C.2主题纳入和评估总体研究设计：非EC-NOTY吸烟者或电子烟使用者（n = 20）将在每次PET扫描之前5天弃用烟草吸烟/尼古丁产品。按随机顺序（平衡），在接受受体可用性的基线量化后，使用EC时将扫描受试者：（1）“ Juul” 5％，这是一种常见的市售未修饰的尼古丁盐EC，（2）JUUL 3％，3％，3％，较低的尼古丁强度产品。第三次可选扫描可能会进行烟雾，但不需要进行香烟。在扫描过程中，将测量受试者在EC使用后接受动脉血液尼古丁水平测量，并测量尼古丁戒断，渴望和药物作用的测量。每次PET扫描之前，将需要进行5-7天的戒烟时间，以确保不残留的尼古丁占据受体。在随后的戒烟/PET扫描之前，第一次扫描2-3周后，受试者将像往常一样恢复吸烟。应要求将为受试者提供戒烟资源。

C.2.b受试者：将招募二十个非EC-NO-EEC依赖的吸烟者或电子烟使用者进行研究。所有研究主题将根据耶鲁大学机构审查委员会（人类调查委员会）的指南招募。吸烟者将通过IRB批准的广告从社区招募。完成知情同意后，受试者将进行精神病，身体和神经系统检查，实验室检查和心电图（EKG）（EKG）（请参阅下面的C.2.C临床评估）。这被认为是筛选阶段。受试者将被排除在主要的医学，神经系统或精神病，异常实验室检查或宠物或MR成像的禁忌症中。在筛查中，在每次成像会议之前进行尿液药物筛查和妊娠试验，并将参与者排除在阳性测试中。可以在人类受试者部分的保护中找到详细的包含/排除标准。所有妇女都必须进行阴性尿液妊娠试验，并且所有受试者都必须在放射性示例之前进行负尿液药物毒理学测试。

C.2.C临床评估：将对所有摄入量的所有受试者进行标准化电池对于抑郁，焦虑和愤怒），流行病学研究中心抑郁症量表），焦虑症（状态特征焦虑清单），冲动性（短暂 - 巴拉特冲动量表，吸烟依赖性（Promis Nicotine依赖量表），渴望吸烟（Tiffany QSU）和戒烟（明尼苏达州尼古丁戒断量表）。挑战前和之后的每个扫描将重复情绪和吸烟评估。产品喜欢，渴望和药物效果问卷（DEQ）将以主观尺度评估（0-100，低至高） ）立即使用产品。DEQ将测量由七个项目组成的急性效应：药物强度，高，感觉受刺激，好效果，不良影响，想要更多的药物和药物喜欢。

基线和每次PET扫描/电子烟挑战之后：

• 健康问卷
• PROMIS呼吸困难的严重性项目池
• Promis呼吸困难特征
• Promis疲劳短形式
• 慢性病治疗（FAT）咳嗽项目的功能评估
• 题为“健康问题评估”（并通过IRES中的评论提供）的健康问卷将添加到协议中，并将在摄入量和每次曝光之前完成。请注意，不会招募具有慢性症状的潜在受试者，这些受试者不会纳入监测烟并发症的监测。

症状变化或单个严重症状变化的积极发现将触发临床转诊至治疗医师或急诊室。

C.2.D应急管理：所有吸烟者/电子烟的用户将被帮助在每次PET扫描之前使用非常成功的应急管理技术戒酒5至7天，这些技术以前在实验室中已广泛使用。在第一次PET扫描后，受试者将像往常一样恢复吸烟，并在下一次PET扫描之前重复戒烟。过去，通过招募非治疗的吸烟者，这种技术在过去的多个挑战之后都成功地研究了受体的尼古丁占用。每天都会在节制过程中满足受试者的支持，并获得CO和尿液可替宁水平，以确保戒烟。无法戒除烟草吸烟的受试者将从研究中撤回。

c.2.e-将要求MRI/认知测试对象访问Anlyan医学研究与教育中心（TAC，Cedar Street 300）的MRRC，以对其大脑进行MRI（磁共振成像）扫描。 MRI的目的是帮助我们在PET扫描中确定其大脑的不同区域。

