• 与基线相比，脊柱敏化[时间框架：T3（12周后）的RTH（MA）变化（T0）]
  通过伤害性戒断反射的单个刺激反射阈值（RTH）测量。
• 与基线相比，炎症生物标志物剖面[时间范围：T3（12周后）的miR-382-5p变化（12周）]
  通过miR-382-5p的血浆水平测量
• 与基线相比，炎症生物标志物剖面[时间范围：T3（12周后）的miR-34a-5p变化（12周）]
  通过miR-34a-5p的血浆水平测量
• 与基线相比，偏头痛的残疾评估（MIDAS）[时间范围：T3（12周后）的MIDAS得分（T0）的变化（T0）]
  通过MIDAS测试测量偏头痛相关的残疾：0-5（I级）：最小残疾，6-10（II级）：轻度残疾，11-20（III级）：中度残疾，21-40（IVA级） ：严重的残疾，41及更高（IVB级）：非常严重的残疾。
• 与基线相比，T3（12周后）的Headache撞击测试-6（HIT-6）[时间范围：在T3（12周后）的更改（T0）]
  通过HIT-6测试衡量的偏头痛相关残疾：49或更少：无影响，50-55：某些影响，56-59：实质性影响，60-78严重影响。
• 与基线相比，异常症状症状清单（ASC-12）[时间范围：T3（12周后）的ASC-12分数变化（T0）]
  通过ASC-12测试测量偏头痛相关的残疾：0-2：无； 3-5：温和； 6-8：中等； 9或更多：严重。
• 与基线相比，特定于偏头痛的生活质量问卷（MSQ）[时间范围：T3（12周后）的MSQ2分数（12周）]
  MSQ衡量的生活质量。 14项评估，每个项目都按6分制（从“无时间”到“所有时间”）进行了6分级评估。我们评估了3个分数，即角色函数限制性（RR），角色函数预防（RP）和情绪功能（EF）。原始分数已转换为100分制，较高的分数表明生活质量更高。
• 与基线相比，短表健康调查（SF-36）[时间范围：T3（12周后）的SF-36分数变化（T0）]
  SF-36衡量的生活质量。 36个项目评估为我们提供了有关8个不同领域的信息：身体功能（10个项目），角色 - 物理（4个项目），身体疼痛（2个项目）和一般健康（5个项目）。心理健康措施由活力（4个项目），社会功能（2个项目），角色情感（3个项目）和心理健康（5个项目）组成
• 与基线相比，医院的焦虑和抑郁量表（HADS）[时间范围：T3（12周后）的HADS评分变化（T0）]
  由HADS衡量的心理状态。 14个项目的问卷调查表（0-3）李克特量表评估焦虑和抑郁症状。在两个不同领域中的分数为8或更高被认为对焦虑和/或抑郁症很重要。
• 利兹依赖问卷（LDQ）[时间范围：与基线相比（T0）在T3（12周后）的LDQ评分变化（T0）]
  LDQ测量的心理状态。它是一种自我完成的10个项目仪器，用于测量对各种物质的依赖。没有建立依赖性的截止分数
• 与基线相比，多伦多的急症量表（TAS-20）[时间范围：T3（12周后）的TAS-20分数变化（12周）]
  TAS-20测量的心理状态。它是5分（1-5）的20项问卷。李克特量表评估alexthymia特征，即，个人难以用文字表达自己的感受。对于静脉肌症的存在，评分为61或更高是显着的。
• 阳性临床结果的患者百分比[时间范围：T3时30％响应者患者的百分比（T0后12周）]
  通过减少偏头痛的患者百分比至少30％（30％响应者）来衡量。
• 临床结果阳性的患者百分比[时间范围：T3时50％响应者患者的百分比（T0后12周）]
  通过减少偏头痛的患者百分比（至少为50％）（50％响应者）来衡量。

靶向降钙素基因相关肽（CGRP）的单克隆抗体（MABS）被证明在预防性治疗情节性和慢性偏头痛以及难以治疗的患者中有效过度使用（mo）。

慢性偏头痛（CM）中的特征功能障碍是敏化的，是在三角血管系统中发生的，但随后扩散到中枢神经系统，在中枢神经系统中，它在多个区域的神经元兴奋性增加。 CM患者的一些神经生理研究表明，大脑和脊柱水平的中枢敏化发生。

microRNA（miRNA）参与了慢性疼痛的产生和维持。当前的证据表明，特定的miRNA也可能在偏头痛中发挥作用，从而代表了疾病的可能生物标志物。先前的一项研究报告了miR-34a-5p和miR-382-5p的上调，该上调分别涉及在偏头痛攻击过程中的调节GABA能信号传导和IL-10基因表达。

