• R组中Treg频率的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  通过流式细胞术在外周血中测量Treg的频率。
• R组中Breg的频率的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  通过流式细胞术在外周血中测量布雷格的频率。
• N组中Treg频率的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  通过流式细胞术在外周血中测量Treg的频率。
• N组Breg频率的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  通过流式细胞术在外周血中测量布雷格的频率。

• R组中克罗恩病活动指数（CDAI）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  CDAI是克罗恩病严重程度的量度。 CDAI <150处于缓解阶段，≥150处于活动阶段。 CDAI与CD患者的疾病活性负相关。
• R组中C反应蛋白（CRP）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  CRP通常合并以评估CD患者的疾病活性。正常的CRP范围为（0-8）mg/l.CRP CRP表示疾病活性。
• R组中白细胞计数（WBC）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  WBC通常合并以评估CD患者的疾病活性。正常的WBC范围为（4-10）×109/L.INCROUDED WBC表示疾病活动。
• R组中血小板计数（PLT）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  通常将PLT合并以评估CD患者的疾病活性。正常的PLT范围为（100-300）×109/l.Increded PLT表示疾病活性。
• R组的红细胞沉积率（ESR）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  ESR通常合并以评估CD患者的疾病活性。正常的ESR范围为（0-15）mm/h。燃料ESR表示疾病活性。
• n组中克罗恩病活动指数（CDAI）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  CDAI是克罗恩病严重程度的量度。 CDAI <150处于缓解阶段，≥150处于活动阶段。 CDAI与CD患者的疾病活性负相关。
• N组中C反应蛋白（CRP）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  CRP通常合并以评估CD患者的疾病活性。正常的CRP范围为（0-8）mg/l.CRP CRP表示疾病活性。
• N组中白细胞计数（WBC）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  WBC通常合并以评估CD患者的疾病活性。正常的WBC范围为（4-10）×109/L.INCROUDED WBC表示疾病活动。
• N组中血小板计数（PLT）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  通常将PLT合并以评估CD患者的疾病活性。正常的PLT范围为（100-300）×109/l.Increded PLT表示疾病活性。
• N组的红细胞沉降率（ESR）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  ESR通常合并以评估CD患者的疾病活性。正常的ESR范围为（0-15）mm/h。燃料ESR表示疾病活性。

目的：这项研究的主要目的是通过分析Breg和Treg之间的关系以及英夫利昔单抗的疗效，获得Treg和Breg的预测值对英夫利昔单抗在治疗中的临床效果。

设计：这是一项前瞻性，观察性研究。在治疗组中，招募了32例克罗恩病（CD）患者，即将开始使用英夫利昔单抗治疗。他们在英夫利昔单抗治疗的第0周和第14周有血液样本。 33个健康个体充当对照组。控制措施仅研究一次。所有治疗和随访均根据国家准则。使用流式细胞仪研究Treg和Breg的频率。受试者数据是从各种注册表中提取的。

1. 最初活跃阶段CD的患者是从温州医科大学第二附属医院胃肠病学系收集的。 CD的诊断基于临床，内窥镜，实验室，放射学，组织病理学发现和根据欧洲克罗恩病和结肠炎的诊断和治疗指南在2016年。健康的个体是健康的。从温州医科大学第二附属医院的健康检查中心收集为健康对照。记录了CD患者和健康对照的人口统计信息和特征信息。
2. 英夫利昔单抗（5mg/kg）在第0、2和6周静脉注射以诱导CD的缓解，然后每8周以相同剂量的英夫利昔单抗维持。
3. 第一次服用英夫利昔单抗后，CD患者在14周内被跟踪。根据症状，CDAI和内窥镜粘膜愈合，在英夫利昔单抗治疗的第14周，CD患者被归类为缓解组（CDAI <150和内窥镜粘膜愈合，R组）和非损害组（CDAI≥150和/或粘膜非粘膜-Nealing Group，N组）。
4. 在CD患者中检测到C反应性蛋白（CRP），白细胞计数（WBC），血小板计数（PLT），红细胞沉积率（ESR），以评估英夫利昔单抗治疗的第0和14周的临床疗效。
5. 从每位CD患者（英夫利昔单抗治疗的第0和14周）和健康对照组中获得了大约5 mL外围空腹血液。从血液样本中分离出外周血单核细胞（PBMC）。
6. 使用多色流式细胞仪检查B细胞中Breg（CD3-CD19+ IL-10+ B细胞）的频率：PBMC被重悬于RPMI 1640培养基中，补充了10％的胎牛血清和1％青霉素/链霉菌素蛋白质/链霉素。溶液，添加在96孔平底培养板中。然后，用脂多糖刺激所获得的细胞48小时，在孵化器中的5％CO2中以37℃培养，并在最后5小时内添加凤凰12-羟基酯13-乙酸酯，离子霉素和Brefeldin A。在体外刺激和培养后，PBMC被FITC偶联的抗人CD3抗体染色，APC偶联的抗人CD19抗体持续30分钟，在4℃时阻断光。然后固定染色的细胞并使用细胞膜/细胞处理剂试剂盒透化，并用PE偶联的抗人类IL-10抗体染色2小时，以保护形式光。流动染色缓冲溶液在Breg的流式细胞仪检测前重新悬浮了细胞。
7. 多色流式细胞仪用于检查CD4+ T细胞中Treg（CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞）的频率：PBMC用FITC偶联的抗人类CD4抗体染色，APC偶联的抗偶联的抗人类CD25抗体，用于30几分钟，屏蔽在4℃处。将染色的细胞添加固定缓冲液，并在黑暗过夜中在4℃下孵育，然后用PE偶联的抗人类Foxp3抗体染色2小时，在4°℃中受到保护。流动染色缓冲溶液在Treg的流式细胞仪检测前重新悬浮了细胞。

