• 安全性和耐受性（治疗发射器不良事件的发生率）[时间范围：通过研究完成的基线测量，平均1年]
  通过CTCAE版本5.0测量
• 安全性和耐受性（治疗发射器不良事件的发生率）通过重要的表征 - 血压[时间范围：通过研究完成时的测量时间，平均1年]
  通过重要的表征血压测量
• 通过生命体征心脏率[时间范围：通过研究完成时的测量，平均1年的测量时间：测量时间：
  通过生命签名 - 心率衡量
• 通过身体检查的安全性和耐受性（治疗效果不良事件的发生率）[时间范围：通过研究完成时的测量值，平均1年]
  通过身体检查结果衡量，包括一般外观，皮肤，眼睛/耳朵/鼻子/喉咙，头部和颈部。
• IFN-Y ELISPOT评估的EVX-02的药效动力响应（PD）[时间范围：基线通过研究完成时的测量，平均1年]
  EVX-02的药效学（PD）反应将通过检测疫苗诱导的循环新EPITOPE特异性T细胞来评估。将在免疫后和之后收集血液样本，免疫疗法诱导的T细胞反应将由IFN-Y ELISPOT分析。
• 通过MHC I多聚机分析评估的EVX-02的药效动力响应（PD）[时间范围：基线通过研究完成时的测量，平均1年]
  EVX-02的药效学（PD）反应将通过检测疫苗诱导的循环新EPITOPE特异性T细胞来评估。免疫之前，期间和之后，将收集血液样本。样品将通过MHC I多聚合物分析来分析，以检测Neoepitope识别的CD8+ T细胞报道为CD8+ T细胞中阳性细胞的频率。
• 细胞内细胞因子染色和流式细胞仪的EVX-02的药效动力反应（PD）[时间范围：基线通过研究完成时的测量，平均1年]
  EVX-02的药效学（PD）反应将通过检测疫苗诱导的循环新EPITPE特异性T细胞来评估。免疫之前，期间和之后，将收集血液样本。样品将通过流式细胞仪分析，以检测疫苗诱导的细胞内细胞因子反应，据报道是新EPITOPE反应性CD4+细胞和CD8+ T细胞的频率。

• 安全性和耐受性（治疗发射器不良事件的发生率）[时间范围：通过研究完成的基线测量，平均1年]
  通过CTCAE版本5.0测量
• 安全性和耐受性（治疗发射器不良事件的发生率）通过重要的表征 - 血压[时间范围：通过研究完成时的测量时间，平均1年]
  通过重要的表征血压测量
• 通过生命体征心脏率[时间范围：通过研究完成时的测量，平均1年的测量时间：测量时间：
  通过生命签名 - 心率衡量
• 通过身体检查的安全性和耐受性（治疗效果不良事件的发生率）[时间范围：通过研究完成时的测量值，平均1年]
  通过身体检查结果衡量，包括一般外观，皮肤，眼睛/耳朵/鼻子/喉咙，头部和颈部。
• IFN-Y ELISPOT评估的EVX-02的药效动力响应（PD）[时间范围：基线通过研究完成时的测量，平均1年]
  EVX-02的药效学（PD）反应将通过检测疫苗诱导的循环新EPITOPE特异性T细胞来评估。将在免疫后和之后收集采样的血液，并将分析免疫疗法诱导的T细胞反应。
• 通过MHC I多聚机分析评估的EVX-02的药效学反应（PD）。 [时间范围：通过研究完成时的基线测量，平均1年]
  EVX-02的药效学（PD）反应将通过检测疫苗诱导的循环新EPITOPE特异性T细胞来评估。在免疫后，期间和之后，将收集采样的血液。样品将通过MHC I多聚合物分析来分析，以检测识别CD8+ T细胞的CD8+ T细胞的Neoepitope，这是CD8+ T细胞中阳性细胞的频率。
• 通过细胞内细胞因子染色和流式细胞术的EVX-02的药效动力反应（PD）。 [时间范围：通过研究完成时的基线测量，平均1年]
  EVX-02的药效学（PD）反应将通过检测疫苗诱导的循环新EPITPE特异性T细胞来评估。在免疫后，期间和之后，将收集采样的血液。样品将通过流式细胞仪进行分析，以检测疫苗诱导的细胞内细胞因子反应，报道为新皮子反应性CD4+细胞和CD8+ T细胞的频率。

