• CB1（内源性大麻素受体）蛋白表达[时间范围：在入学时]
  周围血液单核细胞中的CB1蛋白表达（PBMC）
• CB2（内源性大麻素受体）蛋白表达[时间范围：在入学时]
  周围血液单核细胞（PBMC）中的CB2蛋白表达
• CB受体的基因表达[时间范围：入学时]
  外周血单核细胞中内源性大麻素受体的基因表达（PBMC）
• 脂肪酸酰胺水解酶（FAAH）的基因表达[时间范围：在入学时]
  FAAH在外周血单核细胞（PBMC）中的基因表达
• N-酰磷脂酰乙醇胺 - 磷脂酶D（NAPE-PLD）的基因表达[时间范围：在入学时]
  NAPE-PLD在外周血单核细胞（PBMC）中的基因表达
• 二酰基甘油脂肪酶（DAGL）的基因表达[时间范围：在入学时]
  DAGL在外周血单核细胞（PBMC）中的基因表达
• 单酰基甘油脂肪酶（MAGL）的基因表达。 [时间范围：入学时]
  MAGL在外周血单核细胞（PBMC）中的基因表达
• 内源性大麻素系统（ES）组件的DNA甲基化[时间范围：在入学时]
  ES基因转录调节中的DNA甲基化

临床前和临床证据表明，内源性大麻素系统（ES）在偏头痛疼痛中的失调，尤其是在患有慢性偏头痛的受试者中。

在外周血单核细胞（PBMC）中测定了ES成分的基因表达，该细胞（PBMC）患有偏头痛（EM），慢性偏头痛，药物过度使用（CM-MO）和年龄匹配的健康对照（CT）。评估了大麻素受体（CB）1和2的蛋白质表达，以及与ES成分相关的基因的DNA甲基化变化。

偏头痛是一种神经血管疾病，其病理生理学远非完全澄清。这主要是由于偏头痛发作及其复发的复杂机制。内源性大麻素系统（ES）是一种复杂的信号系统，涉及不同的生物学过程（例如神经元活动，疼痛感和免疫功能），并且在维持身体稳态中起着至关重要的作用。 ES成分包括内源性脂质，研究最多的脂质是N-芳基烯丙基甲醇酰胺（AEA）和2-芳基二烯丙基甘油（2-AG），它们的代谢酶以及至少两个大麻素受体（CB1和CB2）。 AEA的生物合成主要是由N-酰磷脂酰乙醇胺 - 磷脂酶D（NAPE-PLD）发生的，而2AG是通过二酰基甘油脂肪酶（DAGL）的作用产生的。 AEA由脂肪酸酰胺水解酶（FAAH）代谢，主要由单酰基甘油脂肪酶（MAGL）代谢。

在生理和病理条件下，ES成分基因表达的改变可能涉及各种细胞类型，多种分解代谢途径以及通过表观遗传机制产生活性代谢物。例如，CB基因可能与不同的转录因子相互作用，其中许多因素与DNA甲基化和翻译后修饰有关。功能失调的ES与包括偏头痛在内的多种疾病有关。实际上，ES调节多种活性和神经调节剂/神经递质在偏头痛发病机理中起着至关重要的作用。 ES还与来自脑干传入的三角血管伤害感染的降降调节有关。先前来自综合自主神经系统神经生理学实验室，Headache Science Center，IRCCS Mondino Foundation，Pavia（意大利），使用基于大鼠硝酸甘油给药的偏头痛特异性动物模型。特别是，研究人员在三叉神经伤害性信号的处理中表现出AEA和FAAH调节的AEA活性的关键作用。 AEA抑制神经源性硬膜血管舒张，以及降钙素基因相关的肽诱导的和一氧化氮诱导的硬膜血管扩张，这种活性被CB1拮抗作用逆转。 ES和偏头痛疼痛之间的相互作用也通过临床观察表明。 FAAH活性在偏头痛（EM）的女性血小板中较高，以表明AEA的明显降解。患有慢性偏头痛（CM）和药物过度使用（MO）的受试者显示出内源性大麻素的代谢不仅改变了血小板，而且在CSF中也改变了。尽管上述临床发现是分散和复制的，但根据越来越多的临床前证据的最新数据，它们的重新审查促使人们需要更深入地研究ES在偏头痛病理生理学中的作用。

