目的：糖尿病和牙周炎是两种慢性炎症性疾病，分享了特定的疗法机制，并引起严重的炎症和破坏。本研究的目的是确定过氧化物酶体增殖激活受体（PPAR）-γ，类视黄素X受体（RXR）-α，维生素D受体（VDR）和核因子Kappa B（NF-κB）的受体表达健康的牙龈和患病的牙龈样本中的表达。

方法：45名参与者为1；健康对照（C），2；牙周炎组（P）和3;纳入了糖尿病和牙周炎组（DP）。在所有参与者中都记录了斑块指数（PI），牙龈指数（GI）和临床依恋水平（CAL）。从每个参与者那里获得了两次牙龈活检，其中一名进行了组织学组织加工，而另一个进行了核受体的RT-PCR分析。评估了炎症和成纤维细胞计数，PPAR-γ，RXR-α和VDR。

结果：DP组的成纤维细胞最低，在健康组中最高。在RT-PCR分析中，健康对照中的PPAR-γ，VDR，RXR和NF-κB表达较高，在其他组中相似。免疫组织化学分析也显示出相似的结果。

结论：结果得出的结论是，健康的牙龈样品具有较高的PPAR-γ，RXR，VDR和NF-κB表达，并且免疫组织化学结果也支持了这一发现。健康的牙龈含有较高的成纤维细胞和较低的炎性细胞。

本研究方案得到了Tokat Gaziosmanpasa大学医学伦理委员会伦理委员会的批准。该研究被设计为一项横断面临床研究，并在牙科牙科牙科学院牙周病学系进行了横断面。从所有参与者那里获得了知情同意，并由经验丰富的临床医生（HBY）进行了详细的口腔和放射学检查。

该研究招募了42名参与者，每组14名参与者。研究组如下。

健康对照组（C，平均年龄41.05±1.80，七名男性，七名女性）牙周炎患者患有3级B（P，平均年龄42.35±1.92，七名男性，七名女性）患有糖尿病和牙周炎患者患有3级C级C ，（DP，平均年龄41.09±1.28，七个男人，七个女性）

所有患者和健康的人都经过了详细的口腔检查，牙周健康和牙周炎诊断均基于2017年国际世界牙周疾病和条件分类的牙周健康和疾病的近期分类所定义的标准[21] 。

所有参与者从来都不是吸烟者。排除标准是可能影响炎症状态的条件，存在少于十或牙齿过度，烟草或任何药物使用，妊娠或泌乳的存在以及在过去六个月内存在抗生素或牙周治疗。本研究中的糖尿病患者的HBA1C值大于7.0，即使他们接受了糖尿病治疗。不包括低于7.0的HBA1C值的糖尿病患者。

临床测量值临床参数是牙菌花指数（PI），牙龈指数（GI）和临床附着水平（CAL），所有分析均在活检程序之前进行。分别记录了全口测量和相关牙齿的测量值。 CAL是从水泥 - 云母连接到牙周口袋底部的测量，威廉姆斯的类型牙周探针用于测量（Hu-Friedy Co.，美国伊利诺伊州芝加哥，美国伊利诺伊州）。 PI和GI测量是通过探险家（Hu-Friedy Co.，芝加哥，伊利诺伊州，美国）进行的。所有分析均从六点，三个分别从颊侧进行，三个从pa的方面作为两种牙齿的介体，中间和远端部位进行。记录了六个测量值的平均值。

牙龈样品的收集牙龈活检是根据先前研究的协议获得的[22]。从每个参与者那里获得了两次牙龈活检。牙周健康个体中的牙龈采样是通过常规治疗方案中的冠状延长程序或正畸指示提取牙齿提取的。在牙周炎组中，活检是从带有手术牙周手术次要的牙龈组织中获得的。所有活检都是从后上颌牙齿（牙齿＃4，＃5，＃6或＃7）获得的。

