• 在12周之前，经历严重不良事件（SAE）的研究参与者的数量。 [时间范围：12周]
  通过体格检查，生命体征，临床实验室和FVIII抑制剂水平（Bethesda分析）评估。严重的不良事件（SAE）是AE，导致以下任何结果：死亡；威胁生命的事件；需要或长时间住院住院；持续或严重的残疾/丧失能力；先天性异常。
• 通过NCI共同毒性标准（CTCAE）版本5.0评估CD68-ET3-LV CD34+后，严重不良事件的严重程度。 [时间范围：12周]
  严重的不利事件
• 给药CD68-ET3-LV CD34+后，严重不良事件的持续时间。 [时间范围：12周]
  如SAE的停止和结束日期所评估

• 绝对中性粒细胞计数（ANC）恢复的时间。 [时间范围：最多5年。这是给出的
  在Busulfan/busulfan/抗心理细胞球蛋白条件和自体CD34+ CD34+造血干细胞（HSPC）（HSPC）恢复的时间（第一天中性粒细胞计数连续三天连续三天）> 0.5 x 109/L（> 500/µl）。用CD68-ET3-LV转导。
• 时间恢复血小板。 [时间范围：最多5年。这是给出的
  在输注自体CD34+细胞后，用CD68-ET3-LV转导的自体CD34+细胞后，连续三天连续三天连续三天没有血小板输血的时间> 50,000/µl。
• 抗人类因子VIII抑制剂滴度[时间范围：测量长达5年。这是给出的
  通过贝塞斯达测定法进行评估
• 通过在FVIII缺乏等离子体中掺入ET3I的修饰的贝塞斯达测定法测量的ET3的免疫反应[时间框架：最多5年。这是给出的
  对ET3的免疫反应
• 由实时PCR确定的循环转基因细胞的矢量拷贝数[时间范围：最多5年。这是给出的
  通过实时PCR确定的向量拷贝数
• 通过LAM-PCR确定的循环转基因细胞的克隆性和使用LAM-PCR产物的DNA测序确定的[时间框架：最多5年。这是给出的
  克隆性评估通过LAM-PCR
• 自体HSCT CD68-ET3-LV基因治疗的存活。 [时间范围：治疗后最多12周]
  用CD68-ET3-LV CD34+进行自体HSCT治疗的受试者之间的存活率。

• 自体HSCT CD68-ET3-LV基因治疗的存活。 [时间范围：治疗后最多12周]
  用CD68-ET3-LV CD34+进行自体HSCT治疗的受试者之间的存活率。
• 通过修饰的Bethesda测定法测量的ET3的免疫反应，该测定法纳入FVIII缺乏等离子体中的ET3I [时间框架：长期随访（长达15年）]
  对ET3的免疫反应
• 绝对中性粒细胞计数（ANC）恢复的时间。 [时间范围：通过研究完成（最多15年）来衡量。这是给出的
  在Busulfan/busulfan/抗心理细胞球蛋白条件和自体CD34+ CD34+造血干细胞（HSPC）（HSPC）恢复的时间（第一天中性粒细胞计数连续三天连续三天）> 0.5 x 109/L（> 500/µl）。用CD68-ET3-LV转导。
• 时间恢复血小板。 [时间范围：通过研究完成（最多15年）来衡量。这是给出的
  血小板恢复的时间（第一天的血小板计数连续三天> 50,000/ µl，在前7天内没有血小板输血），在Busulfan/抗甲状腺细胞球蛋白调节和自体CD34+细胞输注CD668-ET3-ET3-LV， 。
• 由实时PCR确定的循环转基因细胞的矢量拷贝数[时间范围：长期随访（长达15年）]
  通过实时PCR确定的向量拷贝数
• 通过长期随访（长达15年）通过LAM-PCR确定的循环转基因细胞的克隆性[时间范围：长期随访（最多15年）]
  克隆性评估通过LAM-PCR