这项研究将分为两个部分：使用两种不同的药物递送方法和一个扩展队列的安全性，功效和PD响应部分。

所有患者将每4周服用一次抗PD-1，以供第1天开始使用1年，并在产生EVX-02疫苗。

第1部分将由两个队列组成：

队列A：将接收通过交付方法1的EVX-02A 1.同类B：将接收通过交付设备2交付的EVX-02B。第2部分（COHORT C）将是一个扩展队列。在这一部分中，只能使用一种输送方法，即EVX-02A或EVX-02B。

• 黑色素瘤IV期
• 黑色素瘤III期

• 药物：EVX-02A
  多达8名患者将接收EVX-02A管理IM。
  其他名称：a
• 药物：EVX-02B
  多达8名患者将接收EVX-02B管理IM。
  其他名称：b
• 药物：EVX-02A或EVX-02B
  将使用EVX-02A或EVX-02B。患者：24至30
  其他名称：C

• 实验：队列A：Nivolumab和EVX-02A
  EVX-02A管理IM。
  干预：药物：EVX-02A
• 实验：队列B：Nivolumab和EVX-02B
  EVX-02B管理IM。
  干预：药物：EVX-02B
• 实验：队列C：Nivolumab和EVX-02A或Nivolumab和EVX-02B
  选定的输送方法EVX02A或EVX-02B。
  干预：药物：EVX-02A或EVX-02B

纳入标准：

1. 在执行任何与协议相关的程序之前，已签名和日期为书面ICF，这不是正常标准护理的一部分。
2. 患者必须愿意并且能够遵守预定的访问，治疗时间表，实验室测试，肿瘤样本，包括核心针头活检以及研究的其他要求。
3. 在知情同意时，男性或女性≥18岁。

4. 完整切除之前，IIIB/IIIC/IIID或IV阶段AJCC（第8版）（AJCC，2018年）。

   请注意：如果III期黑色素瘤（无论是IIIB期还是IIIC期），患者必须具有可检测的临床检测到的淋巴结，这些淋巴结在病理报告中被证实是恶性肿瘤和/或溃疡的原发性病变。病理报告必须由研究人员进行审查，签名和日期；必须在将患者纳入研究之前完成此过程。临床可检测到的淋巴结定义为：

   1. CLND之后的明显节点（被病理确认为恶性）
   2. 通过CT扫描（短轴至少15毫米），一种非pa骨但扩大的淋巴结，并在CLND后通过病理证实是恶性肿瘤
   3. CLND后病理证实的任何大小的PET扫描阳性淋巴结
   4. 一个或多个淋巴结中病理学上宏转移性疾病的证据，由一个或多个黑色素瘤定义的直径至少1 cm，如果IV期黑色素瘤，病理学报告，必须在研究器之前由研究人员进行检查，日期和签名，以确认负缘。随机化。
5. 皮肤黑色素瘤，具有转移到区域淋巴结或远处转移酶的转移，可以在切除的试样上以负缘为单位切除。
6. 必须提供来自切除的肿瘤组织的标本，以通过NGS评估。
7. ECOG性能状态得分为0或1。

8. 筛选实验室值必须符合以下标准，并且必须在第1天首次剂量的抗PD-1之前的72小时内重新确认资格：

   我。 WBC≥2000/μL（2.0 x 109/L）II。中性粒细胞≥1500/μl（1.5 x109/l）III。血小板≥100x10³/μL（100 x 109/l）iv。血红蛋白≥9.0g/dl（90 g/l）v。肌酐血清肌酐≤1.5x ULN或肌酐清除率> 40 ml/minne（使用Cockcroft/Gault/Gault Formula）VI。 AST≤3x ULN VII。 Alt≤3x ULN VIII。总胆红素≥1.5x ULN（吉尔伯特综合症患者除外，胆红素总<3.0 mg/dl）