MRI扫描是获取身体内部图片的日常方式。将询问受试者在朝着MRI系统迈进之前是否携带任何金属物体。这些物体将在MRI中心的一个锁定柜中持有，以避免在接近磁铁时飞向磁铁。还将要求他们穿过金属探测器。他们将被要求躺在MRI扫描仪中约30分钟。扫描仪看起来像一条深隧道。他们将从头到膝盖在隧道内。他们将无法看到它，但是他们将能够听到我们的声音，并听到他们想说什么。当相机拍照时，他们会听到鼓声的声音。如果他们在扫描过程中感到不舒服，那么扫描将在他们希望的任何时候结束。但是，如果他们无法完成MRI扫描，他们将无法参加这些研究。

他们的记忆，注意力和注意力都可能进行两次测试。这将大约需要1小时。他们将在这些会话之间休息。这可能发生在MRI扫描的同一天，或者在PET扫描之前的第二天，如果他们和员工的时间表更好。

在这次访问期间，他们可能会玩一个名为“ Face Game”的电脑游戏。面部游戏的目标是赢得尽可能多的钱。每当他们在屏幕上看到脸部时，他们可能会快速，正确地按下键盘上的两个钥匙之一来赚钱。如果他们认为脸上的嘴很长，他们会按一个键，如果他们认为这很短，则会按键。

还可以要求冷施加任务受试者在研究期间参加冷压缩任务，以测试人体对冷水的生理反应。他们将被要求将您的手浸入维持在0-4°C的一桶冰冷水中。当他们开始感到疼痛并将手从水中移开时，他们将被告知要抬起另一只手。当他们的手浸入水中时，还将要求他们以0-100的比例对疼痛进行评分，并将监测其心率和血压。

可以要求冲动性受试者玩游戏，在该游戏中，他们将使用计算机鼠标单击在屏幕上膨胀气球的气球泵。该任务的目的是在避免气球爆炸的同时获得最大的资金。该评估测试了他们的冲动。他们也可能会在PET扫描当天玩这个游戏。

C.3。宠物成像程序将在耶鲁大学宠物中心进行宠物程序。在开始任何成像程序之前，将对女性受试者进行尿液妊娠检查。如果测试为正，则将取消扫描。受试者至少将获得2次PET扫描。第三扫描是可选的。

PET扫描：在进行PET扫描之前，将在3.0 Tesla Siemens Trio摄像机上获得T1加权MRI，以排除任何脑部异常，并在图像分析中进行解剖参考。

当受试者仰卧在扫描仪床上时，将获得PET扫描。静脉导管将用于静脉内施用放射性示例，并可能用于额外的静脉抽血。在PET扫描之前，有经验的医生将插入径向动脉导管，以绘制动脉血样品进行代谢物分析，并确定血浆放射性的分数，使其与蛋白质无结合。

输注放射性示踪剂需要210分钟（3.5小时）。受试者将扫描2小时（从放射线示射输注开始后90分钟开始）。

[18F] NCFHEB将在PET扫描天合成并在3.5小时内以360分钟的KBOL进行恒定注入，并在PET扫描天进行施用。 PET数据将在MCT上获取。每次PET扫描的开头或结尾将进行6分钟的传输扫描以纠正衰减。将采用动脉血液样本以获得由代谢物校正的[18F] NCFHEB输入函数。放射性示踪剂输注后90-120分钟将测量基线受体的可用性。然后，受试者将在125分钟的扫描仪中开始挑战（NIDA EC或JUUL EC，平衡顺序），持续5分钟。此后，尼古丁扫描后将持续到4小时输注。生命体征（血压，脉搏，呼吸）和ECG将在放射性示例之前和之后获得。第二次PET扫描将遵循相同的程序。

EC的使用：受试者将接受2次不同的扫描，并将吹出两种EC产品之一（以随机顺序，平衡为平衡）：“ Juul” 5％（50 mg/ml），这是一种常见的市售未修饰的尼古丁盐EC，和（2 ）JUUL 3％（30 mg/ml），较低的尼古丁强度产物。仅使用烟草风味。将在PET扫描之前的预约进行培训，以使吸烟者熟悉该研究中使用的EC产品。与吸烟相比，将建议受试者从EC（至少3-4秒）中抽出更长的时间（至少3-4秒）。在每次扫描过程中，将指示受试者在EC上吹达5分钟。在EC使用过程中，将直接观察到所有用户，以确保他们没有操作设备的任何问题。如果有的话，可以如前所述使用的烟嘴可以使用。

