• 通过流式细胞仪（一个研究FACS面板）评估通过免疫监测评估的外周免疫细胞种群的频率[时间范围：在开始治疗之前，在开始治疗后3和6周通过研究完成，平均为1年这是给出的
  作为常规检查过程中治疗过程的一部分，收集血液样本，然后通过流式细胞仪（一个研究小组）进行分析。分析了PBMC的表面抗原的频率，并在随访期间监测了特征的亚群。因此，与基线（在开始治疗之前）相比，将评估表面抗原频率的变化。这允许确定患者的个体免疫表型。
• 通过流式细胞仪（一个研究FACS面板）评估的外周免疫细胞种群的激活状态[时间范围：开始治疗前3和6周，治疗后3和6周通过研究完成，平均为1年 ]
  作为常规检查过程中治疗过程的一部分，收集血液样本，然后通过流式细胞仪（一个研究小组）进行分析。分析了PBMC表面抗原的表达水平，并在随访期间监测了表征的亚种群。因此，与基线相比（在开始治疗之前）将评估表面抗原表达水平的变化。这允许确定患者的个体免疫表型。

• 肝脏炎症（ALT）[时间范围：在开始治疗前3和6周之前，通过研究完成，平均1年]
  筛查肝脏炎症（血清Alt U/L）
• 肝脏炎症（AST）[时间范围：开始治疗前，治疗开始后3和6周，平均1年]
  筛查肝脏炎症（血清AST U/L）

在恶性黑色素瘤存在遥远转移的情况下，直到几年前，在恶性黑色素瘤存在遥远转移的情况下，平均生存时间为9个月。密集的研究工作导致了有希望的新的治疗策略及其临床应用的发展。其中包括对细胞分裂丝氨酸 - 硫代激酶BRAF的重要突变特异性抑制剂，例如vemurafenib，dabrafenib和encorafenib和encorafenib以及下游靶蛋白的抑制剂，有丝分裂原活化的蛋白激活蛋白激酶激酶（MEK），例如Tramegation蛋白激活双替尼和cobimetinib。

免疫治疗剂是第二类新的药物，在其中放置了转移性黑色素瘤的巨大希望。在免疫细胞上表达的表面分子的抗体介导的阻塞，称为免疫检查点，导致免疫系统激活。结果，触发了抗肿瘤免疫反应，这导致了转移性黑色素瘤的可观治疗成功。迄今为止，已经批准了三个检查点抑制剂用于治疗转移性黑色素瘤。 ipilimumab是一种结合细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）的抗体； pembrolizumab和nivolumab通过结合编程的死亡受体（PD1）引起免疫刺激。

但是，治疗对整个免疫系统的影响在很大程度上尚不清楚。对这些作用的全面理解对于能够进一步发展疗法并评估有用的联合疗法与其他免疫调节剂至关重要。

在该项目的框架内，在恶性黑色素瘤的全身疗法下，免疫反应的变化将被表征。分析的材料来自常规患者检查期间收集的血液样本。

分析的目的是精确表征不同疗法对免疫系统功能的影响。特别是，该研究将研究某些治疗剂是否可以削弱或激活免疫系统，因此除了对肿瘤细胞的直接作用外，还通过免疫调节介导间接治疗作用。从长远来看，研究人员希望利用获得的知识来进一步改善已经存在的恶性黑色素瘤的治疗策略，并通过对免疫系统的其他调节进行调节。

尽管最近在黑色素瘤治疗方面取得了突破，但该疾病晚期的预后仍然非常贫穷。所有黑色素瘤中有45-50％在编码丝氨酸 - 苏氨酸激酶的BRAF基因的密码子600中具有点突变。两个最常见的BRAF突变（V600E和V600K）组成型激活了MAP激酶信号传导途径，该途径驱动了癌细胞的增殖和存活。特定的BRAF V600抑制剂，例如vemurafenib，dabrafenib和encorafenib以及下游靶标MEK的抑制剂，例如Trametinib，Binimetinib和cobimetinib是BRAF阳性转移性植物瘤中非常有效的方案。