9. 预期寿命>筛查6个月。
10. WOCBP和男性必须同意使用足够的避孕（荷尔蒙或障碍方法，节育方法，禁欲），并在研究参与期间使用。如果妇女在参加这项研究时怀孕或怀疑自己怀孕，她应该立即通知她的医生。
11. WOCBP必须在第1天首次剂量的抗PD-1之前24小时内24小时内进行阴性血清或尿液妊娠试验（最小敏感性25 IU/L或同等单位）。
12. WOCBP必须同意按照研究药物的治疗时间遵循避孕方法的指示，加上5个半衰期的研究药物加30天（排卵周期的持续时间）。 Nivolumab的半衰期长达25天。因此，WOCBP应使用足够的方法来避免在治疗完成后23周内避免怀孕。
13. 与WOCBP进行性活跃的男性必须同意按照研究药物的治疗时间遵循避孕方法的指示，加上5个半衰期的研究药物加90天（精子持续时间）周转）。 Nivolumab的半衰期长达25天，因此，男性应使用适当的避孕方法，在治疗后完成31周。
14. 持续不再活跃的Azoospermic男性和WOCBP免于避孕要求。但是，WOCBP仍必须进行妊娠测试。
15. 根据研究者的病理报告审查，研究入学率无病（手术后）。

排除标准：

1. 其他恶性肿瘤的历史，除了：

   我。筛查前至少3年实现了完全缓解的非黑色素瘤皮肤癌； ii。无病至少5年的患者被研究者视为患这种恶性肿瘤的风险较低。 iii。如果在过去的5年内被诊断和治疗，患有以下癌症的患者：

   • 原位宫颈癌；
   • BCC;
   • 皮肤的SCC；
   • 非肌肉浸润性膀胱癌。
2. 临床上隐性淋巴结（IE通过SLN活检检测）N1A和N2A的患者。
3. 参加任何其他研究研究，除非该研究中的治疗已在筛查前停止至少30天或五个半衰期。
4. 对研究期间要施用的任何治疗剂的已知或怀疑过敏或超敏反应。
5. 不受控制的并发疾病，包括但不限于主动感染，症状心力衰竭' target='_blank'>充血性心力衰竭或心律不齐。
6. 有临床意义的胃肠道疾病，肾脏，肝，神经系统，血液学，血液学，内分泌，肿瘤学，肺，免疫学或心血管疾病，或任何其他调查人员认为会危及患者的安全性，研究的有效性结果。
7. 研究人员认为，不受控制的精神疾病或精神病表现将禁止遵守协议，对ICF的理解或退出研究的能力。
8. 艾滋病毒或已知免疫缺陷综合征（AIDS）的已知史或阳性测试史。
9. 对于患有慢性HBV感染证据的患者，如果指出，HBV病毒载量必须在抑制疗法上是无法检测的。
10. 患有HCV感染史的患者必须接受治疗和治愈。对于目前正在接受治疗的HCV感染患者，如果无法检测到的HCV病毒载量，则有资格。
11. 孕妇或护理妇女。
12. 眼或紫菜素黑色素瘤。
13. 在过境转移的历史
14. 癌性脑膜炎病史。
15. ≥3级对人单克隆抗体过敏的史。
16. 除白癜风，1型糖尿病，残留的自身免疫相关性甲状腺功能减退症（需要激素替代）或不需要全身治疗的牛皮癣以外，活跃，已知或怀疑的自身免疫性疾病或免疫抑制疾病，1型糖尿病，与自身免疫相关的甲状腺功能减退症除外。
17. 先前用免疫调节剂进行治疗，包括但不限于：IL-2，CTLA-4封锁，PD-1/PD-L1阻断，CD40刺激，CD137刺激 - 除了给予IFN-α作为辅助治疗以外的IFN-α以外高风险，手术切除的黑色素瘤（注：IFN-α疗法必须在入学研究前已停用超过4周）。
18. 先前研究的黑色素瘤指导的癌症疫苗疗法。
19. 先前的化学疗法，包括靶向疗法，例如BRAF或MEK抑制作用。
20. 在入学研究之前，使用非综合疫苗治疗可预防长达4周的传染病。
21. 患有需要全身治疗皮质类固醇（> 10 mg每天泼尼松等效）或其他免疫抑制药物的患者在第1天首次剂量的抗PD-1之前。自身免疫性疾病。