这种开放标签的目的是，假设生成研究的目的是评估ernumab治疗对以前至少失败至少2种预防治疗的CM患者的神经生理学，生物分子和心理方面的影响。

这项研究包括与IRCCS Mondino基金会头痛科学中心的神经科医生进行的首次筛查，在此期间进行了全面的神经系统和一般检查，并收集了所有参加Mondino Foundation的常规头痛日记的数据检查以确认包含/排除标准。

如果患者符合标准，则他/她将在一个月的基线观察期内入学一个月。在基线观察期结束时（T0），如果仍然满足纳入/排除标准，患者完成了以下程序：记录临床和人口统计学特征，生命体征评估，神经生理评估，基于DSM（诊断和诊断和诊断）（精神障碍的统计手册），静脉抽血以及有关心理状态，健康状况和生活质量的一组自我管理问卷的汇编。

在T0时，皮下处理了70毫克的Erenumab的第一剂治疗患者。

28天（4个整周）后，患者返回第二次访问（T1），以报告临床变量和不良事件。在T1期间，给予第二次注射Erenumab 70 mg，而在额外的28天间隔（T2）后，患者本身将三分之一也是最后一个剂量的Erenumab 70 mg自我管理。然后，该研究的最后一次访问（T3）计划从T1开始56天，那是最后一剂Erenumab的28天。在T3上，对患者进行了与T0进行的相同多学科评估的测试：记录临床和人口统计学特征，生命体征评估，神经生理学评估，静脉血液采样以及有关患者有关心理状态的健康状况，健康状况和质量的问卷的汇编，生活。

伤害性戒断反射测量。伤害性戒断反射（NWR）被认为是研究脊柱伤害性传播的客观和坚实的神经生理技术。该反射是根据一个经过良好验证的程序记录在下肢的，在09:00 AM至11:00 AM之间的专业技术人员的安静环境中。患者处于舒适的位置，脚踝在90°弯曲，膝盖在130°时弯曲。用一对AG/AGCL表面电极在外侧癌症后面进行电刺激。电刺激由5个连续的平方脉冲（1 ms，200 Hz）制成，每60-120秒随机传递一次。肌电图（Synergy，Medelec，英国）是从带有一对AG/AGCL表面电极的股二头肌乳头上的Capitis brevis记录的。用于所有阈值评估，使用楼梯方法，每步的强度增加了0.3 mA。记录参数为：分析时间300毫秒，灵敏度20 mV和滤波器带路3至3000 Hz。

研究人员首先评估了NWR（RTH）的单个刺激反射阈值，该阈值定义为最低强度（MA），能够诱导3个连续的3个稳定肌肉反应至少20 mV和10 ms。他们还评估了平均AUC（曲线下的面积-MV X MS），平均潜伏期（MS）和主观疼痛感知，以0-10点视觉模拟量表（VAS-RTH）为0-10点。

然后，研究人员通过以2 Hz的频率进行5个电刺激的火车评估了时间求和阈值（TST）。 TST被定义为最低强度（MA）能够在第四和第五肌电图中连续3次连续3次稳定的肌肉反应。他们还评估了第一个（VAS-TST-1）和TST上的第五（VAS-TST-1）和第五（VAS-TST-5）刺激的主观疼痛感知。

microRNAS表达。通过实时逆转录（RT）PCR在外周血单核细胞（PBMC）中评估microRNA表达。

PBMC分离：在含有参与者的管的乙二胺四乙酸中收集血液样本（10 mL）。用磷酸盐缓冲液（PBS）（Sigma）以1：1的比率稀释血液样本。将稀释的血液样品缓慢加载到ficoll分离溶液（10 mL）（Sigma）中，并在室温下以800 g离心30分钟。将积聚为中白色单层的PBMC在无菌PBS中以300 g洗涤两次，持续15分钟。洗涤后，将PBMC固定并存储在-80°C下，直至使用。

MicroRNA基因表达：使用Direct-Zol RNA Mini Prep Plus（Zymo Research）进行RNA从PBMC中分离。通过使用纳米体分光光度计（Nanodrop™Thermo Fisher Scientific，Euroclone Milano）在230和280 nm处的吸光度确定RNA浓度。使用Mirxmirna第一线合成（Takara-Diatech，Jesi-An Italy）和TB Green Q-RT PCR（Takara-Diatech，Jesi-An Italy）来确定miRNA-34A-34A-5P的表达水平，从而进行cDNA的合成。和miRNA-382-5p。在95°C下进行变性，并通过两步循环（95-60°C）对40个循环进行扩增，并使用光循环480仪器480仪器RT-PCR检测系统（Roche，Roche，Roche，Milan，意大利）。用U6（一种小核RNA）将靶基因表达水平归一化，用作管家基因。根据2- ∆CT = 2-（CT基因-CT管家基因）公式通过使用CT值计算基因表达水平。