• 自体HSCT之后的VIII因子VIII（FVIII）活性水平[时间范围：测量长达5年。这是给出的
  通过循环血浆FVIII活性水平和检测因子VIII和ET3抗原测量
• 与基因治疗之前相比，通过出血发作的数量和相比进行了年度化出血率（ABR）。 [时间范围：通过长期随访（长达15年）测量。这是给出的
  为了评估使用CD68-ET3-LV CD34+自体HSCT对年化流血率的影响。
• 通过评估移植后使用历史凝血因子的使用与使用后的使用来消耗外源性因子VIII。 [时间范围：研究入学之前与移植后的历史数据（长达15年）。这是给出的
  与历史消费相比，移植后外源性FVIII消费量减少的参与者比例减少了。

• 基于单阶段凝结和发色测定法的血浆因子VIII（FVIII）活性水平。 [时间范围：从筛查访问到长期随访（长达15年）]
  循环血浆FVIII活性水平
• 与基因治疗之前相比，通过出血发作的数量和相比进行了年度化出血率（ABR）。 [时间范围：通过长期随访（长达15年）测量。这是给出的
  为了评估使用CD68-ET3-LV CD34+自体HSCT对年化流血率的影响。
• 通过评估移植后使用历史凝血因子的使用与使用后的使用来消耗外源性因子VIII。 [时间范围：研究入学之前与移植后的历史数据（长达15年）。这是给出的
  与历史消费相比，移植后外源性FVIII消费量减少的参与者比例减少了。
• 参与者的数量有植入转导CD68-ET3-LV CD34+细胞（转基因细胞）的证据。 [时间范围：从筛查访问到长期随访（长达15年）。这是给出的
  通过血液中的ET3转基因的存在来衡量。

• 药物：基因治疗
  用CD68-ET3慢病毒载体转导的CD34+造血干细胞（编码人因子VIII基因）是通过IV输注在用Busulfan和抗胞心细胞球蛋白调节后通过IV输注的。
  其他名称：CD68-ET3-LV CD34+
• 其他：生物学
  G-CSF和PlerixAFOR在分离术之前通过皮下注射给药。

纳入标准：

1. 能够为机构审查委员会批准的协议提供知情同意。
2. > = 18岁的男性受试者。
3. 基于一阶段凝血测定法的严重血友病A（<1 IU/DL因子VIII活性）的诊断。
4. 记录了超过150天的VIII治疗历史。
5. 在前三年中，每年至少需要每年需要治疗的平均水平，或者在预防启动之前的3年中每年至少需要4个出血，或者在物理或XoRogical检查中进行关节损伤的证据（膝盖，肘部或脚踝）被认为与血友病有关。
6. 绩效状态（Karnofsky得分）至少为70。
7. 移植后12周（3个月），愿意使用有效的屏障避孕或将性交限制为绝经后，外科手术或避孕伴侣的性交。
8. 愿意并且能够遵守协议的要求。