• 安全性和耐受性（治疗发射器不良事件的发生率）[时间范围：通过研究完成的基线测量，平均1年]
  通过CTCAE版本5.0测量
• 安全性和耐受性（治疗发射器不良事件的发生率）通过重要的表征 - 血压[时间范围：通过研究完成时的测量时间，平均1年]
  通过重要的表征血压测量
• 通过生命体征心脏率[时间范围：通过研究完成时的测量，平均1年的测量时间：测量时间：
  通过生命签名 - 心率衡量
• 通过身体检查的安全性和耐受性（治疗效果不良事件的发生率）[时间范围：通过研究完成时的测量值，平均1年]
  通过身体检查结果衡量，包括一般外观，皮肤，眼睛/耳朵/鼻子/喉咙，头部和颈部。
• IFN-Y ELISPOT评估的EVX-02的药效动力响应（PD）[时间范围：基线通过研究完成时的测量，平均1年]
  EVX-02的药效学（PD）反应将通过检测疫苗诱导的循环新EPITOPE特异性T细胞来评估。将在免疫后和之后收集血液样本，免疫疗法诱导的T细胞反应将由IFN-Y ELISPOT分析。
• 通过MHC I多聚机分析评估的EVX-02的药效动力响应（PD）[时间范围：基线通过研究完成时的测量，平均1年]
  EVX-02的药效学（PD）反应将通过检测疫苗诱导的循环新EPITOPE特异性T细胞来评估。免疫之前，期间和之后，将收集血液样本。样品将通过MHC I多聚合物分析来分析，以检测Neoepitope识别的CD8+ T细胞报道为CD8+ T细胞中阳性细胞的频率。
• 细胞内细胞因子染色和流式细胞仪的EVX-02的药效动力反应（PD）[时间范围：基线通过研究完成时的测量，平均1年]
  EVX-02的药效学（PD）反应将通过检测疫苗诱导的循环新EPITPE特异性T细胞来评估。免疫之前，期间和之后，将收集血液样本。样品将通过流式细胞仪分析，以检测疫苗诱导的细胞内细胞因子反应，据报道是新EPITOPE反应性CD4+细胞和CD8+ T细胞的频率。

• 安全性和耐受性（治疗发射器不良事件的发生率）[时间范围：通过研究完成的基线测量，平均1年]
  通过CTCAE版本5.0测量
• 安全性和耐受性（治疗发射器不良事件的发生率）通过重要的表征 - 血压[时间范围：通过研究完成时的测量时间，平均1年]
  通过重要的表征血压测量
• 通过生命体征心脏率[时间范围：通过研究完成时的测量，平均1年的测量时间：测量时间：
  通过生命签名 - 心率衡量
• 通过身体检查的安全性和耐受性（治疗效果不良事件的发生率）[时间范围：通过研究完成时的测量值，平均1年]
  通过身体检查结果衡量，包括一般外观，皮肤，眼睛/耳朵/鼻子/喉咙，头部和颈部。
• IFN-Y ELISPOT评估的EVX-02的药效动力响应（PD）[时间范围：基线通过研究完成时的测量，平均1年]
  EVX-02的药效学（PD）反应将通过检测疫苗诱导的循环新EPITOPE特异性T细胞来评估。将在免疫后和之后收集采样的血液，并将分析免疫疗法诱导的T细胞反应。
• 通过MHC I多聚机分析评估的EVX-02的药效学反应（PD）。 [时间范围：通过研究完成时的基线测量，平均1年]
  EVX-02的药效学（PD）反应将通过检测疫苗诱导的循环新EPITOPE特异性T细胞来评估。在免疫后，期间和之后，将收集采样的血液。样品将通过MHC I多聚合物分析来分析，以检测识别CD8+ T细胞的CD8+ T细胞的Neoepitope，这是CD8+ T细胞中阳性细胞的频率。
• 通过细胞内细胞因子染色和流式细胞术的EVX-02的药效动力反应（PD）。 [时间范围：通过研究完成时的基线测量，平均1年]
  EVX-02的药效学（PD）反应将通过检测疫苗诱导的循环新EPITPE特异性T细胞来评估。在免疫后，期间和之后，将收集采样的血液。样品将通过流式细胞仪进行分析，以检测疫苗诱导的细胞内细胞因子反应，报道为新皮子反应性CD4+细胞和CD8+ T细胞的频率。