最近的研究表明，除了对肿瘤细胞的影响外，这些抑制剂还会影响免疫系统的细胞。例如，维美富尼导致外周血淋巴细胞的丧失。因此，周围CD4 +阳性细胞的数量随武犬替尼治疗而减少，而天然杀伤细胞（NK细胞）的数量增加。另一方面，初步研究表明，vemurafenib不影响B细胞和CD8 +阳性细胞。已经证明，vemurafenib却不能降低黑色素瘤患者的外周淋巴细胞的数量，并改变CD4 +阳性细胞的功能和表型，尽管两种药物均表现出可比的临床功效。因此，通过抑制剂（如vemurafenib或dabrafenib）对BRAF的选择性抑制作用对黑色素瘤患者的外周淋巴细胞群体具有重大影响。研究已经证明，BRAF的抑制可以诱导肿瘤浸润淋巴细胞侵入到黑色素瘤转移酶中。通过用BRAF抑制剂治疗，CD4 +和CD8 +阳性淋巴细胞的肿瘤浸润显着增强。此外，可以在这项研究中表明，免疫反应性细胞的数量与肿瘤大小的减小和肿瘤区域的坏死相关。迄今为止获得的数据表明，用BRAF抑制剂治疗会增加黑色素瘤抗原表达，从而促进T细胞细胞毒性。这导致了更有利的肿瘤微环境，用于协同靶向BRAF的治疗和免疫疗法。目前正在临床试验中评估这种治疗策略。

免疫治疗剂是第二类新的药物，在其中放置了转移性黑色素瘤的巨大希望。 ipilimumab是一种结合细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）的抗体，从而刺激T细胞活化和增殖。自2011年7月以来，该药物已被批准用于治疗转移性黑色素瘤，并显着提高了某些患者的生存率。此外，在2015年底，针对编程死亡受体（PD1）的单克隆抗体获得了欧洲药品委员会的批准，用于治疗不可切除或转移性黑色素瘤。 PD1是一种在T细胞上表达并在配体结合后抑制T细胞激活的受体。研究结果表明，用PD1或PD-L1拮抗剂阻止这种T细胞抑制作用是黑色素瘤和其他肿瘤实体的非常有效的治疗策略。

当前的数据表明，靶向治疗对肿瘤微环境以及免疫系统的调节和效应细胞有重大影响。但是，治疗对整个免疫系统的影响在很大程度上尚不清楚。对这些作用的全面理解对于能够进一步发展疗法并评估有用的联合疗法与其他免疫调节剂至关重要。

在这项研究的背景下，应确定免疫状态，例如在开始和系统治疗的转移性黑色素瘤的不同免疫细胞的数量和激活状态。为此，将10 mL的EDTA血作为符合准则的常规护理的一部分（研究中接受的血液样本每4周接受激酶抑制剂的治疗，每2周一次接受检查点抑制剂的治疗）。在治疗之前和期间采集的血液样本将通过流式细胞仪分析，免疫表型的变化将与对治疗的反应相关。通过这种方式，研究者希望确定预测性和预后标记。对免疫状态的评估应有助于优化黑色素瘤治疗的有效性。因此，重要的是要识别合适的标记并表征对肿瘤微环境产生影响的免疫细胞亚组。

因此，将来可以将对黑色素瘤患者免疫状态的评估纳入治疗策略中，以便将靶向疗法与免疫调节物质或免疫细胞富集的亚种群结合起来，以提高治疗的有效性。

• 检查点抑制剂
  转移性黑色素瘤患者接受了检查点抑制剂的全身疗法
• 激酶抑制剂
  转移性黑色素瘤患者接受了激酶抑制剂的全身治疗

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纳入标准：

• 存在转移性黑色素瘤预期通过免疫或靶向治疗治疗

排除标准：

• <18年