残疾和心理评估。

电池包括：

4）与偏头痛有关的残疾和相关特征：

• 偏头痛的残疾评估（MIDAS）测试：0-5（I级）：最小残疾，6-10（II级）：轻度残疾，11-20（III级）：中度残疾，21-40（IVA级）：严重的残疾，41及更高（IVB级）：非常严重的残疾；
• 头痛影响测试-6（HIT-6）：49或更少：无影响，50-55：有些影响，56-59：实质性影响，60-78严重影响；
• 对偏头痛疼痛平均强度评估的伤害性评分量表：0无疼痛-10非常严重；

• 异常性症状清单（ASC-12）：0-3：轻度皮肤异常性痛，6-8：中度皮肤异常性异常性疾病，9及更高：严重的皮肤异常性异常性异常。

  5）生活质量：

• 特定于偏头痛的生活质量问卷（MSQ）：14项评估，每个项目的评分为6分（从“无时间”到“所有时间”）。然后将原始分数转换为100分制，较高的分数表明生活质量更高。
• 简短表格健康调查（SF-36）：11项评估，指的是两个主要子域，即心理成分摘要（MCS）和物理成分摘要（PCS）；

• 健康0-100：在确切评估时刻，要求患者在0-100的量表范围内得分为0-100。

  6）心理状态：

• 医院焦虑和抑郁量表（HADS）：一份14项问卷，以4分（0-3）的李克特量表评估焦虑和抑郁症状。在两个不同领域中的分数为8或更高被认为对焦虑和/或抑郁症很重要。
• 利兹依赖问卷（LDQ）：0-3级的10个项目仪器，以测量对各种物质的依赖性。尚未建立依赖性的截止分数；
• 多伦多亚历症亚米亚量表（TAS-20）：一份针对5分（1-5）李克特量表的20项问卷，评估了alexthymia特征，即，个人难以用文字表达自己的感觉。对于急诊素的存在，评分为61或更高是显着的。
• 童年创伤问卷：包括13个指代不同类型的儿童创伤的项目，这些创伤被认为是创伤经历总数的；
• 压力性的生活事件问卷：由58个压力大的生活事件（例如，搬家，离婚，新工作，解雇等）组成。要求患者在过去10年中勾选出那些发生的事件。

