胰腺癌（PC）是世界第四个常见癌症，占据了消化肿瘤的第二位，中国的发生率也急剧增加。由于症状的晚期发作和疾病诊断前通常达到的晚期阶段，它的预后特别差。因此，搜索更敏感和准确的肿瘤标记物对于应用具有巨大的价值。

循环肿瘤细胞（CTC）是一个无创指数，可以帮助诊断和监测肿瘤的负荷，在临床应用方面具有良好的前景。在原发性肿瘤（乳腺癌，结肠，肺或前列腺癌等）的形成和生长的早期，CTC被释放到血液中。关于CTC的已发表研究的重点是其预后意义，实时监测疗法的效用，抗药性靶标和理解转移过程。我们的主要目的是使用平台来识别CTC计数与PC进程之间的相关性。

化学疗法在PC术后治疗中起重要作用。但是，PC的化学治疗药物的效率仍然相对有限。患者衍生的异种移植（PDX）优选地再现PC的临床生物学特征，因此我们可以深入研究PC的发病机理和转移。此外，使用PDX平台定义了耐药的PC。从本研究中，PDX和Mini-PDX平台在连续传播后保持原始PC标本的建筑特性，这可以反映临床前医学研究，更好地服务于临床化学疗法并提高治疗效率。

条件重编程（CR）技术在非遗传操作中不增加病毒或细胞癌基因，这在正常生长和细胞的连续通过期间不会改变任何基因表型。通过CR获得一小部分PC患者样本后，该项目可以从微生物组织样品中扩大肿瘤样品，并为肿瘤药物易感性测试的随访提供基础。该实验还使用ctDNA（循环体内DNA）技术来检测PC的遗传信息，预计将改善PC的个性化精度诊断和处理，并有助于建立单个PC PDX的完整数据库。它为肿瘤学基本发展和翻译医学研究提供了理想的研究材料和平台。

肿瘤细胞从原发性肿瘤和/或转移性部位释放到血液中。作为液体活检的一部分，循环肿瘤细胞（CTC）被用作诊断癌症的新方法。许多研究表明，CTC计数与乳腺癌，结肠，肺或前列腺癌的发展有着相关性。当癌细胞的单个细胞或簇获得分离并脱离原发性肿瘤，通过周围组织迁移并进入淋巴系统和/或血液循环的能力时，给定肿瘤的转移性特征变得明显[1-3 ]。从主要微环境中逃脱的肿瘤细胞需要避免厌氧，可能会受到宿主的免疫防御的挑战。最后，CTC就像转移到其他器官的种子，导致转移和复发。这些CTC可以通过利用其物理和生物学特性的不同技术来富集和检测。这项研究通过ISET平台收集了CTC，该平台检查了CTC（治疗期间术前\术后\预处理\），并观察到CTC计数与PC开发之间的关联[4]。

证明患者来源的异种移植（PDX）始终保留肿瘤形态和遗传表型。与传统的细胞系异种移植模型和基因工程小鼠模型不同，胰腺腺癌标本植入了免疫缺陷的小鼠中。最重要的是，在个人情况下，PDX可以保持特殊的功能基因结构和生物标志物，更接近个体的临床生物学特征，并为药物筛查和观察提供更好的预测效果。

正如一些研究发现的那样，将药物敏感性测试与临床药物反应进行对比> 90％[5]。现在，我们构建PC的PDX，通过第二个遗传序列或RNA序列检查遗传信息。如果PDX具有与原发性肿瘤相似的遗传信息，我们将进行药物敏感性测试。 PC PDX模型，我们已经证明了早期PDX在形态上与原始癌症相似，并且保留了肿瘤的患者间和患者内异质性，可以为PC的个性化治疗提供参考模型。

最重要的是，PDX的最明显优势是与原发性肿瘤的相似性，因此我们可以检查同一药物的灵敏度。但是，建筑PDX将需要大约3-4个月（包括构建模型和药物敏感性测试）。结果，我们需要适用于发达的胰腺癌患者的临床精确治疗计划。来自上海Lide（Lide）Biotech CO（公司）的微型患者衍生的异种移植（Mini-PDX），与Lide Biotech的OncoveEtm-Mini PDX产品进行，并遵循制造商的指导。收集肿瘤样品，并用HBSS（汉克的平衡盐溶液）洗涤，以去除生物安全柜中的非肿瘤组织和坏死肿瘤组织。将肿瘤样品切成小片段后，将它们与胶原酶溶液在37℃下孵育1-2小时。然后，我们收集了细胞，然后去除血细胞和成纤维细胞细胞，然后将细胞悬浮液转移到HBSS洗涤后的胶囊中。对于皮下（SC）植入，进行了小的皮肤切口，并通过皮下组织插入胶囊。通常，每只小鼠接受了4个胶囊，并进行了药物管理7天。通过CTG（细胞活力）测定法评估了抗肿瘤活性。