使用常规香烟：可以为吸烟者提供第三次使用常规香烟的PET扫描，但学习完成并不需要。

血液样本：在PET扫描天，在放射性示踪剂给药之前和多个时间点（t = 0、0.3、1、3、5、10、20、20、30、60、60、90分钟挑战之后，将收集动脉血液样本） EC/香烟用于确定血液中的尼古丁浓度，该尼古丁浓度将使用具有剥离内部标准的液相色谱串联串联量质量光谱法测定。47这些数据将用于计算每种情况下尼古丁递送的药代动力学模式（CMAX，TMAX和TMAX和AUC用于尼古丁）。

图像分析和结果度量：列表模式PET数据将使用OSEM重建，并带有内置校正，以进行衰减，归一化，散射，随机，死时间和主题运动。53,54遵循图像重建后的53,54主题的MRI。感兴趣的区域（ROI）将使用与受试者的MRI图像相关的模板[解剖自动标记（AAL）]在解剖上定义。用于计算受体占用率的ROI将是：小脑，额叶，顶叶，颞叶和枕皮层，尾状，caudate，putamen，海马和杏仁核。之所以选择这些区域，是因为以前在β2*-NACHR研究中检查了它们，在人脑中具有显着的密度，并且与尼古丁的渴望和戒断特性有关。丘脑将不包括在内，因为在该区域中未达到注入大量注入范式。将使用组织中总放射性浓度与动脉等离子体中父浓度之间的平衡比估算分布VT的体积。基线VT将在输注开始后的90-120分钟估计，先前证明可以在脑后VT中建立良好的均衡，估计从输注开始后的180-210分钟（挑战后55-85分钟）。先前的初步数据表明，这是足够的时间来实现新的稳定状态。受体占用和VND将使用Lassen图方法估算。

• 药物：低强度尼古丁电子液体
  低强度尼古丁电子液体
• 药物：高强度尼古丁电子液体
  高强度尼古丁电子液体

• 实验：低强度，高强度
  干预措施：

  • 药物：低强度尼古丁电子液体
  • 药物：高强度尼古丁电子液体
• 实验：高强度，低强度
  干预措施：

  • 药物：低强度尼古丁电子液体
  • 药物：高强度尼古丁电子液体

纳入标准：

• 男性和女人，21-55岁
• 能够读写英语
• 能够自愿，书面知情同意
• 当前吸烟或电子烟的使用
• 寻求未处理
• 呼气CO> 10 ppm或尿cotinine> 50 ng/ml
• 同意仅使用研究中提供的电子烟产品
• 不天真地蒸发（3个或更长时间和12次或更多次）。

排除标准：

• 当前的医疗状况，例如神经，肺，心血管，内分泌，肾脏，肝脏或甲状腺病理
• 除尼古丁依赖性外
• 在过去的一年中，定期或目前使用任何处方，草药或非法精神药物，目前没有尿液毒理学证实的非法药物（包括大麻）
• 每周喝14杯以上的女性饮料或每周21杯饮料；
• 怀孕或护理的妇女
• 目前正在服用可能影响胆碱能系统或尼古丁替代疗法的人，以戒烟；
• MRI的禁忌症，例如其体内的幽闭恐惧症或金属，或者对诸如癌症患者史的宠物，不太可能能够完成由PI或研究助理确定的研究
• 研究开始后的八周内献血
• 出血障碍或目前正在服用抗凝剂的史（例如香豆素，肝素，pradaxa，Xarelto）
• 已知对丙二醇的超敏反应
• 计划以设定的目标或退出尝试戒烟
• 未经治疗的未解决的急性肺部疾病（作为例子），反复出现的支气管炎和反应性气道疾病）。
• 健康问卷中的慢性症状会干扰监测烟并发症
• 天真蒸发（蒸发少于3个月，小于12次）