• Charles A，Pozo-Rosich P.靶向降钙素基因相关肽：偏头痛治疗的新时代。柳叶刀。 2019年11月9日； 394（10210）：1765-1774。 doi：10.1016/s0140-6736（19）32504-8。 EPUB 2019年10月23日。
• Ashina M，Tepper S，Brandes JL，Reuter U，Boudreau G，Dolezil D，Cheng S，Zhang F，Lenz R，Klatt J，Mikol DD。 Erenumab（AMG334）在慢性偏头痛患者中的疗效和安全性先前的预防治疗失败：对随机，双盲，安慰剂对照研究的亚组分析。头痛。 2018年9月； 38（10）：1611-1621。 doi：10.1177/0333102418788347。 Epub 2018 7月8日。
• Tepper SJ，Diener HC，Ashina M，Brandes JL，Friedman DI，Reuter U，Cheng S，Nilsen J，Leonardi DK，Lenz RA，Mikol DD。慢性偏头痛中的Erenumab用药物过度使用：一项随机试验的亚组分析。神经病学。 2019年5月14日； 92（20）：E2309-E2320。 doi：10.1212/wnl.00000000007497。 EPUB 2019年4月17日。
• Coppola G，Di Lorenzo C，Schoenen J，Pierelli F.初级头痛的习惯和敏化。 J头痛疼痛。 2013年7月30日； 14：65。 doi：10.1186/1129-2377-14-65。审查。
• De Icco R，Perrotta A，Grillo V，Cosentino G，Sances G，Sandrini G，TassorelliC。实验诱导的脊柱伤害感受敏化的敏感性随偏头痛频率而增加：一项单盲对照研究。疼痛。 2020年2月; 161（2）：429-438。 doi：10.1097/j.pain.0000000000001726。
• Andersen HH，Duroux M，Gazerani P.在攻击和无痛时期内偏头痛的血清microRNA签名。摩尔神经生物醇。 2016年4月； 53（3）：1494-1500。 doi：10.1007/s12035-015-9106-5。 Epub 2015年2月1日。
• 国际头痛协会（IHS）的头痛分类委员会国际头痛障碍分类，第三版。头痛。 2018年1月； 38（1）：1-211。 doi：10.1177/0333102417738202。
• Demartini C，Greco R，Zanaboni AM，Sances G，De Icco R，Borsook D，Tassorelli C.硝酸甘油作为偏头痛疼痛的比较实验模型：从动物到人类和背部。 prog神经寄生醇。 2019年6月； 177：15-32。 doi：10.1016/j.pneurobio.2019.02.002。 EPUB 2019 2月13日。评论。
• Sandrini G，Serrao M，Rossi P，Romaniello A，Cruccu G，Willer JC。人类的下肢屈曲反射。 prog神经寄生醇。 2005年12月； 77（6）：353-95。 Epub 2005年12月28日。
• Schmittgen TD，Livak KJ。通过比较C（T）方法分析实时PCR数据。 NAT PROTOC。 2008; 3（6）：1101-8。
• Stewart WF，Lipton RB，Dowson AJ，SawyerJ。偏头痛残疾评估（MIDAS）问卷的开发和测试，以评估与头痛相关的残疾。神经病学。 2001; 56（6补充1）：S20-8。审查。
• Kosinski M，Bayliss MS，Bjorner JB，Ware JE JR，Garber WH，Batenhorst A，Cady R，DahlöfCG，Dowson A，TepperS。一项六个项目的短期调查，用于测量头痛影响：HIT-6。 Qual Life Res。 2003年12月; 12（8）：963-74。
• Lipton RB，Bigal ME，Ashina S，Burstein R，Silberstein S，Reed ML，Serrano D，Stewart WF；美国偏头痛预防咨询小组。偏头痛人群的皮肤异常性疾病。 Ann Neurol。 2008年2月； 63（2）：148-58。
• Jhingran P，Osterhaus JT，Miller DW，Lee JT，Kirchdoerfer L.开发和验证偏头痛特定的生活质量问卷。头痛。 1998年4月； 38（4）：295-302。
• Apolone G，MosconiP。意大利SF-36健康调查：翻译，验证和规范。 J Clin Epidemiol。 1998年11月； 51（11）：1025-36。
• Scalone L，Cortesi PA，Mantovani LG，Ciampichini R，Cesana G.来自意大利一般人群的参考EQ-5D-3L和EQ-5D-5L数据。价值健康。 2014年11月； 17（7）：A514-5。 doi：10.1016/j.jval.2014.08.1591。 EPUB 2014年10月26日。
• Bjelland I，Dahl AA，Haug TT，NeckelmannD。医院焦虑和抑郁量表的有效性。更新的文献综述。 J Psychosom Res。 2002年2月； 52（2）：69-77。审查。
• Raistrick D，Bradshaw J，Tober G，Weiner J，Allison J，Healey C. Leeds依赖问卷（LDQ）的开发：在治疗评估包中测量酒精和鸦片依赖性的问卷。瘾。 1994年5月； 89（5）：563-72。
• Bagby RM，Parker JDA，Taylor GJ。 25年的20个项目多伦多alexthymia量表。 J Psychosom Res。 2020年1月23日； 131：109940。 doi：10.1016/j.jpsychores.2020.109940。 [EPUB在印刷前]审查。
• Bottiroli S，Galli F，Viana M，Sances G，Tassorelli C.慢性偏头痛的创伤经历，压力事件和急诊症，药物过度使用。前心理。 2018年5月14日； 9：704。 doi：10.3389/fpsyg.2018.00704。 2018年环保。
• De Icco R，Fiamingo G，Greco R，Bottiroli S，Demartini C，Zanaboni AM，Allena M，Guaschino E，Martinelli D，PutortìA，Grillo V，Sances G，Sances G，Tassorelli C. NeurophophelelliC。开放标签研究。头痛。 2020年10月; 40（12）：1336-1345。 doi：10.1177/0333102420942230。 EPUB 2020年7月26日。

