• 评估治疗后进行的肿瘤活检中局部肿瘤破坏和免疫浸润的证据[时间范围：治疗后8周]
  治疗诱导的免疫反应将通过测量在基线时在基线和治疗后以2、3、4和8周的时间（2、3、4和8周）收集的T细胞对前列腺癌抗原的反应进行评估。
• 研究用ADNRGM和CB1954治疗后，细胞免疫反应对前列腺癌抗原的变化[时间范围：12个月]
  肿瘤破坏和免疫浸润的证据将通过查看组织损伤，残留肿瘤组织和免疫细胞浸润的模式在治疗后前列腺活检中检测到。

背景和理由：

局部复发的前列腺癌为基因疗法提供了一个有吸引力的靶标，因为肿瘤仍位于前列腺或周围组织的疾病长期。同样，使用超声引导，直肠注射或用于近距离透透疗法开发的超声引导，直肠注射或适应方法，将基因治疗载体的递送至前列腺也很简单，以提供多种模板引导的经腹膜注射以实现前列物的饱和覆盖率。已经在患有局部复发或转移性前列腺癌的患者中测试了几种基因疗法和基因免疫疗法，包括病毒定向酶前药治疗（VDEPT），有条件地复制腺病毒（CRADS）和基于GMCSF的免疫刺激。这些治疗良好的耐受性，并显示出抗肿瘤活性的一些证据。

硝酸还原酶/CB1954 VDEPT系统：

硝酸还原酶/CB1954系统采用大肠杆菌（NTR）作为前药激活酶，而CB1954用作可激活的前药。为了利用该系统删除了一个由E1-E3删除的，复制缺陷性的人腺病毒（AD5）指定的CTL102，该系统先前生成了巨细胞病毒（CMV）启动子的控制下包含NTR基因。 CTL102能够感染癌细胞并在体外诱导NTR表达，此外，NTR表达细胞也对CB1954敏感。在动物模型中进行的实验表明，可以在注射CTL102注射的前列腺癌异种移植物中检测到NTR表达，并且通过肿瘤内注射CTL102的抑制了异种移植物的生长，随后2天后，CB11954的腹膜内给药随后两天后。

CB1954前药转换和临床发展：

CB1954 [5-（Aziridin-1-基）-2,4-二硝基苯甲酰胺]是一种弱烷基化剂，由大鼠硝酸酶DT透明酶降低为有效的，功能性的烷基化剂（5-（5--氮杂质素-1-基）） -4-羟基氨基-2-硝基苯甲酰胺）交叉链接DNA，能够杀死分裂和非分裂细胞。 DT diaphorase的人和鼠形式在此反应中缺乏。发现由大肠杆菌的NFSB基因编码的硝酸还原酶比大鼠DT diaphorase的NFSB基因进行60至100倍相同的还原酶，这是在CTL102和ADNRGM中编码的酶（NTR）。

CB1954的I期药代动力学试验定义了其最大耐受剂量（MTD），剂量限制毒性和血浆浓度时间谱。将三个患者的十个队列用CB1954治疗3mg/m2至37.5 mg/m^2的剂量水平。未观察到骨髓抑制，肾毒性或脱发。在37.5 mg/m^2时，观察到剂量限制毒性（1级4级腹泻和两级2型肝毒性）；其他毒性包括恶心，呕吐，厌食和疲劳。记录在24 mg/m^2的副作用是3级恶心和疲劳，因此建议将此剂量作为未来临床试验的标准剂量。鉴于CB1954药物，几只动物发生了眼睛的镜头，也称为白内障。研究人员认为，这种变化极不可能发生在人类中，并且在先前的临床试验中接受该药物治疗的患者都没有这种并发症。

前列腺癌试验：

前列腺癌男性完成了CTL102/CB1954的I/II期临床试验。在试验的第一阶段，有20例计划在手术前通过肉眼注射，仅通过肉眼注射就可以单独接受CTL102。这一研究的目标是安全性，耐受性和NTR表达水平。免疫组织化学表明，肿瘤的腺上皮和正常前列腺组织的NTR染色在所有使用的剂量水平上（1x10^10至1x10^12个病毒颗粒）。在30-50％的前列腺试样载玻片中发现了NTR的表达，并且在使用较高的载体剂量或多次注射时似乎增加了，但是病毒剂量与NTR表达程度之间没有统计学意义的关系。基因疗法的耐受性很好，尽管一名接受5x10^10 VP的患者的DLT（瞬时胆红素增加）。因此，该队列被扩展，但没有观察到其他DLT，并且可以恢复剂量升级。 （随后将DLT归因于术后心肌梗塞。）其他不良事件是短暂的3级淋巴细胞尼亚（3例）和2级肝酶增加（4例患者）。没有与治疗有关的严重不良事件。

