。在数据收集之前，在研究机构完成了知情同意书。在那些没有能力完全知情同意的人中，代理人同意是从亲戚或看护者那里收集的。这项2小时的访谈包括对神经心理学的测试和问卷进行面对面管理，以询问社会人口统计学，职业和社会经济数据，教育，医疗状况和药物使用，生活方式习惯，功能状态，功能状态，功能状态，和饮食行为。在访问结束时，一个凳子采样套件，由无菌粪便组成的容器组成，其中包含说明粪便样品收集程序的说明，并向每个参与者提供了3天的食物日记。第一次访问旨在筛选每个参与者的认知功能，并以更全面的方式识别包含/排除标准。

t = 3临床评估。怀疑在筛查神经心理学测试中患有认知障碍的个体正在接受临床检查。参与者使用私人运输服务将参与者从自己的家中运送到医院，该服务完全涵盖了研究。医院的访问包括由神经科医生进行的标准神经检查和3T磁共振成像（MRI）扫描。在此阶段，从每个参与者那里收集血液和粪便样本，并存储在医院的生物库中直至加工。对于对MCI进行临床诊断的每个受试者，在医院（病例对照设计）招募了两个对同性和最接近出生日期的认知完整控制和最接近的出生日期的控制。

根据欧洲一般数据保护法规（EU）2016/679（GDPR）（https://gdpr-info.eu/）处理，监控，计算机化和存储日期安全数据。所有的研究记录，包括同意书，都保存在ITB-CNR的锁定文件柜中，其中用于数据存储的文件服务器所在。文件服务器在ITB-CNR Intranet中进行了防火墙。对于隐私和安全性，仅授予服务器管理员的密码才能访问数据库。对数据表格进行仔细检查，以获取缺少的数据和不一致之处。通过检查参与者的随机样本来监视数据库输入数据的质量。数据传输受到密码/解密策略和密码保护的方式保护。在最终数据集中，一个唯一的密钥可以标识每个主题以确保匿名。个人数据被认为是严格机密的，并在出口程序之前被删除。数据安全是通过自动备份保证。

• 认知功能障碍
• 饮食习惯

纳入标准：

• 参加研究机构的医疗任命
• 住在两个市政当局之一
• 已有65年以上

排除标准：

i）神经心理学标准：

• 受到痴呆症，先前存在的认知障碍（例如失语，忽视），随之而来的严重精神病，其他神经系统疾病（例如严重的抑郁和行为障碍）
• 不允许完成神经心理学评估的严重感官障碍（例如听觉和/或视觉丧失）

ii）微生物群的分析方案：

• 正在进行人造营养的人
• 主动不受控制的胃肠道疾病或疾病的病史（炎症性肠病，溃疡性结肠炎和克罗恩病）的病史
• 在过去的五年中，接受了胃肠道的先前大手术，但胆囊切除术和阑尾切除术的受试者
• 在访问前的4周内，使用抗生素或大剂量的商业益生菌
• 放射性化治疗的受试者

iii）MRI扫描协议：

• 体内金属碎片的受试者，手术植入金属的设备
• 严重的幽闭恐惧症
• 在研究期间，无法躺在MRI扫描仪中