• 描述通过测量肿瘤HER2-HER3二聚态化确定的FRET效率范围。 [时间范围：第1组：基线活检和确定的手术标本。第2组：基线活检。这是给出的
• 将肿瘤样品中的HER2-HER3二聚体表达水平与Flim-Fret检测到的匹配的血液样本（外泌体表达）进行比较。 [时间范围：每个周期（C）为21天（d）。第1A组和1B组：基线活检，确定的手术标本和配对的血液样本。第1A组：也在匹配的临时肿瘤和血液样本中（C4 D14-21）。第2组：基线活检和血液样本]
• 通过蛋白质检测测定法比较HER2在血液样本中的表达（外泌体），例如在IHC±FISH确定的匹配肿瘤组织中的HER2状态。 [时间范围：每个周期（C）为21天（d）。在Group1中，将在基线和新辅助治疗/手术完成后立即比较匹配的参与者肿瘤组织中的HER2表达。在第2组中，仅在基线时进行评估。这是给出的
• 确定通过测量外泌体HER2-HER3二聚体表达确定的可测量外泌体FRET效率的范围。 [时间范围：每个周期（C）为21天（d）。在Group1a中：基线，C2 D1，C5 D1，C6 D1和C8 D21-42。在第1B组：基线，C2 D1，C6 D21-42，第2组：基线，C2 D1，C4/5 D1。这是给出的
• 确定患者衍生的肿瘤和血液样本（外泌体）是否表明HER2-HER3二聚体对全身性HER2指导的治疗的变化（HER2-HER3二聚体表达的变化为阳性）。 [时间范围：每个周期（C）为21天（d）。在Group1a中：基线，C2 D1，C5 D1，C6 D1和C8 D21-42。在第1B组：基线，C2 D1，C6 D21-42，第2组：基线，C2 D1，C4/5 D1。在基线的肿瘤中，C4 D14-21（仅组1A）和手术后立即（仅组1）]
• 通过测量肿瘤HER2-HER3二聚体的表达来确定FRET效率的统计关联（基线和任何随后的变化），并用放射学和病理对全身治疗的反应。 [时间范围：每个周期（C）为21天（d）。 HER2-HER3二聚体在基线时在肿瘤中测量，C4 D14-21（仅组1A）和手术后立即（仅组1组）。放射学成像是研究过程中的护理标准（SOC）。这是给出的
• 确定通过测量外泌体HER2-HER3二聚体表达来确定的FRET效率（基线和任何后续变化）的统计关联，并用放射性和病理对全身治疗的反应[时间框架：C）为21天（d）。在Group1a中：基线，C2 D1，C5 D1，C6 D1和C8 D21-42。在第1B组：基线，C2 D1，C6 D21-42，第2组：基线，C2 D1，C4/5 D1。手术后立即进行病理反应（仅组1）。放射学成像作为SOC]
• 确定免疫细胞标志物表达水平（基线和随后的任何变化）与对系统治疗的放射学和病理反应的统计关联。 （仅可选同意书的医院网站）。 [时间范围：每个周期（C）为21天（d）。在Group1a中：基线，C2 D1，C5 D1，C6 D1和C8 D21-42。在第1B组：基线，C2 D1，C6 D21-42，第2组：基线，C2 D1，C4/5 D1。手术后立即进行病理反应（仅组1）。放射学成像为SOC。这是给出的
• 确定在国家卫生服务（NHS）实践中使用外泌体表达测试的可行性。 [时间范围：学习完成]
  1. 确定在临床环境中适当处理的参与者衍生的血液样本的百分比，并运送到中央实验室进行外部分析。
  2. 描述从诊所获得不合适的参与者衍生的血液样本的原因。
  3. 确定成功分析生物标志物表达的参与者衍生的血液样本的百分比，即表现出外泌体分离的血液样本的百分比，这是表现出HER2-HER3二聚体的血液样本的百分比。

乳腺癌的治疗取决于其“受体（或信号）状态”。受体是所有细胞上存在的信号，如果异常可以促进癌症的生长。 HER2受体/信号是可以推动乳腺癌生长的信号之一。发现所有乳腺癌中有四分之一的HER2信号是HER2阳性乳腺癌。