我们的数据表明，CTL102的肉体内注射，然后是静脉注射CB1954是安全且耐受性良好的11。 CTL102能够诱导NTR表达，CTL102/CB1954治疗提供了早期的活性迹象。然而，这种方法的总体抗肿瘤功效是亚最佳选择，只有两名患者显示PSA降低> 50％，并且在治疗后活检中仍然存在可行的肿瘤细胞。表达NTR的肿瘤细胞的比例相对较小，其局部分布可能导致CTL102/CB1954的抗肿瘤活性有限。为了提高疗效，当前的临床试验已纳入了两个重大改进：

1. 为了通过多种模板引导的跨性交注射，将使用前列腺近距离疗法技术的适应来实现载体在整个前列腺中的更好分布。
2. 为了通过基于GMCSF的免疫刺激提高功效VDEPT，将使用表达NTR和人类GMCSF的E1，E3删除的，复制有缺陷的腺病毒（ADNRGM）。

ADNRGM的提议剂量水平为10^10，3x10^10，10^11，3x10^11，10^12 VP，而前药CB1954将以24 mg/mg^2的标准剂量给出。体外实验使我们能够估计1 x 10^10 VP ADNRGM可能会导致5-25 µg GMCSF/24 h产生。 GMCSF的临床试验使用了500 µg的单剂量，或重复的剂量高达250 µg/m^2。研究人员认为，1 x 10^10 VP的起始剂量为GMCSF生产提供了足够的安全保证金。固定剂量或24 mg/m^2 CB1954是仅CB1954初始剂量降低试验后建议的剂量。

纳入标准：

• 在自由基放射疗法后，患有活检证实的前列腺癌的局部复发的患者，以及具有抗雄激素或LHRH激动剂/拮抗剂治疗或双侧兰花切除术后的有或没有雄激素抑制的PSA升高的患者。 PSA上升的定义是在最低6周的最短时间内增加了2个或4个读数，而时间点的分开至少为2周。如果患者接受抗雄激素或LHRH激动剂/拮抗剂疗法，则应继续进行此疗法。
• 预期寿命超过3个月。
• 年龄至少18岁。
• 书面知情同意。
• 世界卫生组织（WHO）的绩效状况为0-1。
• PSA值≥2和≤100ng/ml研究入口时。
• 足够的肝功能（即胆红素，AST，Alt，机构正常的上限<1.5 x上限）。
• 正常的肾功能（机构的<1.25 x上限限制）。
• 足够的血液功能（IE血红蛋白> 10G/DL，WCC> 3x109/L，血小板> 150x10^9/L）和正常凝血（INR和APTT <1.2）。
• 患者必须在ADNRGM给药后的12个月内不同意父亲，并且必须使用至少两种避孕方法，其中一种是障碍，从ADNRGM给药至少12个月开始。
• 没有已知的免疫能力。

排除标准：

• 具有前列腺或异常焦点的患者，在临床上被认为不适合跨性交模板引导的注射。
• 先前接受过前列腺近距离放射治疗的患者。
• 以前已接受ADNRGM和CB1954治疗的患者；或在过去5年内被管理任何其他人类腺病毒5型载体的人。
• 在研究后28天内接受了化学疗法，放疗或免疫疗法的患者。
• 需要特定治疗的急性主动感染（病毒，细菌或真菌）。
• 慢性丙型肝炎或C感染，HIV阳性患者。 （将对患者进行HBV/HCV的测试，而不是HIV）。
• 同时发生的严重医学疾病与治疗不符，包括精神病学可能会影响方案依从性。
• 不到3年前，其他器官或组织的肿瘤仍然活跃或从根本上进行治疗（除了成功治疗的非转移性皮肤癌或非肌肉浸润性膀胱癌不是排除标准）。
• 并发皮质类固醇或任何已知具有明显免疫抑制作用的药物。
• 患者无法进行定期医院评估。
• 基线时病毒感染' target='_blank'>腺病毒感染和/或脱落的证据。
• 研究者临床判断，即患者不应参与研究。