C.2主题纳入和评估总体研究设计：非EC-NOTY吸烟者或电子烟使用者（n = 20）将在每次PET扫描之前5天弃用烟草吸烟/尼古丁产品。按随机顺序（平衡），在接受受体可用性的基线量化后，使用EC时将扫描受试者：（1）“ Juul” 5％，这是一种常见的市售未修饰的尼古丁盐EC，（2）JUUL 3％，3％，3％，较低的尼古丁强度产品。第三次可选扫描可能会进行烟雾，但不需要进行香烟。在扫描过程中，将测量受试者在EC使用后接受动脉血液尼古丁水平测量，并测量尼古丁戒断，渴望和药物作用的测量。每次PET扫描之前，将需要进行5-7天的戒烟时间，以确保不残留的尼古丁占据受体。在随后的戒烟/PET扫描之前，第一次扫描2-3周后，受试者将像往常一样恢复吸烟。应要求将为受试者提供戒烟资源。

C.2.b受试者：将招募二十个非EC-NO-EEC依赖的吸烟者或电子烟使用者进行研究。所有研究主题将根据耶鲁大学机构审查委员会（人类调查委员会）的指南招募。吸烟者将通过IRB批准的广告从社区招募。完成知情同意后，受试者将进行精神病，身体和神经系统检查，实验室检查和心电图（EKG）（EKG）（请参阅下面的C.2.C临床评估）。这被认为是筛选阶段。受试者将被排除在主要的医学，神经系统或精神病，异常实验室检查或宠物或MR成像的禁忌症中。在筛查中，在每次成像会议之前进行尿液药物筛查和妊娠试验，并将参与者排除在阳性测试中。可以在人类受试者部分的保护中找到详细的包含/排除标准。所有妇女都必须进行阴性尿液妊娠试验，并且所有受试者都必须在放射性示例之前进行负尿液药物毒理学测试。

C.2.C临床评估：将对所有摄入量的所有受试者进行标准化电池对于抑郁，焦虑和愤怒），流行病学研究中心抑郁症量表），焦虑症' target='_blank'>焦虑症（状态特征焦虑清单），冲动性（短暂 - 巴拉特冲动量表，吸烟依赖性（Promis Nicotine依赖量表），渴望吸烟（Tiffany QSU）和戒烟（明尼苏达州尼古丁戒断量表）。挑战前和之后的每个扫描将重复情绪和吸烟评估。产品喜欢，渴望和药物效果问卷（DEQ）将以主观尺度评估（0-100，低至高） ）立即使用产品。DEQ将测量由七个项目组成的急性效应：药物强度，高，感觉受刺激，好效果，不良影响，想要更多的药物和药物喜欢。

基线和每次PET扫描/电子烟挑战之后：

• 健康问卷
• PROMIS呼吸困难的严重性项目池
• Promis呼吸困难特征
• Promis疲劳短形式
• 慢性病治疗（FAT）咳嗽项目的功能评估
• 题为“健康问题评估”（并通过IRES中的评论提供）的健康问卷将添加到协议中，并将在摄入量和每次曝光之前完成。请注意，不会招募具有慢性症状的潜在受试者，这些受试者不会纳入监测烟并发症的监测。

症状变化或单个严重症状变化的积极发现将触发临床转诊至治疗医师或急诊室。

C.2.D应急管理：所有吸烟者/电子烟的用户将被帮助在每次PET扫描之前使用非常成功的应急管理技术戒酒5至7天，这些技术以前在实验室中已广泛使用。在第一次PET扫描后，受试者将像往常一样恢复吸烟，并在下一次PET扫描之前重复戒烟。过去，通过招募非治疗的吸烟者，这种技术在过去的多个挑战之后都成功地研究了受体的尼古丁占用。每天都会在节制过程中满足受试者的支持，并获得CO和尿液可替宁水平，以确保戒烟。无法戒除烟草吸烟的受试者将从研究中撤回。

c.2.e-将要求MRI/认知测试对象访问Anlyan医学研究与教育中心（TAC，Cedar Street 300）的MRRC，以对其大脑进行MRI（磁共振成像）扫描。 MRI的目的是帮助我们在PET扫描中确定其大脑的不同区域。