几项研究表明，外周血单核细胞（PBMC）中检测到的ES成分的变化是不同神经系统疾病中ES中心功能障碍的可靠指标。例如，在患有帕金森氏病或多发性硬化症' target='_blank'>多发性硬化症的患者中，CSF的AEA水平与PBMC中FAAH的活性和蛋白质含量的降低有关，这表明AEA张力升高。 CSF和精神分裂症患者的血液中的AEA水平升高，在临床缓解后，PBMC中CB2和FAAH的mRNA血液水平显着下降。

这项研究的目的是鉴定偏头痛受试者中ES活性的特定功能模式。为此，研究人员对ES（基因表达，蛋白质表达和DNA甲基化）的多种外围成分进行了彻底评估，该PBMC的具有EM，没有AURA，CM-MO和健康对照的EM的代表性样本（CT）。

帕维亚（意大利）的IRCCS Mondino基金会的头痛中心招募了25名具有EM的受试者，CM-MO和24 CT的受试者。该研究得到当地伦理委员会的批准，所有受试者均签署了书面知情同意。

在含有参与者的试管的乙二胺四乙酸（EDTA）中收集血液样本（20ml）。用磷酸盐缓冲液1x（PBS 1X）（Sigma）以1：1的比率稀释血液样本。将稀释的血液样品缓慢加载到ficoll分离溶液（15毫升）（Sigma）上，并在800 g下离心在室温下30分钟。在无菌PBS 1X中将积聚为中白色单层的PBMC洗涤两次，并以300 g离心15分钟。对于每个样品，将一批PBMC用于RNA或DNA提取，另一个用于流程仪分析。

在从研究小组中分离出的受试者的PBMC中，研究人员分析了：

• CB1和CB2蛋白表达；
• 以下基因的表达：CB受体，FAAH，NAPE-PLD，MAGL和DAGL
• ES成分的DNA甲基化。为了确定PBMC中CB1和CB2蛋白表达的相对水平，研究人员使用FACS CANTO流动仪（Becton-Dickenson）使用了流动性仪。分离后，使用针对CD45（BD Biosciences，1：50），CB1（R＆D System，1:50）和CB2受体（Cayman Chemical，1:30）的抗体（CB1，1：30）对细胞（每反应100000）进行染色；在Windows门控中，总共计数10000个事件，以与CB1和CB2染色的交点。

使用标准程序（Zymo研究）分离PBMC的总RNA，并使用纳米球分光光度计（Nanodrop™Thermo Fisher Scientific）评估RNA质量；按照供应商的说明，使用iScript cDNA合成试剂盒（Biorad）生成cDNA。使用快速EVA绿色SuperMix（Bio-Rad）分析了CB受体，FAAH，NAPE-PLD，MAGL和DAGL的基因表达。泛素（UBC）的表达在所有实验组中保持恒定，被用作管家基因。按照供应商的说明，使用轻循环器480仪器RT-PCR检测系统（Roche）进行扩增。一式三份分析所有样品，并根据2- ∆CT = 2-（CT基因-CT管家基因）公式计算基因表达水平。

由于PBMC含有在大多数组织（包括神经元和周围成核细胞）中发现的表观遗传酶的完整补体，因此研究者评估了DNA甲基化在所有参与受试者中ES基因转录中的作用。

使用Qiamp DNA血液迷你试剂盒（QIAGEN）从全血中提取DNA，并通过纳米体定量（纳米体技术，热燃料）确定其浓度。阵列制备和数据分析是由Genomix4life SRL（意大利男爵夫）进行的。使用EZ DNA甲基化试剂盒（Zymo Research，Irvine，CA，USA）转化了高质量的DNA（500 ng）。使用人甲基化450 K Beadchip（Illumina，San Diego，CA，USA），使用Bisulfite转化的DNA（200Ng）进行全基因组甲基化分析，其中包含485 577探针，涵盖21 231（99％）RefSeq基因。简而言之，甲硫酸氢盐转化后的DNA被全基因组扩增20小时，然后进行终点片段化。在48°C下沉淀，变性并杂交20小时。洗涤珠芯片，并使用Illumina Iscan系统扫描珠芯片，然后将杂交底漆延长并标记。 Genomestudio软件（2011.1; Illumina Inc.）用于从扫描阵列中提取DNA甲基化信号。每个胞嘧啶的甲基化水平表示为β值计算为甲基化的探针的甲基化版本的荧光强度比：β值介于0（未甲基化）和1（甲基化）之间。与CGIS有关的注释使用以下分类：“ Shore”，CGI两侧的2-KB序列中的每个序列； “架子”，每个2-kb序列都在岸边； “开海”，前一个序列或CGIS 4中不包含的DNA。TSS200和TSS1500分别表示位置分别来自TSS位置-200 bp和-1500 bp之间的区域。两个给定基因座之间的显着甲基化差异由Delta-beta值表示，并使用Illumina自定义算法来计算DIFFSCORES（diffscore⩽30.0（≈PVAL<0.001）=低甲基化； p val <0.001）=超甲基化）。