纳入标准：

• 年龄18至65岁
• CM或CM+MO的病史至少在入学前12个月[10]
• 至少两种不同的预防疗法的药理学类别的失败

排除标准：

• 其他神经系统或神经精神疾病
• 其他慢性疼痛综合症
• 其他类型的主要或次要头痛
• 基线时使用多种预防药物
• 先前报道的对乳胶的不良反应
• 怀孕或泌乳

• 与基线相比，脊柱敏化[时间框架：T3（12周后）的RTH（MA）变化（T0）]
  通过伤害性戒断反射的单个刺激反射阈值（RTH）测量。
• 与基线相比，炎症生物标志物剖面[时间范围：T3（12周后）的miR-382-5p变化（12周）]
  通过miR-382-5p的血浆水平测量
• 与基线相比，炎症生物标志物剖面[时间范围：T3（12周后）的miR-34a-5p变化（12周）]
  通过miR-34a-5p的血浆水平测量
• 与基线相比，偏头痛的残疾评估（MIDAS）[时间范围：T3（12周后）的MIDAS得分（T0）的变化（T0）]
  通过MIDAS测试测量偏头痛相关的残疾：0-5（I级）：最小残疾，6-10（II级）：轻度残疾，11-20（III级）：中度残疾，21-40（IVA级） ：严重的残疾，41及更高（IVB级）：非常严重的残疾。
• 与基线相比，T3（12周后）的Headache撞击测试-6（HIT-6）[时间范围：在T3（12周后）的更改（T0）]
  通过HIT-6测试衡量的偏头痛相关残疾：49或更少：无影响，50-55：某些影响，56-59：实质性影响，60-78严重影响。
• 与基线相比，异常症状症状清单（ASC-12）[时间范围：T3（12周后）的ASC-12分数变化（T0）]
  通过ASC-12测试测量偏头痛相关的残疾：0-2：无； 3-5：温和； 6-8：中等； 9或更多：严重。
• 与基线相比，特定于偏头痛的生活质量问卷（MSQ）[时间范围：T3（12周后）的MSQ2分数（12周）]
  MSQ衡量的生活质量。 14项评估，每个项目都按6分制（从“无时间”到“所有时间”）进行了6分级评估。我们评估了3个分数，即角色函数限制性（RR），角色函数预防（RP）和情绪功能（EF）。原始分数已转换为100分制，较高的分数表明生活质量更高。
• 与基线相比，短表健康调查（SF-36）[时间范围：T3（12周后）的SF-36分数变化（T0）]
  SF-36衡量的生活质量。 36个项目评估为我们提供了有关8个不同领域的信息：身体功能（10个项目），角色 - 物理（4个项目），身体疼痛（2个项目）和一般健康（5个项目）。心理健康措施由活力（4个项目），社会功能（2个项目），角色情感（3个项目）和心理健康（5个项目）组成
• 与基线相比，医院的焦虑和抑郁量表（HADS）[时间范围：T3（12周后）的HADS评分变化（T0）]
  由HADS衡量的心理状态。 14个项目的问卷调查表（0-3）李克特量表评估焦虑和抑郁症状。在两个不同领域中的分数为8或更高被认为对焦虑和/或抑郁症很重要。
• 利兹依赖问卷（LDQ）[时间范围：与基线相比（T0）在T3（12周后）的LDQ评分变化（T0）]
  LDQ测量的心理状态。它是一种自我完成的10个项目仪器，用于测量对各种物质的依赖。没有建立依赖性的截止分数
• 与基线相比，多伦多的急症量表（TAS-20）[时间范围：T3（12周后）的TAS-20分数变化（12周）]
  TAS-20测量的心理状态。它是5分（1-5）的20项问卷。李克特量表评估alexthymia特征，即，个人难以用文字表达自己的感受。对于静脉肌症的存在，评分为61或更高是显着的。
• 阳性临床结果的患者百分比[时间范围：T3时30％响应者患者的百分比（T0后12周）]
  通过减少偏头痛的患者百分比至少30％（30％响应者）来衡量。
• 临床结果阳性的患者百分比[时间范围：T3时50％响应者患者的百分比（T0后12周）]
  通过减少偏头痛的患者百分比（至少为50％）（50％响应者）来衡量。

靶向降钙素基因相关肽（CGRP）的单克隆抗体（MABS）被证明在预防性治疗情节性和慢性偏头痛以及难以治疗的患者中有效过度使用（mo）。

慢性偏头痛（CM）中的特征功能障碍是敏化的，是在三角血管系统中发生的，但随后扩散到中枢神经系统，在中枢神经系统中，它在多个区域的神经元兴奋性增加。 CM患者的一些神经生理研究表明，大脑和脊柱水平的中枢敏化发生。

microRNA（miRNA）参与了慢性疼痛的产生和维持。当前的证据表明，特定的miRNA也可能在偏头痛中发挥作用，从而代表了疾病的可能生物标志物。先前的一项研究报告了miR-34a-5p和miR-382-5p的上调，该上调分别涉及在偏头痛攻击过程中的调节GABA能信号传导和IL-10基因表达。