MRI扫描是获取身体内部图片的日常方式。将询问受试者在朝着MRI系统迈进之前是否携带任何金属物体。这些物体将在MRI中心的一个锁定柜中持有，以避免在接近磁铁时飞向磁铁。还将要求他们穿过金属探测器。他们将被要求躺在MRI扫描仪中约30分钟。扫描仪看起来像一条深隧道。他们将从头到膝盖在隧道内。他们将无法看到它，但是他们将能够听到我们的声音，并听到他们想说什么。当相机拍照时，他们会听到鼓声的声音。如果他们在扫描过程中感到不舒服，那么扫描将在他们希望的任何时候结束。但是，如果他们无法完成MRI扫描，他们将无法参加这些研究。

他们的记忆，注意力和注意力都可能进行两次测试。这将大约需要1小时。他们将在这些会话之间休息。这可能发生在MRI扫描的同一天，或者在PET扫描之前的第二天，如果他们和员工的时间表更好。

在这次访问期间，他们可能会玩一个名为“ Face Game”的电脑游戏。面部游戏的目标是赢得尽可能多的钱。每当他们在屏幕上看到脸部时，他们可能会快速，正确地按下键盘上的两个钥匙之一来赚钱。如果他们认为脸上的嘴很长，他们会按一个键，如果他们认为这很短，则会按键。

还可以要求冷施加任务受试者在研究期间参加冷压缩任务，以测试人体对冷水的生理反应。他们将被要求将您的手浸入维持在0-4°C的一桶冰冷水中。当他们开始感到疼痛并将手从水中移开时，他们将被告知要抬起另一只手。当他们的手浸入水中时，还将要求他们以0-100的比例对疼痛进行评分，并将监测其心率和血压。

可以要求冲动性受试者玩游戏，在该游戏中，他们将使用计算机鼠标单击在屏幕上膨胀气球的气球泵。该任务的目的是在避免气球爆炸的同时获得最大的资金。该评估测试了他们的冲动。他们也可能会在PET扫描当天玩这个游戏。

C.3。宠物成像程序将在耶鲁大学宠物中心进行宠物程序。在开始任何成像程序之前，将对女性受试者进行尿液妊娠检查。如果测试为正，则将取消扫描。受试者至少将获得2次PET扫描。第三扫描是可选的。

PET扫描：在进行PET扫描之前，将在3.0 Tesla Siemens Trio摄像机上获得T1加权MRI，以排除任何脑部异常，并在图像分析中进行解剖参考。

当受试者仰卧在扫描仪床上时，将获得PET扫描。静脉导管将用于静脉内施用放射性示例，并可能用于额外的静脉抽血。在PET扫描之前，有经验的医生将插入径向动脉导管，以绘制动脉血样品进行代谢物分析，并确定血浆放射性的分数，使其与蛋白质无结合。

输注放射性示踪剂需要210分钟（3.5小时）。受试者将扫描2小时（从放射线示射输注开始后90分钟开始）。

[18F] NCFHEB将在PET扫描天合成并在3.5小时内以360分钟的KBOL进行恒定注入，并在PET扫描天进行施用。 PET数据将在MCT上获取。每次PET扫描的开头或结尾将进行6分钟的传输扫描以纠正衰减。将采用动脉血液样本以获得由代谢物校正的[18F] NCFHEB输入函数。放射性示踪剂输注后90-120分钟将测量基线受体的可用性。然后，受试者将在125分钟的扫描仪中开始挑战（NIDA EC或JUUL EC，平衡顺序），持续5分钟。此后，尼古丁扫描后将持续到4小时输注。生命体征（血压，脉搏，呼吸）和ECG将在放射性示例之前和之后获得。第二次PET扫描将遵循相同的程序。

EC的使用：受试者将接受2次不同的扫描，并将吹出两种EC产品之一（以随机顺序，平衡为平衡）：“ Juul” 5％（50 mg/ml），这是一种常见的市售未修饰的尼古丁盐EC，和（2 ）JUUL 3％（30 mg/ml），较低的尼古丁强度产物。仅使用烟草风味。将在PET扫描之前的预约进行培训，以使吸烟者熟悉该研究中使用的EC产品。与吸烟相比，将建议受试者从EC（至少3-4秒）中抽出更长的时间（至少3-4秒）。在每次扫描过程中，将指示受试者在EC上吹达5分钟。在EC使用过程中，将直接观察到所有用户，以确保他们没有操作设备的任何问题。如果有的话，可以如前所述使用的烟嘴可以使用。