• Basavarajappa BS，Nixon RA，Arancio O.内源性大麻素系统：从神经发育到神经变性的新兴角色。 Mini Rev Med Chem。 2009年4月； 9（4）：448-62。审查。
• Greco R，Demartini C，Zanaboni AM，Piomelli D，Tassorelli C.内源性大麻素系统和偏头痛疼痛：更新。前神经科学。 2018年3月19日； 12：172。 doi：10.3389/fnins.2018.00172。 Ecollection2018。评论。
• Greco R，Demartini C，Zanaboni AM，Tumelero E，Reggiani A，Misto A，Piomelli D，Tassorelli C.Faah抑制作用作为偏头痛的预防治疗：一项临床前研究。 Neurobiol Dis。 2020年2月; 134：104624。 doi：10.1016/j.nbd.2019.104624。 Epub 2019年10月17日。
• La Porta C，Bura SA，Llorente-Onaindia J，Pastor A，Navarrete F，García-GutiérrezMS，De La Torre R，Manzanares J，Monfort J，Monfort J，MaldonadoR。内源性诺替素体系在情绪表现上表现出Osteoarthrthrthrththlisto pain的疼痛的作用。疼痛。 2015年10月； 156（10）：2001-2012。 doi：10.1097/j.pain.0000000000000260。
• Centonze D，Battistini L，MaccarroneM。周围淋巴细胞中的内源性大麻素系统作为神经炎症疾病的镜像。 Curr Pharm des。 2008; 14（23）：2370-42。审查。
• Sarchielli P，Pini LA，Coppola F，Rossi C，Baldi A，Mancini ML，Calabresi P.慢性偏头痛中的内源性大麻素：CSF的发现表明系统失败。神经心理药理学。 2007年6月； 32（6）：1384-90。 EPUB 2006年11月22日。神经心理药理学。 2007年6月； 32（6）：1432。
• Arosio B，Bulbarelli A，Bastias Candia S，Lonati E，Mastronardi L，Romualdi P，Candeletti S，Gussago C，Galimberti D，Scarpini E，Dell'osso B，Altamura C，Altamura C，MacCarrone M，MacCarrone M，Bergamaschini L，D'Udd'Udd'Addario C，C，C，C，C，D'Udd'Addario C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，D'Udd'Addario C， Mari D. PIN1对阿尔茨海默氏病的贡献：晚期发病的阿尔茨海默氏病患者的转录和表观遗传机制。神经退行器dis。 2012; 10（1-4）：207-11。 doi：10.1159/000333799。 Epub 2012年1月17日。
• van der Schueren BJ，Van Laere K，GérardN，Bormans G，De Hoon JN。雌性偏头痛患者中，1型大麻素受体结合增加。头痛。 2012年3月； 52（3）：433-40。 doi：10.1111/j.1526-4610.2011.02030.x。 Epub 2011 11月11日。
• Perrotta A，Arce-Leal N，Tassorelli C，Gasperi V，Sances G，Blandini F，Serrao M，Bolla M，Bolla M，Pierelli F，Pierelli F，Nappi G，Maccarrone M，Sandrini G.急性减少Anandamide-Hydrololase（Faah）活性。戒断治疗后，在药物弥补的头痛受试者中减少了伤害感受途径。头痛。 2012年10月； 52（9）：1350-61。 doi：10.1111/j.1526-4610.2012.02170.x。 Epub 2012年6月1日。
• Frieling H，Albrecht H，Jedtberg S，Gozner A，Lenz B，Wilhelm J，Hillemacher T，De Zwaan M，Kornhuber J，BleichS。高架大麻素1受体mRNA与饮食失调相关的行为和饮食饮食饮食的态度有关。心理肌内分泌学。 2009年5月； 34（4）：620-4。 doi：10.1016/j.psyneuen.2008.10.014。 Epub 2008 11月28日。
• Greco R，Bandiera T，Mangione AS，DeMartini C，Siani F，Nappi G，Sandrini G，Guijarro A，Armirotti A，Piomelli D，Tassorelli C.外围Faah封锁对NTG诱导的HyperAgesia-Evalgesia-Evaluation ur urbb937中的影响偏头痛的动物模型。头痛。 2015年10月； 35（12）：1065-76。 doi：10.1177/0333102414566862。 Epub 2015年1月21日。
• Greco R，Gasperi V，Sandrini G，Bagetta G，Nappi G，Maccarrone M，TassorelliC。偏头痛动物模型中内源性大麻素系统的改变：大鼠脑区域的评估。头痛。 2010年3月; 30（3）：296-302。 doi：10.1111/j.1468-2982.2009.01924.x。 Epub 2010 2月1日。