首先，进行了局部麻醉，并用来自区域的组织剪刀解剖牙龈样品，要求牙龈形态受损的患者或在拔牙之前进行牙龈切除术/冠状延长手术，以指示健康个体的正畸治疗。至于牙周炎患者，在牙龈计划的缩放和根计划过程中，使用组织剪刀从具有严重牙龈炎症的牙龈区域进行了牙龈样本。将每个参与者的一个牙龈样本立即放入10％中性的福尔马林缓冲官48小时中，并进行组织学组织加工。每个参与者的其他样本立即以-80°C冷冻，直到分析当天。

组织病理学评估所有组织学程序均由经验丰富的盲研究人员（FG）进行。首先将接受组织学组织加工的牙龈样品从福尔马林洗涤并清洗，并用酒精系列脱水。然后用二甲苯清除所有组织，并嵌入石蜡块中。每个块为串行切片和每个块中的三个部分都选择了苏木精蛋白（H＆E）染色。通过光学显微镜从1000倍放大倍率下的H＆E染色玻片评估成纤维细胞和炎症细胞浸润。

对于成纤维细胞和炎症细胞评估，评估了结缔组织邻域附近牙龈上皮的牙龈区域。在1000倍放大率下选择了10.000 µm2面积的细胞计数框架。框架内的总炎症细胞（中性粒细胞，淋巴细胞，嗜酸性细胞和巨噬细胞）被计为炎症细胞计数。成纤维细胞也被计数。测量是从三个不同点进行的，并记录了这三个测量值的平均值[23]。

如先前的研究[23-26]，进行了PPAR-γ，RXR-α和VDR免疫组织化学免疫组织化学。每个参与者的每个免疫组织化学染色选择了三个部分。首先，将所有载玻片均脱蜡并用酒精系列脱水。用蒸馏水洗涤后，在70°C下通过柠檬酸钠bu（pH 6.0）进行抗原检索，然后用3％的过氧化氢处理抑制内源性过氧化物酶活性。过氧化氢处理后，将所有载玻片与正常兔血清孵育30分钟。正常血清孵育后，制备一抗稀释剂并将样品施加到4°C的加湿室中过夜。主要抗体是山羊多克隆抗PPAR-γ抗体（1：250），抗RXR-α抗体（1：250）和抗VDR抗体（1：250）。初级抗体孵育后，将所有载玻片用磷酸盐缓冲溶液（PBS）洗涤3次，持续五分钟（3x5），并将生物素化的免疫球蛋白G施加30分钟。再次将3x5 PBS洗涤，所有样品均暴露于链霉亲和素 - 甲状腺酸素过氧化物酶偶联的试剂中，持续30分钟。用3x5 PBS洗涤后，用AEC Chromogen处理所有切片以可视化染色。用Meyer的苏木精进行了反染色，并安装了切片。允许干燥两天后，使用光学显微镜在400倍放大倍率下检查样品[23，24]。

在每个部分的三个不同区域进行了免疫组织化学的半定量H得分分析分析免疫组织化学评估，并对每个患者进行了三个部分。为每个参与者进行了九项测量。所有细胞均根据其染色标记为“ 0”，低染色“ 1”，轻度染色“ 2”和密集的染色“ 3”。通过公式（∑PI（I+L））将染色得分转换为“ H分数”，该值是免疫组织化学的常用值[23，24]。在此公式中，我显示了染色强度评分和PI：指示染色细胞的百分比。