HER2是构成Her1，Her2，Her3和Her4信号的其家庭成员。目前，测试可以从活检中识别出过多HER2的乳腺癌，因此癌症医生可以开处方抗HEH2治疗以阻止这些信号。这些药物在HER2阳性乳腺癌中的存活率提高了。她的家庭成员还可以彼此“配对”，以激活鼓励癌症生长的信号。例如，Her3自然与Her2“对”。尽管已经开发出抗癌药来瞄准这种配对，但目前的患者选择方法并未开发出来检测组织活检中信号的配对。 A specialist imaging technique called FLIM-FRET (FLIM- Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy; FRET- Forster resonance energy transfer) can identify signal pairing on cancer cells from tissue, and potentially, from blood samples.

这项研究涉及进行血液检查，而参与者接受抗HER2治疗。研究人员还将寻求许可从已经进行的活检中采集癌症组织样本，例如诊断时。一些参与者可能需要额外的活检，将在同意之前与参与者进行讨论。这项研究将使用专家Flim-Fret技术来测量肿瘤样品和血液样本中的信号配对。研究人员将测量血液中信号配对的水平与组织的水平相同，这可能导致血液测试用于选择患者进行抗HER2治疗，而不是侵入性组织活检。信号配对的变化也可能有助于预测癌症是否对治疗具有抵抗力。

该研究将招募40名参与者到下面概述的两个小组：

第1组：早期HER2阳性乳腺癌（20例）组2：转移性HER2阳性乳腺癌（20例）

两组在其临床表现中代表了乳腺癌的自然谱。

第1组：早期乳腺癌

第1组将包括患有早期HER2阳性乳腺癌的患者，建议在进行治疗手术之前接受新的辅助化疗（包括HER2定向疗法（Trastuzumab + Pertuzumab））。预计所有参与者将在完成新辅助化学疗法后进行诊断性核心活检和明确的乳房手术。将在外泌体中获得血液样本进行生物标志物分析。第1组A组的参与者将要求对基于蒽环类化疗的化疗进行活检，并在开始进行HER2定向治疗之前进行活检。

第1组A：第1组的参与者开始使用基于蒽环类药物的化学疗法进行治疗，最多4个周期，然后切换到基于紫杉烷的化学疗法的治疗方法与HER2定向治疗（trastuzumab + pertuzumab）结合使用，以最多4个周期

第1组B：第1组的参与者开始使用基于紫杉烷的全身疗法进行治疗，并结合HER2定向疗法（Trastuzumab + Pertuzumab），最多6个周期：

第2组：转移性乳腺癌：

第2组将包括转移性HER2阳性乳腺癌的患者，建议在姑息治疗中接受HER2定向的全身疗法（Trastuzumab + Pertuzumab）。预计所有参与者都将进行诊断性核心活检。将在外泌体中获得血液样本进行生物标志物分析。

第1组：根据医师判断，早期的HER2乳腺癌和开处方的新辅助化疗，包括曲妥珠单抗和pertuzumab。

第2组：根据医师判断，转移性HER2阳性乳腺癌和开处方化疗，包括曲妥珠单抗和pertuzumab。

• 第1组：早期HER2阳性乳腺癌
  第1组的研究参与者将包括患者通过治疗肿瘤学家诊断出HER2阳性乳腺癌的患者，包括新辅助系统治疗（包括曲妥珠单抗和pertuzumab）。
  干预：其他：获取血液样本和肿瘤组织样品（活检）
• 第2组：转移性HER2阳性乳腺癌
  第2组的研究参与者将通过治疗肿瘤科医生来诊断HER2阳性转移性乳腺癌，包括患者开处方的全身疗法（包括曲妥珠单抗和pertuzumab）。
  干预：其他：获取血液样本和肿瘤组织样品（活检）