偏头痛（EM）受试者的纳入标准：

1. 根据国际头痛分类第三版（ICHD-3），对偏头痛的诊断标准满意；
2. 偏头痛的情节模式至少十年，没有任何编年期。

排除标准：

任何全身性疾病，精神疾病或任何其他临床意义的疾病。

慢性偏头痛患者的纳入标准过度使用药物（CM-MO）：

1. 慢性偏头痛的ICHD-3诊断标准以及药物过度使用的亚型之一的诊断标准；
2. 至少5年的稳定回流历史。

排除标准：

任何全身性疾病，精神疾病或任何其他临床意义的疾病。

健康对照的纳入标准（CT）：

1. 没有偏头痛或其他主要头痛的病史；
2. 不频繁的紧张型头痛情节。

排除标准：

1. 任何全身性疾病，精神疾病或任何其他临床意义的疾病；
2. 在抽血前的24小时内，任何类型的止痛药。

• CB1（内源性大麻素受体）蛋白表达[时间范围：在入学时]
  周围血液单核细胞中的CB1蛋白表达（PBMC）
• CB2（内源性大麻素受体）蛋白表达[时间范围：在入学时]
  周围血液单核细胞（PBMC）中的CB2蛋白表达
• CB受体的基因表达[时间范围：入学时]
  外周血单核细胞中内源性大麻素受体的基因表达（PBMC）
• 脂肪酸酰胺水解酶（FAAH）的基因表达[时间范围：在入学时]
  FAAH在外周血单核细胞（PBMC）中的基因表达
• N-酰磷脂酰乙醇胺 - 磷脂酶D（NAPE-PLD）的基因表达[时间范围：在入学时]
  NAPE-PLD在外周血单核细胞（PBMC）中的基因表达
• 二酰基甘油脂肪酶（DAGL）的基因表达[时间范围：在入学时]
  DAGL在外周血单核细胞（PBMC）中的基因表达
• 单酰基甘油脂肪酶（MAGL）的基因表达。 [时间范围：入学时]
  MAGL在外周血单核细胞（PBMC）中的基因表达
• 内源性大麻素系统（ES）组件的DNA甲基化[时间范围：在入学时]
  ES基因转录调节中的DNA甲基化

临床前和临床证据表明，内源性大麻素系统（ES）在偏头痛疼痛中的失调，尤其是在患有慢性偏头痛的受试者中。

在外周血单核细胞（PBMC）中测定了ES成分的基因表达，该细胞（PBMC）患有偏头痛（EM），慢性偏头痛，药物过度使用（CM-MO）和年龄匹配的健康对照（CT）。评估了大麻素受体（CB）1和2的蛋白质表达，以及与ES成分相关的基因的DNA甲基化变化。