这种开放标签的目的是，假设生成研究的目的是评估ernumab治疗对以前至少失败至少2种预防治疗的CM患者的神经生理学，生物分子和心理方面的影响。

这项研究包括与IRCCS Mondino基金会头痛科学中心的神经科医生进行的首次筛查，在此期间进行了全面的神经系统和一般检查，并收集了所有参加Mondino Foundation的常规头痛日记的数据检查以确认包含/排除标准。

如果患者符合标准，则他/她将在一个月的基线观察期内入学一个月。在基线观察期结束时（T0），如果仍然满足纳入/排除标准，患者完成了以下程序：记录临床和人口统计学特征，生命体征评估，神经生理评估，基于DSM（诊断和诊断和诊断）（精神障碍的统计手册），静脉抽血以及有关心理状态，健康状况和生活质量的一组自我管理问卷的汇编。

在T0时，皮下处理了70毫克的Erenumab的第一剂治疗患者。

28天（4个整周）后，患者返回第二次访问（T1），以报告临床变量和不良事件。在T1期间，给予第二次注射Erenumab 70 mg，而在额外的28天间隔（T2）后，患者本身将三分之一也是最后一个剂量的Erenumab 70 mg自我管理。然后，该研究的最后一次访问（T3）计划从T1开始56天，那是最后一剂Erenumab的28天。在T3上，对患者进行了与T0进行的相同多学科评估的测试：记录临床和人口统计学特征，生命体征评估，神经生理学评估，静脉血液采样以及有关患者有关心理状态的健康状况，健康状况和质量的问卷的汇编，生活。

伤害性戒断反射测量。伤害性戒断反射（NWR）被认为是研究脊柱伤害性传播的客观和坚实的神经生理技术。该反射是根据一个经过良好验证的程序记录在下肢的，在09:00 AM至11:00 AM之间的专业技术人员的安静环境中。患者处于舒适的位置，脚踝在90°弯曲，膝盖在130°时弯曲。用一对AG/AGCL表面电极在外侧癌症后面进行电刺激。电刺激由5个连续的平方脉冲（1 ms，200 Hz）制成，每60-120秒随机传递一次。肌电图（Synergy，Medelec，英国）是从带有一对AG/AGCL表面电极的股二头肌乳头上的Capitis brevis记录的。用于所有阈值评估，使用楼梯方法，每步的强度增加了0.3 mA。记录参数为：分析时间300毫秒，灵敏度20 mV和滤波器带路3至3000 Hz。

研究人员首先评估了NWR（RTH）的单个刺激反射阈值，该阈值定义为最低强度（MA），能够诱导3个连续的3个稳定肌肉反应至少20 mV和10 ms。他们还评估了平均AUC（曲线下的面积-MV X MS），平均潜伏期（MS）和主观疼痛感知，以0-10点视觉模拟量表（VAS-RTH）为0-10点。

然后，研究人员通过以2 Hz的频率进行5个电刺激的火车评估了时间求和阈值（TST）。 TST被定义为最低强度（MA）能够在第四和第五肌电图中连续3次连续3次稳定的肌肉反应。他们还评估了第一个（VAS-TST-1）和TST上的第五（VAS-TST-1）和第五（VAS-TST-5）刺激的主观疼痛感知。

microRNAS表达。通过实时逆转录（RT）PCR在外周血单核细胞（PBMC）中评估microRNA表达。

PBMC分离：在含有参与者的管的乙二胺四乙酸中收集血液样本（10 mL）。用磷酸盐缓冲液（PBS）（Sigma）以1：1的比率稀释血液样本。将稀释的血液样品缓慢加载到ficoll分离溶液（10 mL）（Sigma）中，并在室温下以800 g离心30分钟。将积聚为中白色单层的PBMC在无菌PBS中以300 g洗涤两次，持续15分钟。洗涤后，将PBMC固定并存储在-80°C下，直至使用。

MicroRNA基因表达：使用Direct-Zol RNA Mini Prep Plus（Zymo Research）进行RNA从PBMC中分离。通过使用纳米体分光光度计（Nanodrop™Thermo Fisher Scientific，Euroclone Milano）在230和280 nm处的吸光度确定RNA浓度。使用Mirxmirna第一线合成（Takara-Diatech，Jesi-An Italy）和TB Green Q-RT PCR（Takara-Diatech，Jesi-An Italy）来确定miRNA-34A-34A-5P的表达水平，从而进行cDNA的合成。和miRNA-382-5p。在95°C下进行变性，并通过两步循环（95-60°C）对40个循环进行扩增，并使用光循环480仪器480仪器RT-PCR检测系统（Roche，Roche，Roche，Milan，意大利）。用U6（一种小核RNA）将靶基因表达水平归一化，用作管家基因。根据2- ∆CT = 2-（CT基因-CT管家基因）公式通过使用CT值计算基因表达水平。