纳入标准：

1. 18岁或以上的男性或男性。
2. 组织学记录的乳腺癌。在转移性乳腺癌（第2组）的参与者中，应在诊断转移性乳腺癌时进行活检。 （请参阅第2组特定标准的纳入标准10）
3. HER2阳性乳腺癌，可以通过免疫组织化学确定，并通过根据护理标准指南在边界案例中通过荧光原位杂交或原位杂交确认。
4. 确认有足够的肿瘤组织的可用性（来自诊断核心活检）进行生物标志物分析（请参阅研究实验室手册）
5. 根据研究者的判断，适合与HER2靶向治疗结合化疗的治疗
6. 预期寿命为12周或更长时间。
7. 参与者愿意并且能够给予知情同意参加研究，并以研究者的意见，能够并且愿意遵守所有研究要求。
8. 参与者愿意在需要时进行其他活检，即1A组和第2组
9. 愿意允许他或她的全科医生参与研究[可选]。

10. 第2组特定标准

    1. 在第2组中进行生物标志物分析的预处理肿瘤样本将从首次被诊断为转移性HER2阳性乳腺癌时获得的诊断活检。活检应遵循或在诊断转移性乳腺癌时进行（即在先前诊断为早期/局部晚期乳腺癌的生物标志物分析期间，无法使用在早期/局部晚期乳腺癌的先前诊断过程中获得的肿瘤组织）。活检可以从乳房或转移部位获得。如果尚未进行转移性乳腺癌诊断时或诊断时进行活检，则需要组织特定的活检。
    2. 只有患者建议通过其医生使用紫杉烷，曲妥珠单抗和pertuzumab进行第一线治疗。使用HER2靶向疗法的任何其他治疗组合考虑的潜在参与者将被视为符合条件。

排除标准

1. 研究人员认为，如果需要的话，明显的血小板细胞膜或异常的凝血筛查或任何其他会避开组织活检的状况。
2. 不愿意进行研究的参与者需要组织活检和血液采样。
3. 研究人员认为，由于参与研究的参与，可能会使参与者处于危险之中，或者可能影响研究的结果，或者参与者参与研究的能力。
4. 参与者无法通过研究人员判断的研究程序进行合作。

• 盖伊和圣托马斯的NHS基金会信托
• 布莱顿和苏塞克斯大学医院NHS Trust

• 描述通过测量肿瘤HER2-HER3二聚态化确定的FRET效率范围。 [时间范围：第1组：基线活检和确定的手术标本。第2组：基线活检。这是给出的
• 将肿瘤样品中的HER2-HER3二聚体表达水平与Flim-Fret检测到的匹配的血液样本（外泌体表达）进行比较。 [时间范围：每个周期（C）为21天（d）。第1A组和1B组：基线活检，确定的手术标本和配对的血液样本。第1A组：也在匹配的临时肿瘤和血液样本中（C4 D14-21）。第2组：基线活检和血液样本]
• 通过蛋白质检测测定法比较HER2在血液样本中的表达（外泌体），例如在IHC±FISH确定的匹配肿瘤组织中的HER2状态。 [时间范围：每个周期（C）为21天（d）。在Group1中，将在基线和新辅助治疗/手术完成后立即比较匹配的参与者肿瘤组织中的HER2表达。在第2组中，仅在基线时进行评估。这是给出的
• 确定通过测量外泌体HER2-HER3二聚体表达确定的可测量外泌体FRET效率的范围。 [时间范围：每个周期（C）为21天（d）。在Group1a中：基线，C2 D1，C5 D1，C6 D1和C8 D21-42。在第1B组：基线，C2 D1，C6 D21-42，第2组：基线，C2 D1，C4/5 D1。这是给出的
• 确定患者衍生的肿瘤和血液样本（外泌体）是否表明HER2-HER3二聚体对全身性HER2指导的治疗的变化（HER2-HER3二聚体表达的变化为阳性）。 [时间范围：每个周期（C）为21天（d）。在Group1a中：基线，C2 D1，C5 D1，C6 D1和C8 D21-42。在第1B组：基线，C2 D1，C6 D21-42，第2组：基线，C2 D1，C4/5 D1。在基线的肿瘤中，C4 D14-21（仅组1A）和手术后立即（仅组1）]
• 通过测量肿瘤HER2-HER3二聚体的表达来确定FRET效率的统计关联（基线和任何随后的变化），并用放射学和病理对全身治疗的反应。 [时间范围：每个周期（C）为21天（d）。 HER2-HER3二聚体在基线时在肿瘤中测量，C4 D14-21（仅组1A）和手术后立即（仅组1组）。放射学成像是研究过程中的护理标准（SOC）。这是给出的
• 确定通过测量外泌体HER2-HER3二聚体表达来确定的FRET效率（基线和任何后续变化）的统计关联，并用放射性和病理对全身治疗的反应[时间框架：C）为21天（d）。在Group1a中：基线，C2 D1，C5 D1，C6 D1和C8 D21-42。在第1B组：基线，C2 D1，C6 D21-42，第2组：基线，C2 D1，C4/5 D1。手术后立即进行病理反应（仅组1）。放射学成像作为SOC]
• 确定免疫细胞标志物表达水平（基线和随后的任何变化）与对系统治疗的放射学和病理反应的统计关联。 （仅可选同意书的医院网站）。 [时间范围：每个周期（C）为21天（d）。在Group1a中：基线，C2 D1，C5 D1，C6 D1和C8 D21-42。在第1B组：基线，C2 D1，C6 D21-42，第2组：基线，C2 D1，C4/5 D1。手术后立即进行病理反应（仅组1）。放射学成像为SOC。这是给出的
• 确定在国家卫生服务（NHS）实践中使用外泌体表达测试的可行性。 [时间范围：学习完成]
  1. 确定在临床环境中适当处理的参与者衍生的血液样本的百分比，并运送到中央实验室进行外部分析。
  2. 描述从诊所获得不合适的参与者衍生的血液样本的原因。
  3. 确定成功分析生物标志物表达的参与者衍生的血液样本的百分比，即表现出外泌体分离的血液样本的百分比，这是表现出HER2-HER3二聚体的血液样本的百分比。