偏头痛是一种神经血管疾病，其病理生理学远非完全澄清。这主要是由于偏头痛发作及其复发的复杂机制。内源性大麻素系统（ES）是一种复杂的信号系统，涉及不同的生物学过程（例如神经元活动，疼痛感和免疫功能），并且在维持身体稳态中起着至关重要的作用。 ES成分包括内源性脂质，研究最多的脂质是N-芳基烯丙基甲醇酰胺（AEA）和2-芳基二烯丙基甘油（2-AG），它们的代谢酶以及至少两个大麻素受体（CB1和CB2）。 AEA的生物合成主要是由N-酰磷脂酰乙醇胺 - 磷脂酶D（NAPE-PLD）发生的，而2AG是通过二酰基甘油脂肪酶（DAGL）的作用产生的。 AEA由脂肪酸酰胺水解酶（FAAH）代谢，主要由单酰基甘油脂肪酶（MAGL）代谢。

在生理和病理条件下，ES成分基因表达的改变可能涉及各种细胞类型，多种分解代谢途径以及通过表观遗传机制产生活性代谢物。例如，CB基因可能与不同的转录因子相互作用，其中许多因素与DNA甲基化和翻译后修饰有关。功能失调的ES与包括偏头痛在内的多种疾病有关。实际上，ES调节多种活性和神经调节剂/神经递质在偏头痛发病机理中起着至关重要的作用。 ES还与来自脑干传入的三角血管伤害感染的降降调节有关。先前来自综合自主神经系统神经生理学实验室，Headache Science Center，IRCCS Mondino Foundation，Pavia（意大利），使用基于大鼠硝酸甘油给药的偏头痛特异性动物模型。特别是，研究人员在三叉神经伤害性信号的处理中表现出AEA和FAAH调节的AEA活性的关键作用。 AEA抑制神经源性硬膜血管舒张，以及降钙素基因相关的肽诱导的和一氧化氮诱导的硬膜血管扩张，这种活性被CB1拮抗作用逆转。 ES和偏头痛疼痛之间的相互作用也通过临床观察表明。 FAAH活性在偏头痛（EM）的女性血小板中较高，以表明AEA的明显降解。患有慢性偏头痛（CM）和药物过度使用（MO）的受试者显示出内源性大麻素的代谢不仅改变了血小板，而且在CSF中也改变了。尽管上述临床发现是分散和复制的，但根据越来越多的临床前证据的最新数据，它们的重新审查促使人们需要更深入地研究ES在偏头痛病理生理学中的作用。

几项研究表明，外周血单核细胞（PBMC）中检测到的ES成分的变化是不同神经系统疾病中ES中心功能障碍的可靠指标。例如，在患有帕金森氏病或多发性硬化症' target='_blank'>多发性硬化症的患者中，CSF的AEA水平与PBMC中FAAH的活性和蛋白质含量的降低有关，这表明AEA张力升高。 CSF和精神分裂症患者的血液中的AEA水平升高，在临床缓解后，PBMC中CB2和FAAH的mRNA血液水平显着下降。

这项研究的目的是鉴定偏头痛受试者中ES活性的特定功能模式。为此，研究人员对ES（基因表达，蛋白质表达和DNA甲基化）的多种外围成分进行了彻底评估，该PBMC的具有EM，没有AURA，CM-MO和健康对照的EM的代表性样本（CT）。

帕维亚（意大利）的IRCCS Mondino基金会的头痛中心招募了25名具有EM的受试者，CM-MO和24 CT的受试者。该研究得到当地伦理委员会的批准，所有受试者均签署了书面知情同意。

在含有参与者的试管的乙二胺四乙酸（EDTA）中收集血液样本（20ml）。用磷酸盐缓冲液1x（PBS 1X）（Sigma）以1：1的比率稀释血液样本。将稀释的血液样品缓慢加载到ficoll分离溶液（15毫升）（Sigma）上，并在800 g下离心在室温下30分钟。在无菌PBS 1X中将积聚为中白色单层的PBMC洗涤两次，并以300 g离心15分钟。对于每个样品，将一批PBMC用于RNA或DNA提取，另一个用于流程仪分析。

在从研究小组中分离出的受试者的PBMC中，研究人员分析了：

• CB1和CB2蛋白表达；
• 以下基因的表达：CB受体，FAAH，NAPE-PLD，MAGL和DAGL
• ES成分的DNA甲基化。为了确定PBMC中CB1和CB2蛋白表达的相对水平，研究人员使用FACS CANTO流动仪（Becton-Dickenson）使用了流动性仪。分离后，使用针对CD45（BD Biosciences，1：50），CB1（R＆D System，1:50）和CB2受体（Cayman Chemical，1:30）的抗体（CB1，1：30）对细胞（每反应100000）进行染色；在Windows门控中，总共计数10000个事件，以与CB1和CB2染色的交点。