RT-PCR分析用于基因的引物显示在表1中。根据先前的研究，RNA分离和RT-PCR分析[27]。简而言之，为了进行RT-PCR分析，将第一个牙龈组织匀浆并进行超声处理以揭示组织和组织上清液中的RNA。然后将上清液提交给总mRNA隔离步骤。用Qiazole处理的组织，然后允许在振动筛中孵育5分钟。在5分钟结束时，将氯仿添加到包含细胞的培养基中，并在室温下孵育3分钟，然后将样品离心。在离心机的末端，管子顶部的上清液转移到另一根管。之后，将异丙醇添加到上清液中并在室温下孵育10分钟，然后重复离心步骤。在离心结束时，沉积在底部的沉积物用75％乙醇洗涤，将剩余的上清液再次离心，并悬浮在没有RNase的纯无菌水中。通过分光光度法测定mRNA。然后使用QRT-PCR试剂盒，使用靶向感兴趣基因的特定引物将一个µg mRNA转化为单步cDNA，后来借助QRT-PCR（Verso，Thermo Fisher Scientific，Massachusetts，Massachusets，美国）鉴定了基因） 。将结果标准化为β-肌动蛋白对照基因。

统计分析基于先前的研究设计，该研究的能力超过85％[25]。 IBM SPSS软件用于统计分析。一个样品KS测试用于测试正态性。对于成纤维细胞计数，炎症细胞计数和CAL，ANOVA随后是Tukey测试。对于其他参数，使用了Mann Whitney U和Kruskal Wallis测试。数据表示为平均值±SD或适当的百分比。 p <0.05被认为具有统计学意义。

该研究招募了42名参与者，每组14名参与者。研究组如下。

健康对照组（C，平均年龄41.05±1.80，七名男性，七名女性）牙周炎患者患有3级B（P，平均年龄42.35±1.92，七名男性，七名女性）患有糖尿病和牙周炎患者患有3级C级C ，（DP，平均年龄41.09±1.28，七个男人，七个女性）

• 糖尿病
• 牙周炎

• 组（C）
  健康对照组
  干预：程序：牙龈活检
• 组（P）
  牙周炎组
  干预：程序：牙龈活检
• 组（DP）
  糖尿病和牙周炎组
  干预：程序：牙龈活检

纳入标准：

• 牙周健康

排除标准：

• 吸烟者
• 炎症状态
• 少于十或超过牙齿的存在
• 用药

目的：糖尿病和牙周炎是两种慢性炎症性疾病，分享了特定的疗法机制，并引起严重的炎症和破坏。本研究的目的是确定过氧化物酶体增殖激活受体（PPAR）-γ，类视黄素X受体（RXR）-α，维生素D受体（VDR）和核因子Kappa B（NF-κB）的受体表达健康的牙龈和患病的牙龈样本中的表达。

方法：45名参与者为1；健康对照（C），2；牙周炎组（P）和3;纳入了糖尿病和牙周炎组（DP）。在所有参与者中都记录了斑块指数（PI），牙龈指数（GI）和临床依恋水平（CAL）。从每个参与者那里获得了两次牙龈活检，其中一名进行了组织学组织加工，而另一个进行了核受体的RT-PCR分析。评估了炎症和成纤维细胞计数，PPAR-γ，RXR-α和VDR。

结果：DP组的成纤维细胞最低，在健康组中最高。在RT-PCR分析中，健康对照中的PPAR-γ，VDR，RXR和NF-κB表达较高，在其他组中相似。免疫组织化学分析也显示出相似的结果。

结论：结果得出的结论是，健康的牙龈样品具有较高的PPAR-γ，RXR，VDR和NF-κB表达，并且免疫组织化学结果也支持了这一发现。健康的牙龈含有较高的成纤维细胞和较低的炎性细胞。

本研究方案得到了Tokat Gaziosmanpasa大学医学伦理委员会伦理委员会的批准。该研究被设计为一项横断面临床研究，并在牙科牙科牙科学院牙周病学系进行了横断面。从所有参与者那里获得了知情同意，并由经验丰富的临床医生（HBY）进行了详细的口腔和放射学检查。

该研究招募了42名参与者，每组14名参与者。研究组如下。

健康对照组（C，平均年龄41.05±1.80，七名男性，七名女性）牙周炎患者患有3级B（P，平均年龄42.35±1.92，七名男性，七名女性）患有糖尿病和牙周炎患者患有3级C级C ，（DP，平均年龄41.09±1.28，七个男人，七个女性）

