研究设计和人口

患者和方法2.1。招募患者选择200名血液透析患者。功能便秘将根据罗马四世标准诊断。在所有患者中，腹腔和骨盆底的有机病变都被内窥镜检查（乙状结肠镜检查，结肠镜检查，胃镜镜检查），放射学和超声评估所排除。

这项研究将根据2008年修订的赫尔辛基宣言进行。所有患者均应给予书面知情同意参加该研究。 Taichung Metroharbour医院的肾脏肾脏分裂的所有患者均被前瞻性地纳入其中。纳入标准是

1. 血液透析超过3个月
2. 年龄超过20岁

排除标准是慢性炎性疾病，当前感染，胶原蛋白血管疾病或免疫调节或免疫抑制治疗的病史。

测量炎性细胞因子，Etotaxin-1和淀粉样蛋白A

根据制造商的指示，分别通过市售人类ELISA试剂盒测试了MCP-1，IL-6，CRP，IL-17A和钙粘蛋白的血浆水平。根据制造商的协议，使用商业ELISA试剂盒（R＆D Systems，Minneapolis，MN，美国明尼阿波利斯）确定人血清eotaxin1水平。市售的ELISA程序用于测量血清中的血清淀粉样蛋白浓度，

内毒素和内毒素Ig M以及IgG核心抗体

内毒素是通过Lonza（目录＃50-647U）（EU/ML）的Limulus amebocyte裂解物QCL-1000在血清中测量的。用LAL试剂水以1∶5的比例稀释血清或血浆样品。使用Cell Sciences Inc（目录＃HK504）中的ELISA试剂盒在血浆中测量内毒素IgG核心抗体。单位表示为GMU/ML，是基于制造商的1000名健康成年人的中位数的IgG标准单元。

CD14和CD16单核表型的测定

外周血将通过静脉穿刺收集，使用乙二醇氨基乙酸（EDTA）作为抗凝剂。为了进行细胞测量分析，对CD14的单克隆抗体（荧光素异硫氰酸酯（FITC）共轭；克隆RMO52； Beckman Coulter，Miami，FL，USA），CD16（PhycoeryThrin（PE）（PE）使用CD45（phycoerythrin Cyanin-5（PC5）；克隆J33；贝克曼·库尔特（Beckman Coulter），迈阿密，佛罗里达州，美国）和CD56（克隆IM2073；贝克曼·库尔特（Beckman Coulter），迈阿密，佛罗里达州）。简而言之，用上述单克隆抗体和相应的同种型对照对整个血液的100 L染色。根据制造商的建议，在室温下在室温下孵育15分钟后，将Optilyse C（贝克曼·库尔特，迈阿密，佛罗里达州）添加到Lyse RBC中，并固定样品。固定细胞在6小时内通过流式细胞仪分析。

使用FC500-CYTOMETOM（BECKMAN COULTER）进行白细胞和单核细胞子集分布的测定，并使用CXP分析软件（2.2版）（Schroers等，2005）。单核细胞被鉴定为CD45阳性和CD56阴性细胞，表现出特定的前向散射谱。然后将单核细胞在SSC/CD点图中门控，将单核细胞鉴定为具有单核细胞散射特性的CD86细胞。根据脂多糖受体CD14和CD16（FCGAMMA受体III）的表面表达模式，定义了有或没有CD16的CD14单核细胞的子集。从每个样品中分析了一百万个细胞，并使用荧光微粒（Flow-Count，Beckman Coulter）比较了CD16阳性单核细胞（CD14+/CD16+和CD14+/CD16+）的百分比。这项研究使用了CD86抗体（克隆HA5.2B7；贝克曼·库尔特，迈阿密，佛罗里达州）。

SCD14，LBP，Zonulin和I-FABP分析

LBP和SCD14标记用于监测微生物易位，而Zonulin和i-FABP进行测量以探索肠道渗透性：使用酶免疫测定法对LBP血浆水平进行测量，以定量自由人体LBP ELISA KIT。稀释系数为1：800。根据制造商的规格，使用人类SCD14套件测量SCD14的等离子水平。稀释因子为1：200。使用人Zonulin ELISA试剂盒测量Zonulin血清水平。根据制造商的建议，通过ELISA套件来测量I-FABP等离子水平。