• Janssen，LP
• 英国卫生部
• 医学研究委员会

• 评估治疗后进行的肿瘤活检中局部肿瘤破坏和免疫浸润的证据[时间范围：治疗后8周]
  治疗诱导的免疫反应将通过测量在基线时在基线和治疗后以2、3、4和8周的时间（2、3、4和8周）收集的T细胞对前列腺癌抗原的反应进行评估。
• 研究用ADNRGM和CB1954治疗后，细胞免疫反应对前列腺癌抗原的变化[时间范围：12个月]
  肿瘤破坏和免疫浸润的证据将通过查看组织损伤，残留肿瘤组织和免疫细胞浸润的模式在治疗后前列腺活检中检测到。

背景和理由：

局部复发的前列腺癌为基因疗法提供了一个有吸引力的靶标，因为肿瘤仍位于前列腺或周围组织的疾病长期。同样，使用超声引导，直肠注射或用于近距离透透疗法开发的超声引导，直肠注射或适应方法，将基因治疗载体的递送至前列腺也很简单，以提供多种模板引导的经腹膜注射以实现前列物的饱和覆盖率。已经在患有局部复发或转移性前列腺癌的患者中测试了几种基因疗法和基因免疫疗法，包括病毒定向酶前药治疗（VDEPT），有条件地复制腺病毒（CRADS）和基于GMCSF的免疫刺激。这些治疗良好的耐受性，并显示出抗肿瘤活性的一些证据。

硝酸还原酶/CB1954 VDEPT系统：

硝酸还原酶/CB1954系统采用大肠杆菌（NTR）作为前药激活酶，而CB1954用作可激活的前药。为了利用该系统删除了一个由E1-E3删除的，复制缺陷性的人腺病毒（AD5）指定的CTL102，该系统先前生成了巨细胞病毒（CMV）启动子的控制下包含NTR基因。 CTL102能够感染癌细胞并在体外诱导NTR表达，此外，NTR表达细胞也对CB1954敏感。在动物模型中进行的实验表明，可以在注射CTL102注射的前列腺癌异种移植物中检测到NTR表达，并且通过肿瘤内注射CTL102的抑制了异种移植物的生长，随后2天后，CB11954的腹膜内给药随后两天后。

CB1954前药转换和临床发展：

CB1954 [5-（Aziridin-1-基）-2,4-二硝基苯甲酰胺]是一种弱烷基化剂，由大鼠硝酸酶DT透明酶降低为有效的，功能性的烷基化剂（5-（5--氮杂质素-1-基）） -4-羟基氨基-2-硝基苯甲酰胺）交叉链接DNA，能够杀死分裂和非分裂细胞。 DT diaphorase的人和鼠形式在此反应中缺乏。发现由大肠杆菌的NFSB基因编码的硝酸还原酶比大鼠DT diaphorase的NFSB基因进行60至100倍相同的还原酶，这是在CTL102和ADNRGM中编码的酶（NTR）。

CB1954的I期药代动力学试验定义了其最大耐受剂量（MTD），剂量限制毒性和血浆浓度时间谱。将三个患者的十个队列用CB1954治疗3mg/m2至37.5 mg/m^2的剂量水平。未观察到骨髓抑制，肾毒性或脱发。在37.5 mg/m^2时，观察到剂量限制毒性（1级4级腹泻和两级2型肝毒性）；其他毒性包括恶心，呕吐，厌食和疲劳。记录在24 mg/m^2的副作用是3级恶心和疲劳，因此建议将此剂量作为未来临床试验的标准剂量。鉴于CB1954药物，几只动物发生了眼睛的镜头，也称为白内障。研究人员认为，这种变化极不可能发生在人类中，并且在先前的临床试验中接受该药物治疗的患者都没有这种并发症。

前列腺癌试验：

前列腺癌男性完成了CTL102/CB1954的I/II期临床试验。在试验的第一阶段，有20例计划在手术前通过肉眼注射，仅通过肉眼注射就可以单独接受CTL102。这一研究的目标是安全性，耐受性和NTR表达水平。免疫组织化学表明，肿瘤的腺上皮和正常前列腺组织的NTR染色在所有使用的剂量水平上（1x10^10至1x10^12个病毒颗粒）。在30-50％的前列腺试样载玻片中发现了NTR的表达，并且在使用较高的载体剂量或多次注射时似乎增加了，但是病毒剂量与NTR表达程度之间没有统计学意义的关系。基因疗法的耐受性很好，尽管一名接受5x10^10 VP的患者的DLT（瞬时胆红素增加）。因此，该队列被扩展，但没有观察到其他DLT，并且可以恢复剂量升级。 （随后将DLT归因于术后心肌梗塞。）其他不良事件是短暂的3级淋巴细胞尼亚（3例）和2级肝酶增加（4例患者）。没有与治疗有关的严重不良事件。