所有患者和健康的人都经过了详细的口腔检查，牙周健康和牙周炎诊断均基于2017年国际世界牙周疾病和条件分类的牙周健康和疾病的近期分类所定义的标准[21] 。

所有参与者从来都不是吸烟者。排除标准是可能影响炎症状态的条件，存在少于十或牙齿过度，烟草或任何药物使用，妊娠或泌乳的存在以及在过去六个月内存在抗生素或牙周治疗。本研究中的糖尿病患者的HBA1C值大于7.0，即使他们接受了糖尿病治疗。不包括低于7.0的HBA1C值的糖尿病患者。

临床测量值临床参数是牙菌花指数（PI），牙龈指数（GI）和临床附着水平（CAL），所有分析均在活检程序之前进行。分别记录了全口测量和相关牙齿的测量值。 CAL是从水泥 - 云母连接到牙周口袋底部的测量，威廉姆斯的类型牙周探针用于测量（Hu-Friedy Co.，美国伊利诺伊州芝加哥，美国伊利诺伊州）。 PI和GI测量是通过探险家（Hu-Friedy Co.，芝加哥，伊利诺伊州，美国）进行的。所有分析均从六点，三个分别从颊侧进行，三个从pa的方面作为两种牙齿的介体，中间和远端部位进行。记录了六个测量值的平均值。

牙龈样品的收集牙龈活检是根据先前研究的协议获得的[22]。从每个参与者那里获得了两次牙龈活检。牙周健康个体中的牙龈采样是通过常规治疗方案中的冠状延长程序或正畸指示提取牙齿提取的。在牙周炎组中，活检是从带有手术牙周手术次要的牙龈组织中获得的。所有活检都是从后上颌牙齿（牙齿＃4，＃5，＃6或＃7）获得的。

首先，进行了局部麻醉，并用来自区域的组织剪刀解剖牙龈样品，要求牙龈形态受损的患者或在拔牙之前进行牙龈切除术/冠状延长手术，以指示健康个体的正畸治疗。至于牙周炎患者，在牙龈计划的缩放和根计划过程中，使用组织剪刀从具有严重牙龈炎症的牙龈区域进行了牙龈样本。将每个参与者的一个牙龈样本立即放入10％中性的福尔马林缓冲官48小时中，并进行组织学组织加工。每个参与者的其他样本立即以-80°C冷冻，直到分析当天。

组织病理学评估所有组织学程序均由经验丰富的盲研究人员（FG）进行。首先将接受组织学组织加工的牙龈样品从福尔马林洗涤并清洗，并用酒精系列脱水。然后用二甲苯清除所有组织，并嵌入石蜡块中。每个块为串行切片和每个块中的三个部分都选择了苏木精蛋白（H＆E）染色。通过光学显微镜从1000倍放大倍率下的H＆E染色玻片评估成纤维细胞和炎症细胞浸润。

对于成纤维细胞和炎症细胞评估，评估了结缔组织邻域附近牙龈上皮的牙龈区域。在1000倍放大率下选择了10.000 µm2面积的细胞计数框架。框架内的总炎症细胞（中性粒细胞，淋巴细胞，嗜酸性细胞和巨噬细胞）被计为炎症细胞计数。成纤维细胞也被计数。测量是从三个不同点进行的，并记录了这三个测量值的平均值[23]。