温州医科大学第二附属医院的胃肠病学系的患者有资格进入。

健康对照在温州医科大学第二附属医院的健康检查中心招募。

• CD患者
  CD患者即将开始使用英夫利昔单抗治疗，在基线，2周，6周，然后每8周后，IV注射5 mg/kg。CD患者在英夫利昔单抗第一次给药后14周。在英夫利昔单抗治疗的第14周，CD患者被归类为缓解组（CDAI <150和内窥镜粘膜愈合，R组）和非压缩组（CDAI≥150和/或粘膜非治疗组，N组）。
  干预：药物：英夫利昔单抗
• 健康控制
  没有克罗恩病的健康对照。

CD患者

纳入标准：

1. 克罗恩病在初始活跃阶段，CDAI≥150。
2. 开始英夫利昔单抗治疗

排除标准：

1. 明显的合并症（例如癌症，肠结核病，缺血性肠炎，放射性肠炎）
2. 其他免疫疾病（例如糖尿病，类风湿关节炎全身性红斑狼疮）
3. 目前用糖皮质激素，免疫抑制剂和生物学剂治疗

健康控制

纳入标准：

1. 没有目前的疾病
2. 无日常吸毒

排除标准：

1. 明显的合并症（例如癌症，肠结核病，缺血性肠炎，放射性肠炎）
2. 其他免疫疾病（例如糖尿病，类风湿关节炎全身性红斑狼疮）
3. 目前用糖皮质激素，免疫抑制剂和生物学剂治疗

• R组中Treg频率的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  通过流式细胞术在外周血中测量Treg的频率。
• R组中Breg的频率的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  通过流式细胞术在外周血中测量布雷格的频率。
• N组中Treg频率的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  通过流式细胞术在外周血中测量Treg的频率。
• N组Breg频率的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  通过流式细胞术在外周血中测量布雷格的频率。

• R组中克罗恩病活动指数（CDAI）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  CDAI是克罗恩病严重程度的量度。 CDAI <150处于缓解阶段，≥150处于活动阶段。 CDAI与CD患者的疾病活性负相关。
• R组中C反应蛋白（CRP）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  CRP通常合并以评估CD患者的疾病活性。正常的CRP范围为（0-8）mg/l.CRP CRP表示疾病活性。
• R组中白细胞计数（WBC）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  WBC通常合并以评估CD患者的疾病活性。正常的WBC范围为（4-10）×109/L.INCROUDED WBC表示疾病活动。
• R组中血小板计数（PLT）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  通常将PLT合并以评估CD患者的疾病活性。正常的PLT范围为（100-300）×109/l.Increded PLT表示疾病活性。
• R组的红细胞沉积率（ESR）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  ESR通常合并以评估CD患者的疾病活性。正常的ESR范围为（0-15）mm/h。燃料ESR表示疾病活性。
• n组中克罗恩病活动指数（CDAI）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  CDAI是克罗恩病严重程度的量度。 CDAI <150处于缓解阶段，≥150处于活动阶段。 CDAI与CD患者的疾病活性负相关。
• N组中C反应蛋白（CRP）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  CRP通常合并以评估CD患者的疾病活性。正常的CRP范围为（0-8）mg/l.CRP CRP表示疾病活性。
• N组中白细胞计数（WBC）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  WBC通常合并以评估CD患者的疾病活性。正常的WBC范围为（4-10）×109/L.INCROUDED WBC表示疾病活动。
• N组中血小板计数（PLT）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  通常将PLT合并以评估CD患者的疾病活性。正常的PLT范围为（100-300）×109/l.Increded PLT表示疾病活性。
• N组的红细胞沉降率（ESR）的变化[时间范围：英夫利昔单抗治疗的第0周，英夫利昔单抗治疗的第14周]
  ESR通常合并以评估CD患者的疾病活性。正常的ESR范围为（0-15）mm/h。燃料ESR表示疾病活性。