排除标准：

1. 在过去的5年中，自发性中枢神经系统的历史出血。

2. 自体干细胞移植后会干扰成功结果的主要器官的大量功能缺陷，将使用以下准则：

   1. 心脏：不应有明显的心脏功能障碍的证据（静止的左心室射血分数<50％），也没有明显的心脏肿大。不应有无法控制的高血压。
   2. 肾脏：GFR <60 mL/min/1.73m2每个地方机构标准，例如CKD-EPI肌酐方程或等效。
   3. 肝：不应有肝功能障碍的证据，该肝功能障碍定义为血清总胆红素> 1.5 mg/dl> 1.5 mg/dl和AST/ALT> 3x正常的上限。
   4. 血液学：绝对中性粒细胞计数（ANC）<1000/ µL或血小板计数<150,000/ µL。
   5. 肺功能具有校正后的一氧化碳扩散能力（CDLCO）<50％的预测。
3. FVIII抑制剂（> 0.4 Bethesda单位/mL）的历史记录，包括至少2个相距至少一周或任何单个滴度> 5 bu/ml进行的测量。
4. 患有先前基于细胞的治疗或基因编辑/基因治疗的受试者，包括先前的干细胞移植。
5. 具有活性感染或任何免疫抑制障碍的受试者，包括当前可检测的HIV病毒负荷
6. 筛选时，RPR，抗HTLV-1和II抗体，CMV PCR，VZV抗体和HSV PCR的受试者。
7. 对研究中使用的任何药物具有过敏反应或过敏性的受试者（即，抗胸腺细胞球蛋白，Plerixafor，G-CSF，Busulfan，Levetiracetam）或对研究产物制剂的组成部分。
8. 肝炎活性感染或慢性载体的证据基于筛查时的丙型肝炎DNA测试。
9. 丙型肝炎病毒（HCV）的阳性（根据局部机构标准可检测的病毒负荷）。抗HCV抗体呈阳性的受试者只要筛查时无法检测到的HCV病毒负荷为阴性。
10. 诊断出患有临床相关凝血或出血障碍的受试者A以外。
11. 使用可能影响止血的药物（例如阿司匹林，布洛芬和非Cox-2选择性非类固醇抗炎药）。
12. 具有恶性肿瘤病史的受试者（手术切除的非黑色素瘤皮肤癌除外）或具有一级癌症综合征家族史的受试者。
13. 在入学后6个月内（研究程序除外）的计划手术。
14. 用任何活疫苗或全身免疫抑制剂治疗，在CD68-ET3-LV CD34+输注前30天内不包括皮质类固醇。
15. 在入学前30天或5个半衰期（以更长的速度）中使用任何研究产品的治疗。
16. 自身免疫性疾病史（例如，炎症性肠病，全身性红斑狼疮，血管炎）。
17. 在另一项临床研究中同时入学，这可能会干扰这项研究的要求，或者有可能影响CD68-ET3-LV CD34+的安全性和功效的评估，除非它是一项非惯用观察性研究。
18. 研究人员认为，任何情况都将对受试者安全接受自体干细胞移植的能力产生负面影响。
19. 研究调查人员认为，任何原因将对受试者根据试验方案完成临床试验的能力产生负面影响。

• 在12周之前，经历严重不良事件（SAE）的研究参与者的数量。 [时间范围：12周]
  通过体格检查，生命体征，临床实验室和FVIII抑制剂水平（Bethesda分析）评估。严重的不良事件（SAE）是AE，导致以下任何结果：死亡；威胁生命的事件；需要或长时间住院住院；持续或严重的残疾/丧失能力；先天性异常。
• 通过NCI共同毒性标准（CTCAE）版本5.0评估CD68-ET3-LV CD34+后，严重不良事件的严重程度。 [时间范围：12周]
  严重的不利事件
• 给药CD68-ET3-LV CD34+后，严重不良事件的持续时间。 [时间范围：12周]
  如SAE的停止和结束日期所评估

• 绝对中性粒细胞计数（ANC）恢复的时间。 [时间范围：最多5年。这是给出的
  在fan' target='_blank'>Busulfan/busulfan/抗心理细胞球蛋白条件和自体CD34+ CD34+造血干细胞（HSPC）（HSPC）恢复的时间（第一天中性粒细胞计数连续三天连续三天）> 0.5 x 109/L（> 500/µl）。用CD68-ET3-LV转导。
• 时间恢复血小板。 [时间范围：最多5年。这是给出的
  在输注自体CD34+细胞后，用CD68-ET3-LV转导的自体CD34+细胞后，连续三天连续三天连续三天没有血小板输血的时间> 50,000/µl。
• 抗人类因子VIII抑制剂滴度[时间范围：测量长达5年。这是给出的
  通过贝塞斯达测定法进行评估
• 通过在FVIII缺乏等离子体中掺入ET3I的修饰的贝塞斯达测定法测量的ET3的免疫反应[时间框架：最多5年。这是给出的
  对ET3的免疫反应
• 由实时PCR确定的循环转基因细胞的矢量拷贝数[时间范围：最多5年。这是给出的
  通过实时PCR确定的向量拷贝数
• 通过LAM-PCR确定的循环转基因细胞的克隆性和使用LAM-PCR产物的DNA测序确定的[时间框架：最多5年。这是给出的
  克隆性评估通过LAM-PCR
• 自体HSCT CD68-ET3-LV基因治疗的存活。 [时间范围：治疗后最多12周]
  用CD68-ET3-LV CD34+进行自体HSCT治疗的受试者之间的存活率。