残疾和心理评估。

电池包括：

4）与偏头痛有关的残疾和相关特征：

• 偏头痛的残疾评估（MIDAS）测试：0-5（I级）：最小残疾，6-10（II级）：轻度残疾，11-20（III级）：中度残疾，21-40（IVA级）：严重的残疾，41及更高（IVB级）：非常严重的残疾；
• 头痛影响测试-6（HIT-6）：49或更少：无影响，50-55：有些影响，56-59：实质性影响，60-78严重影响；
• 对偏头痛疼痛平均强度评估的伤害性评分量表：0无疼痛-10非常严重；

• 异常性症状清单（ASC-12）：0-3：轻度皮肤异常性痛，6-8：中度皮肤异常性异常性疾病，9及更高：严重的皮肤异常性异常性异常。

  5）生活质量：

• 特定于偏头痛的生活质量问卷（MSQ）：14项评估，每个项目的评分为6分（从“无时间”到“所有时间”）。然后将原始分数转换为100分制，较高的分数表明生活质量更高。
• 简短表格健康调查（SF-36）：11项评估，指的是两个主要子域，即心理成分摘要（MCS）和物理成分摘要（PCS）；

• 健康0-100：在确切评估时刻，要求患者在0-100的量表范围内得分为0-100。

  6）心理状态：

• 医院焦虑和抑郁量表（HADS）：一份14项问卷，以4分（0-3）的李克特量表评估焦虑和抑郁症状。在两个不同领域中的分数为8或更高被认为对焦虑和/或抑郁症很重要。
• 利兹依赖问卷（LDQ）：0-3级的10个项目仪器，以测量对各种物质的依赖性。尚未建立依赖性的截止分数；
• 多伦多亚历症亚米亚量表（TAS-20）：一份针对5分（1-5）李克特量表的20项问卷，评估了alexthymia特征，即，个人难以用文字表达自己的感觉。对于急诊素的存在，评分为61或更高是显着的。
• 童年创伤问卷：包括13个指代不同类型的儿童创伤的项目，这些创伤被认为是创伤经历总数的；
• 压力性的生活事件问卷：由58个压力大的生活事件（例如，搬家，离婚，新工作，解雇等）组成。要求患者在过去10年中勾选出那些发生的事件。