这项研究将分为两个部分：使用两种不同的药物递送方法和一个扩展队列的安全性，功效和PD响应部分。

所有患者将每4周服用一次抗PD-1，以供第1天开始使用1年，并在产生EVX-02疫苗。

第1部分将由两个队列组成：

队列A：将接收通过交付方法1的EVX-02A 1.同类B：将接收通过交付设备2交付的EVX-02B。第2部分（COHORT C）将是一个扩展队列。在这一部分中，只能使用一种输送方法，即EVX-02A或EVX-02B。

• 黑色素瘤IV期
• 黑色素瘤III期

• 药物：EVX-02A
  多达8名患者将接收EVX-02A管理IM。
  其他名称：a
• 药物：EVX-02B
  多达8名患者将接收EVX-02B管理IM。
  其他名称：b
• 药物：EVX-02A或EVX-02B
  将使用EVX-02A或EVX-02B。患者：24至30
  其他名称：C

• 实验：队列A：Nivolumab和EVX-02A
  EVX-02A管理IM。
  干预：药物：EVX-02A
• 实验：队列B：Nivolumab和EVX-02B
  EVX-02B管理IM。
  干预：药物：EVX-02B
• 实验：队列C：Nivolumab和EVX-02A或Nivolumab和EVX-02B
  选定的输送方法EVX02A或EVX-02B。
  干预：药物：EVX-02A或EVX-02B

纳入标准：

1. 在执行任何与协议相关的程序之前，已签名和日期为书面ICF，这不是正常标准护理的一部分。
2. 患者必须愿意并且能够遵守预定的访问，治疗时间表，实验室测试，肿瘤样本，包括核心针头活检以及研究的其他要求。
3. 在知情同意时，男性或女性≥18岁。

4. 完整切除之前，IIIB/IIIC/IIID或IV阶段AJCC（第8版）（AJCC，2018年）。

   请注意：如果III期黑色素瘤（无论是IIIB期还是IIIC期），患者必须具有可检测的临床检测到的淋巴结，这些淋巴结在病理报告中被证实是恶性肿瘤和/或溃疡的原发性病变。病理报告必须由研究人员进行审查，签名和日期；必须在将患者纳入研究之前完成此过程。临床可检测到的淋巴结定义为：

   1. CLND之后的明显节点（被病理确认为恶性）
   2. 通过CT扫描（短轴至少15毫米），一种非pa骨但扩大的淋巴结，并在CLND后通过病理证实是恶性肿瘤
   3. CLND后病理证实的任何大小的PET扫描阳性淋巴结
   4. 一个或多个淋巴结中病理学上宏转移性疾病的证据，由一个或多个黑色素瘤定义的直径至少1 cm，如果IV期黑色素瘤，病理学报告，必须在研究器之前由研究人员进行检查，日期和签名，以确认负缘。随机化。
5. 皮肤黑色素瘤，具有转移到区域淋巴结或远处转移酶的转移，可以在切除的试样上以负缘为单位切除。
6. 必须提供来自切除的肿瘤组织的标本，以通过NGS评估。
7. ECOG性能状态得分为0或1。

8. 筛选实验室值必须符合以下标准，并且必须在第1天首次剂量的抗PD-1之前的72小时内重新确认资格：

   我。 WBC≥2000/μL（2.0 x 109/L）II。中性粒细胞≥1500/μl（1.5 x109/l）III。血小板≥100x10³/μL（100 x 109/l）iv。血红蛋白≥9.0g/dl（90 g/l）v。肌酐血清肌酐≤1.5x ULN或肌酐清除率> 40 ml/minne（使用Cockcroft/Gault/Gault Formula）VI。 AST≤3x ULN VII。 Alt≤3x ULN VIII。总胆红素≥1.5x ULN（吉尔伯特综合症患者除外，胆红素总<3.0 mg/dl）