使用常规香烟：可以为吸烟者提供第三次使用常规香烟的PET扫描，但学习完成并不需要。

血液样本：在PET扫描天，在放射性示踪剂给药之前和多个时间点（t = 0、0.3、1、3、5、10、20、20、30、60、60、90分钟挑战之后，将收集动脉血液样本） EC/香烟用于确定血液中的尼古丁浓度，该尼古丁浓度将使用具有剥离内部标准的液相色谱串联串联量质量光谱法测定。47这些数据将用于计算每种情况下尼古丁递送的药代动力学模式（CMAX，TMAX和TMAX和AUC用于尼古丁）。

图像分析和结果度量：列表模式PET数据将使用OSEM重建，并带有内置校正，以进行衰减，归一化，散射，随机，死时间和主题运动。53,54遵循图像重建后的53,54主题的MRI。感兴趣的区域（ROI）将使用与受试者的MRI图像相关的模板[解剖自动标记（AAL）]在解剖上定义。用于计算受体占用率的ROI将是：小脑，额叶，顶叶，颞叶和枕皮层，尾状，caudate，putamen，海马和杏仁核。之所以选择这些区域，是因为以前在β2*-NACHR研究中检查了它们，在人脑中具有显着的密度，并且与尼古丁的渴望和戒断特性有关。丘脑将不包括在内，因为在该区域中未达到注入大量注入范式。将使用组织中总放射性浓度与动脉等离子体中父浓度之间的平衡比估算分布VT的体积。基线VT将在输注开始后的90-120分钟估计，先前证明可以在脑后VT中建立良好的均衡，估计从输注开始后的180-210分钟（挑战后55-85分钟）。先前的初步数据表明，这是足够的时间来实现新的稳定状态。受体占用和VND将使用Lassen图方法估算。

• 药物：低强度尼古丁电子液体
  低强度尼古丁电子液体
• 药物：高强度尼古丁电子液体
  高强度尼古丁电子液体

• 实验：低强度，高强度
  干预措施：

  • 药物：低强度尼古丁电子液体
  • 药物：高强度尼古丁电子液体
• 实验：高强度，低强度
  干预措施：

  • 药物：低强度尼古丁电子液体
  • 药物：高强度尼古丁电子液体

纳入标准：

• 男性和女人，21-55岁
• 能够读写英语
• 能够自愿，书面知情同意
• 当前吸烟或电子烟的使用
• 寻求未处理
• 呼气CO> 10 ppm或尿cotinine> 50 ng/ml
• 同意仅使用研究中提供的电子烟产品
• 不天真地蒸发（3个或更长时间和12次或更多次）。

排除标准：

• 当前的医疗状况，例如神经，肺，心血管，内分泌，肾脏，肝脏或甲状腺病理
• 除尼古丁依赖性外
• 在过去的一年中，定期或目前使用任何处方，草药或非法精神药物，目前没有尿液毒理学证实的非法药物（包括大麻）
• 每周喝14杯以上的女性饮料或每周21杯饮料；
• 怀孕或护理的妇女
• 目前正在服用可能影响胆碱能系统或尼古丁替代疗法的人，以戒烟；
• MRI的禁忌症，例如其体内的幽闭恐惧症或金属，或者对诸如癌症患者史的宠物，不太可能能够完成由PI或研究助理确定的研究
• 研究开始后的八周内献血
• 出血障碍或目前正在服用抗凝剂的史（例如香豆素，肝素，pradaxa，Xarelto）
• 已知对丙二醇的超敏反应
• 计划以设定的目标或退出尝试戒烟
• 未经治疗的未解决的急性肺部疾病（作为例子），反复出现的支气管炎和反应性气道疾病）。
• 健康问卷中的慢性症状会干扰监测烟并发症
• 天真蒸发（蒸发少于3个月，小于12次）