辐照成纤维细胞喂食器和Rho激酶抑制剂Y-27632的组合有条件地诱导原发性哺乳动物上皮细胞中的不确定态。这些有条件重编程的细胞（CRC）是核型稳定和非果胶。由于自我更新是干细胞的公认特性，因此我们研究了Y-27632和馈线细胞是否诱导了类似干型的表型。我们发现，CRC共享成年干细胞的特征，并表现出α6和β1整合素，ΔNP63α，CD44和端粒酶逆转录酶的上调表达，以及Notch信号的降低和核β-catenin水平的降低。 CRC的诱导速度很快（发生在2 d之内），是由整个细胞种群的重编程而不是选择次要亚群的重新编程。 CRC没有过表达胚胎或诱导多能干细胞的转录因子集（例如Sox2，Oct4，Nanog或KLF4）。 CRC的诱导也是可逆的，去除Y-27632，馈线使细胞正常区分。 CRC是根据新闻人类精确协议召集的。在胰腺癌精确研究中，获得少量组织的无法手术或发达的患者无法构建PDX，并且失去了PDX治疗的机会。因此，我们使用CRCS平台可以在体外生长肿瘤干细胞，当有足够的细胞时，我们可以进行Mini-PDX或PDX药物测定[6]。

总而言之，由于目前无法获得PC患者的不同阶段，因此CTC \ PDX \ mini-PDX \ CRS \ RNA-SEQ \ ngs（下一代测序）的这项研究预计可提供精确诊断和PC患者不同阶段的治疗。同时，我们可以构建肿瘤信息生物库，该库为肿瘤学基础研究和转化医学研究提供了理想的研究材料和平台。

• 实验：由Mini-PDX/PDX引导的药物
  程序：肿瘤组织用于通过Mini-PDX，构建PC PDX的药物敏感性测试，并通过第二个遗传序列或RNA序列获得遗传信息。 PC患者将接受由Mini-PDX和测序的实验结果指导的个性化治疗方法。
  干预：程序：由Mini-PDX/PDX引导的药物
• 没有干预：根据指南毒品
  药物（吉西他滨，nab-paclitaxel，s-1）用于NCCN胰腺癌指南。

• Cristofanilli M，Budd GT，Ellis MJ，Stopeck A，Matera J，Miller MC，Reuben JM，Doyle GV，Allard WJ，Terstappen LW，Hayes DF。循环肿瘤细胞，疾病进展和转移性乳腺癌的存活。 N Engl J Med。 2004年8月19日； 351（8）：781-91。
• Cohen SJ，Punt CJ，Iannotti N，Saidman BH，Sabbath KD，Gabrail NY，Picus J，Morse M，Morte M，Mitchell E，Miller MC，Doyle GV，Tistring H，Tistring H，Terstappen LW，Meropol NJ。循环细胞循环细胞与肿瘤反应，无进展生存期以及转移性结直肠癌患者的总体存活率的关系。 J Clin Oncol。 2008年7月1日； 26（19）：3213-21。 doi：10.1200/jco.2007.15.8923。勘误：J Clin Oncol。 2009年4月10日； 27（11）：1923。
• Bettegowda C，Sausen M，Leary RJ，Kinde I，Wang Y，Agrawal N，Bartlett BR，Wang H，Wang H，Luber B，Alani RM，Antonarakis ES，Atonarakis ES，Azad NS，Bardelli A，Bardelli A，Bardelli A，Brem H，Brem H，Cameron JL，Lee CC，Fecher La，Fecher La，Fecher La , Gallia GL, Gibbs P, Le D, Giuntoli RL, Goggins M, Hogarty MD, Holdhoff M, Hong SM, Jiao Y, Juhl HH, Kim JJ, Siravegna G, Laheru DA, Lauricella C, Lim M, Lipson EJ, Marie SK，Netto GJ，Oliner KS，Olivi A，Olsson L，Riggins GJ，Sartore-Bianchi A，Schmidt K，Schmidt K，Shih LM，Oba-Shinjo SM，Siena S，Theodorescu D，Tie J，Tie J，Harkins TT，Harkins TT，Veronese S，Veronese S，Wang TL ，Weingart JD，Wolfgang CL，Wood LD，Xing D，Hruban RH，Wu J，Wu J，Allen PJ，Schmidt CM，Choti MA，Velculescu VE，Kinzler KW，Kinzler KW，Vogelstein B，Vogelstein B，Papadopopoulos N，Papadopoulos N，Papadopoulos N，Diaz La Jr。早期和晚期人类恶性肿瘤。 Sci Transl Med。 2014年2月19日； 6（224）：224RA24。 doi：10.1126/scitranslmed.3007094。
• Fiebig HH，Maier A，汉堡AM。具有既定的人类肿瘤异种移植物的克隆生成测定：体外活性的相关性，作为抗癌药物发现的基础。 EUR J癌。 2004年4月； 40（6）：802-20。
• Suprynowicz FA，Upadhyay G，Krawczyk E，Kramer SC，Hebert JD，Liu X，Yuan H，Yuan H，Cheluvaraju C，Clapp PW，Boucher RC JR，Kamonjoh CM，Randell SH，Randell SH，Randell SH，SchlegelR。成人上皮细胞。 Proc Natl Acad Sci US A. 2012年12月4日； 109（49）：20035-40。 doi：10.1073/pnas.1213241109。 Epub 2012 11月19日。