乳腺癌的治疗取决于其“受体（或信号）状态”。受体是所有细胞上存在的信号，如果异常可以促进癌症的生长。 HER2受体/信号是可以推动乳腺癌生长的信号之一。发现所有乳腺癌中有四分之一的HER2信号是HER2阳性乳腺癌。

HER2是构成Her1，Her2，Her3和Her4信号的其家庭成员。目前，测试可以从活检中识别出过多HER2的乳腺癌，因此癌症医生可以开处方抗HEH2治疗以阻止这些信号。这些药物在HER2阳性乳腺癌中的存活率提高了。她的家庭成员还可以彼此“配对”，以激活鼓励癌症生长的信号。例如，Her3自然与Her2“对”。尽管已经开发出抗癌药来瞄准这种配对，但目前的患者选择方法并未开发出来检测组织活检中信号的配对。 A specialist imaging technique called FLIM-FRET (FLIM- Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy; FRET- Forster resonance energy transfer) can identify signal pairing on cancer cells from tissue, and potentially, from blood samples.

这项研究涉及进行血液检查，而参与者接受抗HER2治疗。研究人员还将寻求许可从已经进行的活检中采集癌症组织样本，例如诊断时。一些参与者可能需要额外的活检，将在同意之前与参与者进行讨论。这项研究将使用专家Flim-Fret技术来测量肿瘤样品和血液样本中的信号配对。研究人员将测量血液中信号配对的水平与组织的水平相同，这可能导致血液测试用于选择患者进行抗HER2治疗，而不是侵入性组织活检。信号配对的变化也可能有助于预测癌症是否对治疗具有抵抗力。

该研究将招募40名参与者到下面概述的两个小组：

第1组：早期HER2阳性乳腺癌（20例）组2：转移性HER2阳性乳腺癌（20例）

两组在其临床表现中代表了乳腺癌的自然谱。

第1组：早期乳腺癌

第1组将包括患有早期HER2阳性乳腺癌的患者，建议在进行治疗手术之前接受新的辅助化疗（包括HER2定向疗法（Trastuzumab + Pertuzumab））。预计所有参与者将在完成新辅助化学疗法后进行诊断性核心活检和明确的乳房手术。将在外泌体中获得血液样本进行生物标志物分析。第1组A组的参与者将要求对基于蒽环类化疗的化疗进行活检，并在开始进行HER2定向治疗之前进行活检。