• 便秘
• 炎

纳入标准：

• 血液透析超过3个月，年龄超过20岁

排除标准：

• HE排除标准是慢性炎症性疾病，当前感染，胶原蛋白血管疾病或免疫调节或免疫抑制治疗的史。

研究设计和人口

患者和方法2.1。招募患者选择200名血液透析患者。功能便秘将根据罗马四世标准诊断。在所有患者中，腹腔和骨盆底的有机病变都被内窥镜检查（乙状结肠镜检查，结肠镜检查，胃镜镜检查），放射学和超声评估所排除。

这项研究将根据2008年修订的赫尔辛基宣言进行。所有患者均应给予书面知情同意参加该研究。 Taichung Metroharbour医院的肾脏肾脏分裂的所有患者均被前瞻性地纳入其中。纳入标准是

1. 血液透析超过3个月
2. 年龄超过20岁

排除标准是慢性炎性疾病，当前感染，胶原蛋白血管疾病或免疫调节或免疫抑制治疗的病史。

测量炎性细胞因子，Etotaxin-1和淀粉样蛋白A

根据制造商的指示，分别通过市售人类ELISA试剂盒测试了MCP-1，IL-6，CRP，IL-17A和钙粘蛋白的血浆水平。根据制造商的协议，使用商业ELISA试剂盒（R＆D Systems，Minneapolis，MN，美国明尼阿波利斯）确定人血清eotaxin1水平。市售的ELISA程序用于测量血清中的血清淀粉样蛋白浓度，

内毒素和内毒素Ig M以及IgG核心抗体

内毒素是通过Lonza（目录＃50-647U）（EU/ML）的Limulus amebocyte裂解物QCL-1000在血清中测量的。用LAL试剂水以1∶5的比例稀释血清或血浆样品。使用Cell Sciences Inc（目录＃HK504）中的ELISA试剂盒在血浆中测量内毒素IgG核心抗体。单位表示为GMU/ML，是基于制造商的1000名健康成年人的中位数的IgG标准单元。

CD14和CD16单核表型的测定

外周血将通过静脉穿刺收集，使用乙二醇氨基乙酸（EDTA）作为抗凝剂。为了进行细胞测量分析，对CD14的单克隆抗体（荧光素异硫氰酸酯（FITC）共轭；克隆RMO52； Beckman Coulter，Miami，FL，USA），CD16（PhycoeryThrin（PE）（PE）使用CD45（phycoerythrin Cyanin-5（PC5）；克隆J33；贝克曼·库尔特（Beckman Coulter），迈阿密，佛罗里达州，美国）和CD56（克隆IM2073；贝克曼·库尔特（Beckman Coulter），迈阿密，佛罗里达州）。简而言之，用上述单克隆抗体和相应的同种型对照对整个血液的100 L染色。根据制造商的建议，在室温下在室温下孵育15分钟后，将Optilyse C（贝克曼·库尔特，迈阿密，佛罗里达州）添加到Lyse RBC中，并固定样品。固定细胞在6小时内通过流式细胞仪分析。

使用FC500-CYTOMETOM（BECKMAN COULTER）进行白细胞和单核细胞子集分布的测定，并使用CXP分析软件（2.2版）（Schroers等，2005）。单核细胞被鉴定为CD45阳性和CD56阴性细胞，表现出特定的前向散射谱。然后将单核细胞在SSC/CD点图中门控，将单核细胞鉴定为具有单核细胞散射特性的CD86细胞。根据脂多糖受体CD14和CD16（FCGAMMA受体III）的表面表达模式，定义了有或没有CD16的CD14单核细胞的子集。从每个样品中分析了一百万个细胞，并使用荧光微粒（Flow-Count，Beckman Coulter）比较了CD16阳性单核细胞（CD14+/CD16+和CD14+/CD16+）的百分比。这项研究使用了CD86抗体（克隆HA5.2B7；贝克曼·库尔特，迈阿密，佛罗里达州）。

SCD14，LBP，Zonulin和I-FABP分析

LBP和SCD14标记用于监测微生物易位，而Zonulin和i-FABP进行测量以探索肠道渗透性：使用酶免疫测定法对LBP血浆水平进行测量，以定量自由人体LBP ELISA KIT。稀释系数为1：800。根据制造商的规格，使用人类SCD14套件测量SCD14的等离子水平。稀释因子为1：200。使用人Zonulin ELISA试剂盒测量Zonulin血清水平。根据制造商的建议，通过ELISA套件来测量I-FABP等离子水平。

• 便秘
• 炎

纳入标准：

• 血液透析超过3个月，年龄超过20岁

排除标准：

• HE排除标准是慢性炎症性疾病，当前感染，胶原蛋白血管疾病或免疫调节或免疫抑制治疗的史。