纳入标准：

• 接受胰腺癌的根本切除；
• 没有严重的潜在疾病；
• 没有术前化疗；
• 胰腺癌的诊断；
• 没有明显的心脏，肺或肾功能；
• 没有HIV或梅毒感染；
• 所有患者均应签署知情同意。

排除标准：

• 术前的一般状况很差，据估计，无法忍受手术和术后化疗和靶向治疗。
• 心绞痛不稳定的患者，有症状的心力衰竭' target='_blank'>充血性心力衰竭，严重的心律不齐，心脏梗塞在过去6个月中延长QT间隔（> 450ms）。
• 在过去的5年中，患有其他恶性肿瘤的患者。
• 患者不接受随访或其他临床试验。

胰腺癌（PC）是世界第四个常见癌症，占据了消化肿瘤的第二位，中国的发生率也急剧增加。由于症状的晚期发作和疾病诊断前通常达到的晚期阶段，它的预后特别差。因此，搜索更敏感和准确的肿瘤标记物对于应用具有巨大的价值。

循环肿瘤细胞（CTC）是一个无创指数，可以帮助诊断和监测肿瘤的负荷，在临床应用方面具有良好的前景。在原发性肿瘤（乳腺癌，结肠，肺或前列腺癌等）的形成和生长的早期，CTC被释放到血液中。关于CTC的已发表研究的重点是其预后意义，实时监测疗法的效用，抗药性靶标和理解转移过程。我们的主要目的是使用平台来识别CTC计数与PC进程之间的相关性。

化学疗法在PC术后治疗中起重要作用。但是，PC的化学治疗药物的效率仍然相对有限。患者衍生的异种移植（PDX）优选地再现PC的临床生物学特征，因此我们可以深入研究PC的发病机理和转移。此外，使用PDX平台定义了耐药的PC。从本研究中，PDX和Mini-PDX平台在连续传播后保持原始PC标本的建筑特性，这可以反映临床前医学研究，更好地服务于临床化学疗法并提高治疗效率。

条件重编程（CR）技术在非遗传操作中不增加病毒或细胞癌基因，这在正常生长和细胞的连续通过期间不会改变任何基因表型。通过CR获得一小部分PC患者样本后，该项目可以从微生物组织样品中扩大肿瘤样品，并为肿瘤药物易感性测试的随访提供基础。该实验还使用ctDNA（循环体内DNA）技术来检测PC的遗传信息，预计将改善PC的个性化精度诊断和处理，并有助于建立单个PC PDX的完整数据库。它为肿瘤学基本发展和翻译医学研究提供了理想的研究材料和平台。