使用标准程序（Zymo研究）分离PBMC的总RNA，并使用纳米球分光光度计（Nanodrop™Thermo Fisher Scientific）评估RNA质量；按照供应商的说明，使用iScript cDNA合成试剂盒（Biorad）生成cDNA。使用快速EVA绿色SuperMix（Bio-Rad）分析了CB受体，FAAH，NAPE-PLD，MAGL和DAGL的基因表达。泛素（UBC）的表达在所有实验组中保持恒定，被用作管家基因。按照供应商的说明，使用轻循环器480仪器RT-PCR检测系统（Roche）进行扩增。一式三份分析所有样品，并根据2- ∆CT = 2-（CT基因-CT管家基因）公式计算基因表达水平。

由于PBMC含有在大多数组织（包括神经元和周围成核细胞）中发现的表观遗传酶的完整补体，因此研究者评估了DNA甲基化在所有参与受试者中ES基因转录中的作用。

使用Qiamp DNA血液迷你试剂盒（QIAGEN）从全血中提取DNA，并通过纳米体定量（纳米体技术，热燃料）确定其浓度。阵列制备和数据分析是由Genomix4life SRL（意大利男爵夫）进行的。使用EZ DNA甲基化试剂盒（Zymo Research，Irvine，CA，USA）转化了高质量的DNA（500 ng）。使用人甲基化450 K Beadchip（Illumina，San Diego，CA，USA），使用Bisulfite转化的DNA（200Ng）进行全基因组甲基化分析，其中包含485 577探针，涵盖21 231（99％）RefSeq基因。简而言之，甲硫酸氢盐转化后的DNA被全基因组扩增20小时，然后进行终点片段化。在48°C下沉淀，变性并杂交20小时。洗涤珠芯片，并使用Illumina Iscan系统扫描珠芯片，然后将杂交底漆延长并标记。 Genomestudio软件（2011.1; Illumina Inc.）用于从扫描阵列中提取DNA甲基化信号。每个胞嘧啶的甲基化水平表示为β值计算为甲基化的探针的甲基化版本的荧光强度比：β值介于0（未甲基化）和1（甲基化）之间。与CGIS有关的注释使用以下分类：“ Shore”，CGI两侧的2-KB序列中的每个序列； “架子”，每个2-kb序列都在岸边； “开海”，前一个序列或CGIS 4中不包含的DNA。TSS200和TSS1500分别表示位置分别来自TSS位置-200 bp和-1500 bp之间的区域。两个给定基因座之间的显着甲基化差异由Delta-beta值表示，并使用Illumina自定义算法来计算DIFFSCORES（diffscore⩽30.0（≈PVAL<0.001）=低甲基化； p val <0.001）=超甲基化）。