第1组A：第1组的参与者开始使用基于蒽环类药物的化学疗法进行治疗，最多4个周期，然后切换到基于紫杉烷的化学疗法的治疗方法与HER2定向治疗（trastuzumab + pertuzumab）结合使用，以最多4个周期

第1组B：第1组的参与者开始使用基于紫杉烷的全身疗法进行治疗，并结合HER2定向疗法（Trastuzumab + Pertuzumab），最多6个周期：

第2组：转移性乳腺癌：

第2组将包括转移性HER2阳性乳腺癌的患者，建议在姑息治疗中接受HER2定向的全身疗法（Trastuzumab + Pertuzumab）。预计所有参与者都将进行诊断性核心活检。将在外泌体中获得血液样本进行生物标志物分析。

第1组：根据医师判断，早期的HER2乳腺癌和开处方的新辅助化疗，包括曲妥珠单抗和pertuzumab。

第2组：根据医师判断，转移性HER2阳性乳腺癌和开处方化疗，包括曲妥珠单抗和pertuzumab。

• 第1组：早期HER2阳性乳腺癌
  第1组的研究参与者将包括患者通过治疗肿瘤学家诊断出HER2阳性乳腺癌的患者，包括新辅助系统治疗（包括曲妥珠单抗和pertuzumab）。
  干预：其他：获取血液样本和肿瘤组织样品（活检）
• 第2组：转移性HER2阳性乳腺癌
  第2组的研究参与者将通过治疗肿瘤科医生来诊断HER2阳性转移性乳腺癌，包括患者开处方的全身疗法（包括曲妥珠单抗和pertuzumab）。
  干预：其他：获取血液样本和肿瘤组织样品（活检）

纳入标准：

1. 18岁或以上的男性或男性。
2. 组织学记录的乳腺癌。在转移性乳腺癌（第2组）的参与者中，应在诊断转移性乳腺癌时进行活检。 （请参阅第2组特定标准的纳入标准10）
3. HER2阳性乳腺癌，可以通过免疫组织化学确定，并通过根据护理标准指南在边界案例中通过荧光原位杂交或原位杂交确认。
4. 确认有足够的肿瘤组织的可用性（来自诊断核心活检）进行生物标志物分析（请参阅研究实验室手册）
5. 根据研究者的判断，适合与HER2靶向治疗结合化疗的治疗
6. 预期寿命为12周或更长时间。
7. 参与者愿意并且能够给予知情同意参加研究，并以研究者的意见，能够并且愿意遵守所有研究要求。
8. 参与者愿意在需要时进行其他活检，即1A组和第2组
9. 愿意允许他或她的全科医生参与研究[可选]。

10. 第2组特定标准

    1. 在第2组中进行生物标志物分析的预处理肿瘤样本将从首次被诊断为转移性HER2阳性乳腺癌时获得的诊断活检。活检应遵循或在诊断转移性乳腺癌时进行（即在先前诊断为早期/局部晚期乳腺癌的生物标志物分析期间，无法使用在早期/局部晚期乳腺癌的先前诊断过程中获得的肿瘤组织）。活检可以从乳房或转移部位获得。如果尚未进行转移性乳腺癌诊断时或诊断时进行活检，则需要组织特定的活检。
    2. 只有患者建议通过其医生使用紫杉烷，曲妥珠单抗和pertuzumab进行第一线治疗。使用HER2靶向疗法的任何其他治疗组合考虑的潜在参与者将被视为符合条件。

排除标准

1. 研究人员认为，如果需要的话，明显的血小板细胞膜或异常的凝血筛查或任何其他会避开组织活检的状况。
2. 不愿意进行研究的参与者需要组织活检和血液采样。
3. 研究人员认为，由于参与研究的参与，可能会使参与者处于危险之中，或者可能影响研究的结果，或者参与者参与研究的能力。
4. 参与者无法通过研究人员判断的研究程序进行合作。

• 盖伊和圣托马斯的NHS基金会信托
• 布莱顿和苏塞克斯大学医院NHS Trust