如先前的研究[23-26]，进行了PPAR-γ，RXR-α和VDR免疫组织化学免疫组织化学。每个参与者的每个免疫组织化学染色选择了三个部分。首先，将所有载玻片均脱蜡并用酒精系列脱水。用蒸馏水洗涤后，在70°C下通过柠檬酸钠bu（pH 6.0）进行抗原检索，然后用3％的氧化氢' target='_blank'>过氧化氢处理抑制内源性过氧化物酶活性。氧化氢' target='_blank'>过氧化氢处理后，将所有载玻片与正常兔血清孵育30分钟。正常血清孵育后，制备一抗稀释剂并将样品施加到4°C的加湿室中过夜。主要抗体是山羊多克隆抗PPAR-γ抗体（1：250），抗RXR-α抗体（1：250）和抗VDR抗体（1：250）。初级抗体孵育后，将所有载玻片用磷酸盐缓冲溶液（PBS）洗涤3次，持续五分钟（3x5），并将生物素化的免疫球蛋白G施加30分钟。再次将3x5 PBS洗涤，所有样品均暴露于链霉亲和素 - 甲状腺酸素过氧化物酶偶联的试剂中，持续30分钟。用3x5 PBS洗涤后，用AEC Chromogen处理所有切片以可视化染色。用Meyer的苏木精进行了反染色，并安装了切片。允许干燥两天后，使用光学显微镜在400倍放大倍率下检查样品[23，24]。

在每个部分的三个不同区域进行了免疫组织化学的半定量H得分分析分析免疫组织化学评估，并对每个患者进行了三个部分。为每个参与者进行了九项测量。所有细胞均根据其染色标记为“ 0”，低染色“ 1”，轻度染色“ 2”和密集的染色“ 3”。通过公式（∑PI（I+L））将染色得分转换为“ H分数”，该值是免疫组织化学的常用值[23，24]。在此公式中，我显示了染色强度评分和PI：指示染色细胞的百分比。

RT-PCR分析用于基因的引物显示在表1中。根据先前的研究，RNA分离和RT-PCR分析[27]。简而言之，为了进行RT-PCR分析，将第一个牙龈组织匀浆并进行超声处理以揭示组织和组织上清液中的RNA。然后将上清液提交给总mRNA隔离步骤。用Qiazole处理的组织，然后允许在振动筛中孵育5分钟。在5分钟结束时，将氯仿添加到包含细胞的培养基中，并在室温下孵育3分钟，然后将样品离心。在离心机的末端，管子顶部的上清液转移到另一根管。之后，将异丙醇添加到上清液中并在室温下孵育10分钟，然后重复离心步骤。在离心结束时，沉积在底部的沉积物用75％乙醇洗涤，将剩余的上清液再次离心，并悬浮在没有RNase的纯无菌水中。通过分光光度法测定mRNA。然后使用QRT-PCR试剂盒，使用靶向感兴趣基因的特定引物将一个µg mRNA转化为单步cDNA，后来借助QRT-PCR（Verso，Thermo Fisher Scientific，Massachusetts，Massachusets，美国）鉴定了基因） 。将结果标准化为β-肌动蛋白对照基因。

统计分析基于先前的研究设计，该研究的能力超过85％[25]。 IBM SPSS软件用于统计分析。一个样品KS测试用于测试正态性。对于成纤维细胞计数，炎症细胞计数和CAL，ANOVA随后是Tukey测试。对于其他参数，使用了Mann Whitney U和Kruskal Wallis测试。数据表示为平均值±SD或适当的百分比。 p <0.05被认为具有统计学意义。

该研究招募了42名参与者，每组14名参与者。研究组如下。

健康对照组（C，平均年龄41.05±1.80，七名男性，七名女性）牙周炎患者患有3级B（P，平均年龄42.35±1.92，七名男性，七名女性）患有糖尿病和牙周炎患者患有3级C级C ，（DP，平均年龄41.09±1.28，七个男人，七个女性）

• 糖尿病
• 牙周炎

• 组（C）
  健康对照组
  干预：程序：牙龈活检
• 组（P）
  牙周炎组
  干预：程序：牙龈活检
• 组（DP）
  糖尿病和牙周炎组
  干预：程序：牙龈活检

纳入标准：

• 牙周健康

排除标准：

• 吸烟者
• 炎症状态
• 少于十或超过牙齿的存在
• 用药