• Basavarajappa BS，Nixon RA，Arancio O.内源性大麻素系统：从神经发育到神经变性的新兴角色。 Mini Rev Med Chem。 2009年4月； 9（4）：448-62。审查。
• Greco R，Demartini C，Zanaboni AM，Piomelli D，Tassorelli C.内源性大麻素系统和偏头痛疼痛：更新。前神经科学。 2018年3月19日； 12：172。 doi：10.3389/fnins.2018.00172。 Ecollection2018。评论。
• Greco R，Demartini C，Zanaboni AM，Tumelero E，Reggiani A，Misto A，Piomelli D，Tassorelli C.Faah抑制作用作为偏头痛的预防治疗：一项临床前研究。 Neurobiol Dis。 2020年2月; 134：104624。 doi：10.1016/j.nbd.2019.104624。 Epub 2019年10月17日。
• La Porta C，Bura SA，Llorente-Onaindia J，Pastor A，Navarrete F，García-GutiérrezMS，De La Torre R，Manzanares J，Monfort J，Monfort J，MaldonadoR。内源性诺替素体系在情绪表现上表现出Osteoarthrthrthrththlisto pain的疼痛的作用。疼痛。 2015年10月； 156（10）：2001-2012。 doi：10.1097/j.pain.0000000000000260。
• Centonze D，Battistini L，MaccarroneM。周围淋巴细胞中的内源性大麻素系统作为神经炎症疾病的镜像。 Curr Pharm des。 2008; 14（23）：2370-42。审查。
• Sarchielli P，Pini LA，Coppola F，Rossi C，Baldi A，Mancini ML，Calabresi P.慢性偏头痛中的内源性大麻素：CSF的发现表明系统失败。神经心理药理学。 2007年6月； 32（6）：1384-90。 EPUB 2006年11月22日。神经心理药理学。 2007年6月； 32（6）：1432。
• Arosio B，Bulbarelli A，Bastias Candia S，Lonati E，Mastronardi L，Romualdi P，Candeletti S，Gussago C，Galimberti D，Scarpini E，Dell'osso B，Altamura C，Altamura C，MacCarrone M，MacCarrone M，Bergamaschini L，D'Udd'Udd'Addario C，C，C，C，C，D'Udd'Addario C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，C，D'Udd'Addario C， Mari D. PIN1对阿尔茨海默氏病的贡献：晚期发病的阿尔茨海默氏病患者的转录和表观遗传机制。神经退行器dis。 2012; 10（1-4）：207-11。 doi：10.1159/000333799。 Epub 2012年1月17日。
• van der Schueren BJ，Van Laere K，GérardN，Bormans G，De Hoon JN。雌性偏头痛患者中，1型大麻素受体结合增加。头痛。 2012年3月； 52（3）：433-40。 doi：10.1111/j.1526-4610.2011.02030.x。 Epub 2011 11月11日。
• Perrotta A，Arce-Leal N，Tassorelli C，Gasperi V，Sances G，Blandini F，Serrao M，Bolla M，Bolla M，Pierelli F，Pierelli F，Nappi G，Maccarrone M，Sandrini G.急性减少Anandamide-Hydrololase（Faah）活性。戒断治疗后，在药物弥补的头痛受试者中减少了伤害感受途径。头痛。 2012年10月； 52（9）：1350-61。 doi：10.1111/j.1526-4610.2012.02170.x。 Epub 2012年6月1日。
• Frieling H，Albrecht H，Jedtberg S，Gozner A，Lenz B，Wilhelm J，Hillemacher T，De Zwaan M，Kornhuber J，BleichS。高架大麻素1受体mRNA与饮食失调相关的行为和饮食饮食饮食的态度有关。心理肌内分泌学。 2009年5月； 34（4）：620-4。 doi：10.1016/j.psyneuen.2008.10.014。 Epub 2008 11月28日。
• Greco R，Bandiera T，Mangione AS，DeMartini C，Siani F，Nappi G，Sandrini G，Guijarro A，Armirotti A，Piomelli D，Tassorelli C.外围Faah封锁对NTG诱导的HyperAgesia-Evalgesia-Evaluation ur urbb937中的影响偏头痛的动物模型。头痛。 2015年10月； 35（12）：1065-76。 doi：10.1177/0333102414566862。 Epub 2015年1月21日。
• Greco R，Gasperi V，Sandrini G，Bagetta G，Nappi G，Maccarrone M，TassorelliC。偏头痛动物模型中内源性大麻素系统的改变：大鼠脑区域的评估。头痛。 2010年3月; 30（3）：296-302。 doi：10.1111/j.1468-2982.2009.01924.x。 Epub 2010 2月1日。

偏头痛（EM）受试者的纳入标准：

1. 根据国际头痛分类第三版（ICHD-3），对偏头痛的诊断标准满意；
2. 偏头痛的情节模式至少十年，没有任何编年期。

排除标准：

任何全身性疾病，精神疾病或任何其他临床意义的疾病。

慢性偏头痛患者的纳入标准过度使用药物（CM-MO）：

1. 慢性偏头痛的ICHD-3诊断标准以及药物过度使用的亚型之一的诊断标准；
2. 至少5年的稳定回流历史。

排除标准：

任何全身性疾病，精神疾病或任何其他临床意义的疾病。

健康对照的纳入标准（CT）：

1. 没有偏头痛或其他主要头痛的病史；
2. 不频繁的紧张型头痛情节。

排除标准：

1. 任何全身性疾病，精神疾病或任何其他临床意义的疾病；
2. 在抽血前的24小时内，任何类型的止痛药。