• 自体HSCT CD68-ET3-LV基因治疗的存活。 [时间范围：治疗后最多12周]
  用CD68-ET3-LV CD34+进行自体HSCT治疗的受试者之间的存活率。
• 通过修饰的Bethesda测定法测量的ET3的免疫反应，该测定法纳入FVIII缺乏等离子体中的ET3I [时间框架：长期随访（长达15年）]
  对ET3的免疫反应
• 绝对中性粒细胞计数（ANC）恢复的时间。 [时间范围：通过研究完成（最多15年）来衡量。这是给出的
  在fan' target='_blank'>Busulfan/busulfan/抗心理细胞球蛋白条件和自体CD34+ CD34+造血干细胞（HSPC）（HSPC）恢复的时间（第一天中性粒细胞计数连续三天连续三天）> 0.5 x 109/L（> 500/µl）。用CD68-ET3-LV转导。
• 时间恢复血小板。 [时间范围：通过研究完成（最多15年）来衡量。这是给出的
  血小板恢复的时间（第一天的血小板计数连续三天> 50,000/ µl，在前7天内没有血小板输血），在fan' target='_blank'>Busulfan/抗甲状腺细胞球蛋白调节和自体CD34+细胞输注CD668-ET3-ET3-LV， 。
• 由实时PCR确定的循环转基因细胞的矢量拷贝数[时间范围：长期随访（长达15年）]
  通过实时PCR确定的向量拷贝数
• 通过长期随访（长达15年）通过LAM-PCR确定的循环转基因细胞的克隆性[时间范围：长期随访（最多15年）]
  克隆性评估通过LAM-PCR

• 自体HSCT之后的VIII因子VIII（FVIII）活性水平[时间范围：测量长达5年。这是给出的
  通过循环血浆FVIII活性水平和检测因子VIII和ET3抗原测量
• 与基因治疗之前相比，通过出血发作的数量和相比进行了年度化出血率（ABR）。 [时间范围：通过长期随访（长达15年）测量。这是给出的
  为了评估使用CD68-ET3-LV CD34+自体HSCT对年化流血率的影响。
• 通过评估移植后使用历史凝血因子的使用与使用后的使用来消耗外源性因子VIII。 [时间范围：研究入学之前与移植后的历史数据（长达15年）。这是给出的
  与历史消费相比，移植后外源性FVIII消费量减少的参与者比例减少了。

• 基于单阶段凝结和发色测定法的血浆因子VIII（FVIII）活性水平。 [时间范围：从筛查访问到长期随访（长达15年）]
  循环血浆FVIII活性水平
• 与基因治疗之前相比，通过出血发作的数量和相比进行了年度化出血率（ABR）。 [时间范围：通过长期随访（长达15年）测量。这是给出的
  为了评估使用CD68-ET3-LV CD34+自体HSCT对年化流血率的影响。
• 通过评估移植后使用历史凝血因子的使用与使用后的使用来消耗外源性因子VIII。 [时间范围：研究入学之前与移植后的历史数据（长达15年）。这是给出的
  与历史消费相比，移植后外源性FVIII消费量减少的参与者比例减少了。
• 参与者的数量有植入转导CD68-ET3-LV CD34+细胞（转基因细胞）的证据。 [时间范围：从筛查访问到长期随访（长达15年）。这是给出的
  通过血液中的ET3转基因的存在来衡量。

• 药物：基因治疗
  用CD68-ET3慢病毒载体转导的CD34+造血干细胞（编码人因子VIII基因）是通过IV输注在用fan' target='_blank'>Busulfan和抗胞心细胞球蛋白调节后通过IV输注的。
  其他名称：CD68-ET3-LV CD34+
• 其他：生物学
  G-CSF和PlerixAFOR在分离术之前通过皮下注射给药。