9. 预期寿命>筛查6个月。
10. WOCBP和男性必须同意使用足够的避孕（荷尔蒙或障碍方法，节育方法，禁欲），并在研究参与期间使用。如果妇女在参加这项研究时怀孕或怀疑自己怀孕，她应该立即通知她的医生。
11. WOCBP必须在第1天首次剂量的抗PD-1之前24小时内24小时内进行阴性血清或尿液妊娠试验（最小敏感性25 IU/L或同等单位）。
12. WOCBP必须同意按照研究药物的治疗时间遵循避孕方法的指示，加上5个半衰期的研究药物加30天（排卵周期的持续时间）。 Nivolumab的半衰期长达25天。因此，WOCBP应使用足够的方法来避免在治疗完成后23周内避免怀孕。
13. 与WOCBP进行性活跃的男性必须同意按照研究药物的治疗时间遵循避孕方法的指示，加上5个半衰期的研究药物加90天（精子持续时间）周转）。 Nivolumab的半衰期长达25天，因此，男性应使用适当的避孕方法，在治疗后完成31周。
14. 持续不再活跃的Azoospermic男性和WOCBP免于避孕要求。但是，WOCBP仍必须进行妊娠测试。
15. 根据研究者的病理报告审查，研究入学率无病（手术后）。

排除标准：

1. 其他恶性肿瘤的历史，除了：

   我。筛查前至少3年实现了完全缓解的非黑色素瘤皮肤癌； ii。无病至少5年的患者被研究者视为患这种恶性肿瘤的风险较低。 iii。如果在过去的5年内被诊断和治疗，患有以下癌症的患者：

   • 原位宫颈癌；
   • BCC;
   • 皮肤的SCC；
   • 非肌肉浸润性膀胱癌。
2. 临床上隐性淋巴结（IE通过SLN活检检测）N1A和N2A的患者。
3. 参加任何其他研究研究，除非该研究中的治疗已在筛查前停止至少30天或五个半衰期。
4. 对研究期间要施用的任何治疗剂的已知或怀疑过敏或超敏反应。
5. 不受控制的并发疾病，包括但不限于主动感染，症状心力衰竭' target='_blank'>充血性心力衰竭或心律不齐。
6. 有临床意义的胃肠道疾病，肾脏，肝，神经系统，血液学，血液学，内分泌，肿瘤学，肺，免疫学或心血管疾病，或任何其他调查人员认为会危及患者的安全性，研究的有效性结果。
7. 研究人员认为，不受控制的精神疾病或精神病表现将禁止遵守协议，对ICF的理解或退出研究的能力。
8. 艾滋病毒或已知免疫缺陷综合征（AIDS）的已知史或阳性测试史。
9. 对于患有慢性HBV感染证据的患者，如果指出，HBV病毒载量必须在抑制疗法上是无法检测的。
10. 患有HCV感染史的患者必须接受治疗和治愈。对于目前正在接受治疗的HCV感染患者，如果无法检测到的HCV病毒载量，则有资格。
11. 孕妇或护理妇女。
12. 眼或紫菜素黑色素瘤。
13. 在过境转移的历史
14. 癌性脑膜炎病史。
15. ≥3级对人单克隆抗体过敏的史。
16. 除白癜风，1型糖尿病，残留的自身免疫相关性甲状腺功能减退' target='_blank'>甲状腺功能减退症（需要激素替代）或不需要全身治疗的牛皮癣以外，活跃，已知或怀疑的自身免疫性疾病或免疫抑制疾病，1型糖尿病，与自身免疫相关的甲状腺功能减退' target='_blank'>甲状腺功能减退症除外。
17. 先前用免疫调节剂进行治疗，包括但不限于：IL-2，CTLA-4封锁，PD-1/PD-L1阻断，CD40刺激，CD137刺激 - 除了给予IFN-α作为辅助治疗以外的IFN-α以外高风险，手术切除的黑色素瘤（注：IFN-α疗法必须在入学研究前已停用超过4周）。
18. 先前研究的黑色素瘤指导的癌症疫苗疗法。
19. 先前的化学疗法，包括靶向疗法，例如BRAF或MEK抑制作用。
20. 在入学研究之前，使用非综合疫苗治疗可预防长达4周的传染病。
21. 患有需要全身治疗皮质类固醇（> 10 mg每天泼尼松等效）或其他免疫抑制药物的患者在第1天首次剂量的抗PD-1之前。自身免疫性疾病。