肿瘤细胞从原发性肿瘤和/或转移性部位释放到血液中。作为液体活检的一部分，循环肿瘤细胞（CTC）被用作诊断癌症的新方法。许多研究表明，CTC计数与乳腺癌，结肠，肺或前列腺癌的发展有着相关性。当癌细胞的单个细胞或簇获得分离并脱离原发性肿瘤，通过周围组织迁移并进入淋巴系统和/或血液循环的能力时，给定肿瘤的转移性特征变得明显[1-3 ]。从主要微环境中逃脱的肿瘤细胞需要避免厌氧，可能会受到宿主的免疫防御的挑战。最后，CTC就像转移到其他器官的种子，导致转移和复发。这些CTC可以通过利用其物理和生物学特性的不同技术来富集和检测。这项研究通过ISET平台收集了CTC，该平台检查了CTC（治疗期间术前\术后\预处理\），并观察到CTC计数与PC开发之间的关联[4]。

证明患者来源的异种移植（PDX）始终保留肿瘤形态和遗传表型。与传统的细胞系异种移植模型和基因工程小鼠模型不同，胰腺腺癌标本植入了免疫缺陷的小鼠中。最重要的是，在个人情况下，PDX可以保持特殊的功能基因结构和生物标志物，更接近个体的临床生物学特征，并为药物筛查和观察提供更好的预测效果。

正如一些研究发现的那样，将药物敏感性测试与临床药物反应进行对比> 90％[5]。现在，我们构建PC的PDX，通过第二个遗传序列或RNA序列检查遗传信息。如果PDX具有与原发性肿瘤相似的遗传信息，我们将进行药物敏感性测试。 PC PDX模型，我们已经证明了早期PDX在形态上与原始癌症相似，并且保留了肿瘤的患者间和患者内异质性，可以为PC的个性化治疗提供参考模型。

最重要的是，PDX的最明显优势是与原发性肿瘤的相似性，因此我们可以检查同一药物的灵敏度。但是，建筑PDX将需要大约3-4个月（包括构建模型和药物敏感性测试）。结果，我们需要适用于发达的胰腺癌患者的临床精确治疗计划。来自上海Lide（Lide）Biotech CO（公司）的微型患者衍生的异种移植（Mini-PDX），与Lide Biotech的OncoveEtm-Mini PDX产品进行，并遵循制造商的指导。收集肿瘤样品，并用HBSS（汉克的平衡盐溶液）洗涤，以去除生物安全柜中的非肿瘤组织和坏死肿瘤组织。将肿瘤样品切成小片段后，将它们与胶原酶溶液在37℃下孵育1-2小时。然后，我们收集了细胞，然后去除血细胞和成纤维细胞细胞，然后将细胞悬浮液转移到HBSS洗涤后的胶囊中。对于皮下（SC）植入，进行了小的皮肤切口，并通过皮下组织插入胶囊。通常，每只小鼠接受了4个胶囊，并进行了药物管理7天。通过CTG（细胞活力）测定法评估了抗肿瘤活性。

辐照成纤维细胞喂食器和Rho激酶抑制剂Y-27632的组合有条件地诱导原发性哺乳动物上皮细胞中的不确定态。这些有条件重编程的细胞（CRC）是核型稳定和非果胶。由于自我更新是干细胞的公认特性，因此我们研究了Y-27632和馈线细胞是否诱导了类似干型的表型。我们发现，CRC共享成年干细胞的特征，并表现出α6和β1整合素，ΔNP63α，CD44和端粒酶逆转录酶的上调表达，以及Notch信号的降低和核β-catenin水平的降低。 CRC的诱导速度很快（发生在2 d之内），是由整个细胞种群的重编程而不是选择次要亚群的重新编程。 CRC没有过表达胚胎或诱导多能干细胞的转录因子集（例如Sox2，Oct4，Nanog或KLF4）。 CRC的诱导也是可逆的，去除Y-27632，馈线使细胞正常区分。 CRC是根据新闻人类精确协议召集的。在胰腺癌精确研究中，获得少量组织的无法手术或发达的患者无法构建PDX，并且失去了PDX治疗的机会。因此，我们使用CRCS平台可以在体外生长肿瘤干细胞，当有足够的细胞时，我们可以进行Mini-PDX或PDX药物测定[6]。

总而言之，由于目前无法获得PC患者的不同阶段，因此CTC \ PDX \ mini-PDX \ CRS \ RNA-SEQ \ ngs（下一代测序）的这项研究预计可提供精确诊断和PC患者不同阶段的治疗。同时，我们可以构建肿瘤信息生物库，该库为肿瘤学基础研究和转化医学研究提供了理想的研究材料和平台。