我们的数据表明，CTL102的肉体内注射，然后是静脉注射CB1954是安全且耐受性良好的11。 CTL102能够诱导NTR表达，CTL102/CB1954治疗提供了早期的活性迹象。然而，这种方法的总体抗肿瘤功效是亚最佳选择，只有两名患者显示PSA降低> 50％，并且在治疗后活检中仍然存在可行的肿瘤细胞。表达NTR的肿瘤细胞的比例相对较小，其局部分布可能导致CTL102/CB1954的抗肿瘤活性有限。为了提高疗效，当前的临床试验已纳入了两个重大改进：

1. 为了通过多种模板引导的跨性交注射，将使用前列腺近距离疗法技术的适应来实现载体在整个前列腺中的更好分布。
2. 为了通过基于GMCSF的免疫刺激提高功效VDEPT，将使用表达NTR和人类GMCSF的E1，E3删除的，复制有缺陷的腺病毒（ADNRGM）。

ADNRGM的提议剂量水平为10^10，3x10^10，10^11，3x10^11，10^12 VP，而前药CB1954将以24 mg/mg^2的标准剂量给出。体外实验使我们能够估计1 x 10^10 VP ADNRGM可能会导致5-25 µg GMCSF/24 h产生。 GMCSF的临床试验使用了500 µg的单剂量，或重复的剂量高达250 µg/m^2。研究人员认为，1 x 10^10 VP的起始剂量为GMCSF生产提供了足够的安全保证金。固定剂量或24 mg/m^2 CB1954是仅CB1954初始剂量降低试验后建议的剂量。

纳入标准：

• 在自由基放射疗法后，患有活检证实的前列腺癌的局部复发的患者，以及具有抗雄激素或LHRH激动剂/拮抗剂治疗或双侧兰花切除术后的有或没有雄激素抑制的PSA升高的患者。 PSA上升的定义是在最低6周的最短时间内增加了2个或4个读数，而时间点的分开至少为2周。如果患者接受抗雄激素或LHRH激动剂/拮抗剂疗法，则应继续进行此疗法。
• 预期寿命超过3个月。
• 年龄至少18岁。
• 书面知情同意。
• 世界卫生组织（WHO）的绩效状况为0-1。
• PSA值≥2和≤100ng/ml研究入口时。
• 足够的肝功能（即胆红素，AST，Alt，机构正常的上限<1.5 x上限）。
• 正常的肾功能（机构的<1.25 x上限限制）。
• 足够的血液功能（IE血红蛋白> 10G/DL，WCC> 3x109/L，血小板> 150x10^9/L）和正常凝血（INR和APTT <1.2）。
• 患者必须在ADNRGM给药后的12个月内不同意父亲，并且必须使用至少两种避孕方法，其中一种是障碍，从ADNRGM给药至少12个月开始。
• 没有已知的免疫能力。

排除标准：

• 具有前列腺或异常焦点的患者，在临床上被认为不适合跨性交模板引导的注射。
• 先前接受过前列腺近距离放射治疗的患者。
• 以前已接受ADNRGM和CB1954治疗的患者；或在过去5年内被管理任何其他人类腺病毒5型载体的人。
• 在研究后28天内接受了化学疗法，放疗或免疫疗法的患者。
• 需要特定治疗的急性主动感染（病毒，细菌或真菌）。
• 慢性丙型肝炎或C感染，HIV阳性患者。 （将对患者进行HBV/HCV的测试，而不是HIV）。
• 同时发生的严重医学疾病与治疗不符，包括精神病学可能会影响方案依从性。
• 不到3年前，其他器官或组织的肿瘤仍然活跃或从根本上进行治疗（除了成功治疗的非转移性皮肤癌或非肌肉浸润性膀胱癌不是排除标准）。
• 并发皮质类固醇或任何已知具有明显免疫抑制作用的药物。
• 患者无法进行定期医院评估。
• 基线时病毒感染' target='_blank'>腺病毒感染和/或脱落的证据。
• 研究者临床判断，即患者不应参与研究。

• Janssen，LP
• 英国卫生部
• 医学研究委员会