目的：这项研究的主要目的是通过分析Breg和Treg之间的关系以及英夫利昔单抗的疗效，获得Treg和Breg的预测值对英夫利昔单抗在治疗中的临床效果。

设计：这是一项前瞻性，观察性研究。在治疗组中，招募了32例克罗恩病（CD）患者，即将开始使用英夫利昔单抗治疗。他们在英夫利昔单抗治疗的第0周和第14周有血液样本。 33个健康个体充当对照组。控制措施仅研究一次。所有治疗和随访均根据国家准则。使用流式细胞仪研究Treg和Breg的频率。受试者数据是从各种注册表中提取的。

1. 最初活跃阶段CD的患者是从温州医科大学第二附属医院胃肠病学系收集的。 CD的诊断基于临床，内窥镜，实验室，放射学，组织病理学发现和根据欧洲克罗恩病和结肠炎的诊断和治疗指南在2016年。健康的个体是健康的。从温州医科大学第二附属医院的健康检查中心收集为健康对照。记录了CD患者和健康对照的人口统计信息和特征信息。
2. 英夫利昔单抗（5mg/kg）在第0、2和6周静脉注射以诱导CD的缓解，然后每8周以相同剂量的英夫利昔单抗维持。
3. 第一次服用英夫利昔单抗后，CD患者在14周内被跟踪。根据症状，CDAI和内窥镜粘膜愈合，在英夫利昔单抗治疗的第14周，CD患者被归类为缓解组（CDAI <150和内窥镜粘膜愈合，R组）和非损害组（CDAI≥150和/或粘膜非粘膜-Nealing Group，N组）。
4. 在CD患者中检测到C反应性蛋白（CRP），白细胞计数（WBC），血小板计数（PLT），红细胞沉积率（ESR），以评估英夫利昔单抗治疗的第0和14周的临床疗效。
5. 从每位CD患者（英夫利昔单抗治疗的第0和14周）和健康对照组中获得了大约5 mL外围空腹血液。从血液样本中分离出外周血单核细胞（PBMC）。
6. 使用多色流式细胞仪检查B细胞中Breg（CD3-CD19+ IL-10+ B细胞）的频率：PBMC被重悬于RPMI 1640培养基中，补充了10％的胎牛血清和1％青霉素/链霉菌素蛋白质/链霉素。溶液，添加在96孔平底培养板中。然后，用脂多糖刺激所获得的细胞48小时，在孵化器中的5％CO2中以37℃培养，并在最后5小时内添加凤凰12-羟基酯13-乙酸酯，离子霉素和Brefeldin A。在体外刺激和培养后，PBMC被FITC偶联的抗人CD3抗体染色，APC偶联的抗人CD19抗体持续30分钟，在4℃时阻断光。然后固定染色的细胞并使用细胞膜/细胞处理剂试剂盒透化，并用PE偶联的抗人类IL-10抗体染色2小时，以保护形式光。流动染色缓冲溶液在Breg的流式细胞仪检测前重新悬浮了细胞。
7. 多色流式细胞仪用于检查CD4+ T细胞中Treg（CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞）的频率：PBMC用FITC偶联的抗人类CD4抗体染色，APC偶联的抗偶联的抗人类CD25抗体，用于30几分钟，屏蔽在4℃处。将染色的细胞添加固定缓冲液，并在黑暗过夜中在4℃下孵育，然后用PE偶联的抗人类Foxp3抗体染色2小时，在4°℃中受到保护。流动染色缓冲溶液在Treg的流式细胞仪检测前重新悬浮了细胞。

温州医科大学第二附属医院的胃肠病学系的患者有资格进入。

健康对照在温州医科大学第二附属医院的健康检查中心招募。

• CD患者
  CD患者即将开始使用英夫利昔单抗治疗，在基线，2周，6周，然后每8周后，IV注射5 mg/kg。CD患者在英夫利昔单抗第一次给药后14周。在英夫利昔单抗治疗的第14周，CD患者被归类为缓解组（CDAI <150和内窥镜粘膜愈合，R组）和非压缩组（CDAI≥150和/或粘膜非治疗组，N组）。
  干预：药物：英夫利昔单抗
• 健康控制
  没有克罗恩病的健康对照。

CD患者

纳入标准：

1. 克罗恩病在初始活跃阶段，CDAI≥150。
2. 开始英夫利昔单抗治疗

排除标准：

1. 明显的合并症（例如癌症，肠结核病，缺血性肠炎，放射性肠炎）
2. 其他免疫疾病（例如糖尿病，类风湿关节炎' target='_blank'>关节炎全身性红斑狼疮）
3. 目前用糖皮质激素，免疫抑制剂和生物学剂治疗

健康控制

纳入标准：

1. 没有目前的疾病
2. 无日常吸毒

排除标准：

1. 明显的合并症（例如癌症，肠结核病，缺血性肠炎，放射性肠炎）
2. 其他免疫疾病（例如糖尿病，类风湿关节炎' target='_blank'>关节炎全身性红斑狼疮）
3. 目前用糖皮质激素，免疫抑制剂和生物学剂治疗