• 实验：由Mini-PDX/PDX引导的药物
  程序：肿瘤组织用于通过Mini-PDX，构建PC PDX的药物敏感性测试，并通过第二个遗传序列或RNA序列获得遗传信息。 PC患者将接受由Mini-PDX和测序的实验结果指导的个性化治疗方法。
  干预：程序：由Mini-PDX/PDX引导的药物
• 没有干预：根据指南毒品
  药物（吉西他滨，nab-paclitaxel，s-1）用于NCCN胰腺癌指南。

• Cristofanilli M，Budd GT，Ellis MJ，Stopeck A，Matera J，Miller MC，Reuben JM，Doyle GV，Allard WJ，Terstappen LW，Hayes DF。循环肿瘤细胞，疾病进展和转移性乳腺癌的存活。 N Engl J Med。 2004年8月19日； 351（8）：781-91。
• Cohen SJ，Punt CJ，Iannotti N，Saidman BH，Sabbath KD，Gabrail NY，Picus J，Morse M，Morte M，Mitchell E，Miller MC，Doyle GV，Tistring H，Tistring H，Terstappen LW，Meropol NJ。循环细胞循环细胞与肿瘤反应，无进展生存期以及转移性结直肠癌患者的总体存活率的关系。 J Clin Oncol。 2008年7月1日； 26（19）：3213-21。 doi：10.1200/jco.2007.15.8923。勘误：J Clin Oncol。 2009年4月10日； 27（11）：1923。
• Bettegowda C，Sausen M，Leary RJ，Kinde I，Wang Y，Agrawal N，Bartlett BR，Wang H，Wang H，Luber B，Alani RM，Antonarakis ES，Atonarakis ES，Azad NS，Bardelli A，Bardelli A，Bardelli A，Brem H，Brem H，Cameron JL，Lee CC，Fecher La，Fecher La，Fecher La , Gallia GL, Gibbs P, Le D, Giuntoli RL, Goggins M, Hogarty MD, Holdhoff M, Hong SM, Jiao Y, Juhl HH, Kim JJ, Siravegna G, Laheru DA, Lauricella C, Lim M, Lipson EJ, Marie SK，Netto GJ，Oliner KS，Olivi A，Olsson L，Riggins GJ，Sartore-Bianchi A，Schmidt K，Schmidt K，Shih LM，Oba-Shinjo SM，Siena S，Theodorescu D，Tie J，Tie J，Harkins TT，Harkins TT，Veronese S，Veronese S，Wang TL ，Weingart JD，Wolfgang CL，Wood LD，Xing D，Hruban RH，Wu J，Wu J，Allen PJ，Schmidt CM，Choti MA，Velculescu VE，Kinzler KW，Kinzler KW，Vogelstein B，Vogelstein B，Papadopopoulos N，Papadopoulos N，Papadopoulos N，Diaz La Jr。早期和晚期人类恶性肿瘤。 Sci Transl Med。 2014年2月19日； 6（224）：224RA24。 doi：10.1126/scitranslmed.3007094。
• Fiebig HH，Maier A，汉堡AM。具有既定的人类肿瘤异种移植物的克隆生成测定：体外活性的相关性，作为抗癌药物发现的基础。 EUR J癌。 2004年4月； 40（6）：802-20。
• Suprynowicz FA，Upadhyay G，Krawczyk E，Kramer SC，Hebert JD，Liu X，Yuan H，Yuan H，Cheluvaraju C，Clapp PW，Boucher RC JR，Kamonjoh CM，Randell SH，Randell SH，Randell SH，SchlegelR。成人上皮细胞。 Proc Natl Acad Sci US A. 2012年12月4日； 109（49）：20035-40。 doi：10.1073/pnas.1213241109。 Epub 2012 11月19日。

纳入标准：

• 接受胰腺癌的根本切除；
• 没有严重的潜在疾病；
• 没有术前化疗；
• 胰腺癌的诊断；
• 没有明显的心脏，肺或肾功能；
• 没有HIV或梅毒感染；
• 所有患者均应签署知情同意。

排除标准：

• 术前的一般状况很差，据估计，无法忍受手术和术后化疗和靶向治疗。
• 心绞痛不稳定的患者，有症状的心力衰竭' target='_blank'>充血性心力衰竭，严重的心律不齐，心脏梗塞在过去6个月中延长QT间隔（> 450ms）。
• 在过去的5年中，患有其他恶性肿瘤的患者。
• 患者不接受随访或其他临床试验。