纳入标准：

1. 能够为机构审查委员会批准的协议提供知情同意。
2. > = 18岁的男性受试者。
3. 基于一阶段凝血测定法的严重血友病A（<1 IU/DL因子VIII活性）的诊断。
4. 记录了超过150天的VIII治疗历史。
5. 在前三年中，每年至少需要每年需要治疗的平均水平，或者在预防启动之前的3年中每年至少需要4个出血，或者在物理或XoRogical检查中进行关节损伤的证据（膝盖，肘部或脚踝）被认为与血友病有关。
6. 绩效状态（Karnofsky得分）至少为70。
7. 移植后12周（3个月），愿意使用有效的屏障避孕或将性交限制为绝经后，外科手术或避孕伴侣的性交。
8. 愿意并且能够遵守协议的要求。

排除标准：

1. 在过去的5年中，自发性中枢神经系统的历史出血。

2. 自体干细胞移植后会干扰成功结果的主要器官的大量功能缺陷，将使用以下准则：

   1. 心脏：不应有明显的心脏功能障碍的证据（静止的左心室射血分数<50％），也没有明显的心脏肿大。不应有无法控制的高血压。
   2. 肾脏：GFR <60 mL/min/1.73m2每个地方机构标准，例如CKD-EPI肌酐方程或等效。
   3. 肝：不应有肝功能障碍的证据，该肝功能障碍定义为血清总胆红素> 1.5 mg/dl> 1.5 mg/dl和AST/ALT> 3x正常的上限。
   4. 血液学：绝对中性粒细胞计数（ANC）<1000/ µL或血小板计数<150,000/ µL。
   5. 肺功能具有校正后的一氧化碳扩散能力（CDLCO）<50％的预测。
3. FVIII抑制剂（> 0.4 Bethesda单位/mL）的历史记录，包括至少2个相距至少一周或任何单个滴度> 5 bu/ml进行的测量。
4. 患有先前基于细胞的治疗或基因编辑/基因治疗的受试者，包括先前的干细胞移植。
5. 具有活性感染或任何免疫抑制障碍的受试者，包括当前可检测的HIV病毒负荷
6. 筛选时，RPR，抗HTLV-1和II抗体，CMV PCR，VZV抗体和HSV PCR的受试者。
7. 对研究中使用的任何药物具有过敏反应或过敏性的受试者（即，抗胸腺细胞球蛋白，Plerixafor，G-CSF，fan' target='_blank'>Busulfan，Levetiracetam）或对研究产物制剂的组成部分。
8. 肝炎活性感染或慢性载体的证据基于筛查时的丙型肝炎DNA测试。
9. 丙型肝炎病毒（HCV）的阳性（根据局部机构标准可检测的病毒负荷）。抗HCV抗体呈阳性的受试者只要筛查时无法检测到的HCV病毒负荷为阴性。
10. 诊断出患有临床相关凝血或出血障碍的受试者A以外。
11. 使用可能影响止血的药物（例如阿司匹林，布洛芬和非Cox-2选择性非类固醇抗炎药）。
12. 具有恶性肿瘤病史的受试者（手术切除的非黑色素瘤皮肤癌除外）或具有一级癌症综合征家族史的受试者。
13. 在入学后6个月内（研究程序除外）的计划手术。
14. 用任何活疫苗或全身免疫抑制剂治疗，在CD68-ET3-LV CD34+输注前30天内不包括皮质类固醇。
15. 在入学前30天或5个半衰期（以更长的速度）中使用任何研究产品的治疗。
16. 自身免疫性疾病史（例如，炎症性肠病，全身性红斑狼疮，血管炎）。
17. 在另一项临床研究中同时入学，这可能会干扰这项研究的要求，或者有可能影响CD68-ET3-LV CD34+的安全性和功效的评估，除非它是一项非惯用观察性研究。
18. 研究人员认为，任何情况都将对受试者安全接受自体干细胞移植的能力产生负面影响。
19. 研究调查人员认为，任何原因将对受试者根据试验方案完成临床试验的能力产生负面影响。