肺癌不仅是男性和女性最常见的三种癌症类型，而且还是新加坡和美国癌症死亡率的主要原因。基于铂的化学疗法目前是肺癌患者药物治疗的中流疗法，尽管它仅暂时缓解与疾病有关的症状。最近，使用分子靶向疗法已导致患者子集的生存率提高。特别是，来自肺活检的EGFR或ALK突变的存在预测，分别使用酪氨酸激酶抑制剂或Crizotinib分别提高了反应率和无进展生存率。重要的是，EGFR突变在亚洲患者（约35％）的肿瘤中与非亚洲人（约10％）更为常见。

固体癌症患者死亡率的主要原因是通过血液循环传播引起的转移。近年来，甚至在发生明显转移发生之前，检测到循环中肿瘤细胞的存在的能力也在迅速发展。已经发现了几种癌症中循环肿瘤DNA（CTDNA）和循环肿瘤细胞（CTC）的预后重要性，并且该技术被广泛认为具有主要的临床和生物学意义。这项研究评估了CTDNA和CTC在肺癌患者中预测疾病活性和药物反应中的使用，并有助于补充现有方法，以实现非侵入性和准确的手段来指导治疗决策。

实际上，将CTDNA和CTC用作风险评估和治疗监测的标志物是有利的，因为可以定期监视它，因此可以定期监视。这将更好地调整我们的监视计划和治疗方法，以优化疾病结果。

研究人员开发了一个EGFR突变检测试剂盒，该试剂盒在超敏水平下检测3个主EGFR突变。研究人员将其应用于多种临床材料，包括福尔马林固定石蜡嵌入的DNA，胸膜积液，循环DNA以及循环肿瘤细胞，发现这些套件可以具有高灵敏度和特异性来拾取这些突变。

生物工程研究所和纳米技术研究所开发了一种有效隔离循环肿瘤细胞的微膜膜滤清器。该设备利用癌细胞和血细胞之间的尺寸差异，以使癌细胞捕获癌细胞在10分钟内从4.5毫升全血的回收率捕获，这是在10分钟内捕获的，这证明了癌细胞掺入全血样品中。该设备包含一个密集的孔阵列（> 8000孔/mm^2），优化的孔直径为10 µm。流体调节和细胞计数是通过简单的真空抽水和实验室荧光显微镜实现的。将捕获的细胞用抗EPAM-PE染色，用于CTC，白细胞抗CD45-FITC和4'，6-二胺2-苯基吲哚（DAPI）用于细胞核。使用荧光显微镜表征了CTC，鉴定具有抗EPMAN阳性，抗CD45阴性和DAPI阳性。

因此，从我们的初步研究中，研究人员假设我们的技术对于分离循环肿瘤细胞有用，并且这些循环肿瘤细胞可能与疾病活性相关，并且在健康个体中没有发现。

与常规放射学方法相比，对循环肿瘤DNA和循环肿瘤细胞的监测可能会在确定反应方面提供临床上有价值的提前时间。

将招募一群患者进行纵向队列研究，其中收集组织和血液以用于生物标志物。没有任何干预措施。该研究将在三年内进行。

病人样本和同意

前瞻性六年（2014年8月至2020年8月），约有150名被诊断出患有肺癌的患者，这些患者对本研究提供了完全知情的同意，将有肿瘤和/或血液和/或积液。来自其他位置的患者可能会转介到这些地点。

如果患者不同意收集血液进行临床研究，但已同意并签署了知情的手术同意书，以收集冷冻或福尔马林固定的石蜡嵌入材料，以进行研究目的，包括活检，细胞学或外科手术切除，作为标准手术形式的一部分，是标准手术形式的一部分，即肿瘤组织和正常组织将从樟宜综合医院收集。肿瘤分期和分级是从个人临床医生研究者对病理报告的审查以及病例注释的评估中获得的。书面知情同意书，以分析前瞻性收集的临床样本，包括所有患者的同意，以获取用于研究目的的活检肺组织样本。除了推荐的手术外，不需要其他其他程序来去除患者的组织以评估肿瘤，无论是支气管镜检查，CT引导的活检还是开放手术，具体取决于医师的评估。一旦常规程序完成，将选择其中一种组织出于研究目的。 “研究组织块”将被匿名化，并批次批次进行病理学家检查/验证肿瘤的存在。

每位前瞻性患者将提供3个基线的3个EDTA管（总计约30毫升）。尿液（〜100ml）将同时收集尿液DNA。

这些血液样本将在3000 rpm下离心10分钟，用于收集血清和血浆，以验证通过微阵列分析鉴定的生物标志物，选择血液中的候选蛋白质。

如治疗临床医生的建议，将作为常规治疗程序的一部分获得积液（胸膜或腹膜），否则液体将被丢弃。为了本研究的唯一目的，绝不会获得积液。

将在评估CTC，外周血单核细胞，DNA，RNA，蛋白质以及其他遗传和分子材料方面进行下游工作。应用的技术将包括定量PCR，测序，流式细胞术和免疫表型，免疫组织化学，荧光原位杂交，培养等。

突变分析：

遗传物质将从被困在筛子和血浆中的3-5 mL材料以及相关材料（例如积液或尿液）中提取。通过定量PCR使用自定义设计的引物和/或测序对此进行分析。遗传材料还将使用下一代测序技术进行介绍，以鉴定临床上可行的突变，例如BRAF，ALK，ROS，RET等。

样品将被新鲜处理。任何剩余的样品都将分为Buffy毛皮和血浆，并存储在液氮和/或-80C中。

数据和标本被取消识别用于实验室处理。每个站点将保留将患者链接到标本的信息。这是确定随访的必要条件。

确定的数据将位于网络的PC上，该PC位于樟宜综合医院和机构防火墙后面。单独识别的数据将保留在医院，不会与实验室共享。

研究完成后，数据将用于下游项目。

纳入标准：

• 怀疑患有肺癌的患者（由医生确定）。

排除标准：

• 没有任何。