• Charles A，Pozo-Rosich P.靶向降钙素基因相关肽：偏头痛治疗的新时代。柳叶刀。 2019年11月9日； 394（10210）：1765-1774。 doi：10.1016/s0140-6736（19）32504-8。 EPUB 2019年10月23日。
• Ashina M，Tepper S，Brandes JL，Reuter U，Boudreau G，Dolezil D，Cheng S，Zhang F，Lenz R，Klatt J，Mikol DD。 Erenumab（AMG334）在慢性偏头痛患者中的疗效和安全性先前的预防治疗失败：对随机，双盲，安慰剂对照研究的亚组分析。头痛。 2018年9月； 38（10）：1611-1621。 doi：10.1177/0333102418788347。 Epub 2018 7月8日。
• Tepper SJ，Diener HC，Ashina M，Brandes JL，Friedman DI，Reuter U，Cheng S，Nilsen J，Leonardi DK，Lenz RA，Mikol DD。慢性偏头痛中的Erenumab用药物过度使用：一项随机试验的亚组分析。神经病学。 2019年5月14日； 92（20）：E2309-E2320。 doi：10.1212/wnl.00000000007497。 EPUB 2019年4月17日。
• Coppola G，Di Lorenzo C，Schoenen J，Pierelli F.初级头痛的习惯和敏化。 J头痛疼痛。 2013年7月30日； 14：65。 doi：10.1186/1129-2377-14-65。审查。
• De Icco R，Perrotta A，Grillo V，Cosentino G，Sances G，Sandrini G，TassorelliC。实验诱导的脊柱伤害感受敏化的敏感性随偏头痛频率而增加：一项单盲对照研究。疼痛。 2020年2月; 161（2）：429-438。 doi：10.1097/j.pain.0000000000001726。
• Andersen HH，Duroux M，Gazerani P.在攻击和无痛时期内偏头痛的血清microRNA签名。摩尔神经生物醇。 2016年4月； 53（3）：1494-1500。 doi：10.1007/s12035-015-9106-5。 Epub 2015年2月1日。
• 国际头痛协会（IHS）的头痛分类委员会国际头痛障碍分类，第三版。头痛。 2018年1月； 38（1）：1-211。 doi：10.1177/0333102417738202。
• Demartini C，Greco R，Zanaboni AM，Sances G，De Icco R，Borsook D，Tassorelli C.硝酸甘油作为偏头痛疼痛的比较实验模型：从动物到人类和背部。 prog神经寄生醇。 2019年6月； 177：15-32。 doi：10.1016/j.pneurobio.2019.02.002。 EPUB 2019 2月13日。评论。
• Sandrini G，Serrao M，Rossi P，Romaniello A，Cruccu G，Willer JC。人类的下肢屈曲反射。 prog神经寄生醇。 2005年12月； 77（6）：353-95。 Epub 2005年12月28日。
• Schmittgen TD，Livak KJ。通过比较C（T）方法分析实时PCR数据。 NAT PROTOC。 2008; 3（6）：1101-8。
• Stewart WF，Lipton RB，Dowson AJ，SawyerJ。偏头痛残疾评估（MIDAS）问卷的开发和测试，以评估与头痛相关的残疾。神经病学。 2001; 56（6补充1）：S20-8。审查。
• Kosinski M，Bayliss MS，Bjorner JB，Ware JE JR，Garber WH，Batenhorst A，Cady R，DahlöfCG，Dowson A，TepperS。一项六个项目的短期调查，用于测量头痛影响：HIT-6。 Qual Life Res。 2003年12月; 12（8）：963-74。
• Lipton RB，Bigal ME，Ashina S，Burstein R，Silberstein S，Reed ML，Serrano D，Stewart WF；美国偏头痛预防咨询小组。偏头痛人群的皮肤异常性疾病。 Ann Neurol。 2008年2月； 63（2）：148-58。
• Jhingran P，Osterhaus JT，Miller DW，Lee JT，Kirchdoerfer L.开发和验证偏头痛特定的生活质量问卷。头痛。 1998年4月； 38（4）：295-302。
• Apolone G，MosconiP。意大利SF-36健康调查：翻译，验证和规范。 J Clin Epidemiol。 1998年11月； 51（11）：1025-36。
• Scalone L，Cortesi PA，Mantovani LG，Ciampichini R，Cesana G.来自意大利一般人群的参考EQ-5D-3L和EQ-5D-5L数据。价值健康。 2014年11月； 17（7）：A514-5。 doi：10.1016/j.jval.2014.08.1591。 EPUB 2014年10月26日。
• Bjelland I，Dahl AA，Haug TT，NeckelmannD。医院焦虑和抑郁量表的有效性。更新的文献综述。 J Psychosom Res。 2002年2月； 52（2）：69-77。审查。
• Raistrick D，Bradshaw J，Tober G，Weiner J，Allison J，Healey C. Leeds依赖问卷（LDQ）的开发：在治疗评估包中测量酒精和鸦片依赖性的问卷。瘾。 1994年5月； 89（5）：563-72。
• Bagby RM，Parker JDA，Taylor GJ。 25年的20个项目多伦多alexthymia量表。 J Psychosom Res。 2020年1月23日； 131：109940。 doi：10.1016/j.jpsychores.2020.109940。 [EPUB在印刷前]审查。
• Bottiroli S，Galli F，Viana M，Sances G，Tassorelli C.慢性偏头痛的创伤经历，压力事件和急诊症，药物过度使用。前心理。 2018年5月14日； 9：704。 doi：10.3389/fpsyg.2018.00704。 2018年环保。
• De Icco R，Fiamingo G，Greco R，Bottiroli S，Demartini C，Zanaboni AM，Allena M，Guaschino E，Martinelli D，PutortìA，Grillo V，Sances G，Sances G，Tassorelli C. NeurophophelelliC。开放标签研究。头痛。 2020年10月; 40（12）：1336-1345。 doi：10.1177/0333102420942230。 EPUB 2020年7月26日。

纳入标准：

• 年龄18至65岁
• CM或CM+MO的病史至少在入学前12个月[10]
• 至少两种不同的预防疗法的药理学类别的失败

排除标准：

• 其他神经系统或神经精神疾病
• 其他慢性疼痛综合症
• 其他类型的主要或次要头痛
• 基线时使用多种预防药物
• 先前报道的对乳胶的不良反应
• 怀孕或泌乳